番茄2个ERF-B1亚族转录因子基因的克隆及其对生物和非生物胁迫响应

番茄2个ERF-B1亚族转录因子基因的克隆及其对生物和非生物胁迫响应

论文摘要

为进一步研究番茄ERF转录因子调控植物抗逆的分子机理,本研究以番茄浙杂-301为试验材料,分别克隆获得2个乙烯反应元件结合蛋白基因SlERF83和SlERF109,并对其进行序列及表达分析。结果表明,番茄SlERF83和SlERF109基因分别含有678 bp和669 bp的开放阅读框,编码225和222个氨基酸,各含有1个保守的AP2结构域,属于亲水性蛋白。进化分析表明,这2个ERF转录因子均属于AP2/ERF家族中ERF亚族的B1组。SlERF83和SlERF109三级结构都含有1个α-螺旋和3个β-折叠。酵母单杂交及β-半乳糖苷酶活性测定结果证明SlERF83转录因子可以与GCC-box结合。番茄2个ERF蛋白启动子含有多种逆境相关的顺式作用元件。采用荧光定量PCR检测SlERF83和SlERF109在非生物和生物胁迫下的表达,结果表明,高盐和干旱胁迫下,SlERF83和SlERF109基因的表达均被抑制;水杨酸处理能够诱导SlERF83和SlERF109基因的表达;茉莉酸甲酯处理下SlERF83表达水平提高,SlERF109表达量降低;番茄黄化曲叶病毒侵染下,SlERF83和SlERF109基因的表达均被抑制。SlERF83和SlERF109转录因子可能参与了番茄对生物及非生物胁迫的响应过程。本研究结果为进一步深入开展ERF转录因子调控番茄抗逆分子机制研究提供了一定的理论依据。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料与试剂
  •     1.1.1 植物材料及处理
  •     1.1.2 主要试剂和试剂盒
  •   1.2 试验方法
  •     1.2.1 总RNA提取及cDNA的合成
  •     1.2.2 番茄SlERF83和SlERF109基因的克隆
  •     1.2.3 序列分析
  •     1.2.4 酵母单杂交和β-半乳糖苷酶活性的测定
  •     1.2.5 番茄SlERF83和SlERF109基因的表达分析
  • 2 结果与分析
  •   2.1 番茄SlERF83和SlERF109基因的克隆
  •   2.2 番茄SlERF83和SlERF109基因的启动子作用元件分析
  •   2.3 SlERF83和SlERF109转录因子氨基酸序列比对和进化树分析
  •   2.4 番茄及其他物种ERF转录因子的氨基酸组成与理化性质分析
  •   2.5 番茄SlERF83与SlERF109转录因子疏水性/亲水性分析
  •   2.6 番茄SlERF83与SlERF109转录因子三维结构预测与分析
  •   2.7 番茄SlERF83转录因子在酵母中的转录激活活性鉴定
  •   2.8 番茄SlERF83与SlERF109基因的表达分析
  •     2.8.1 非生物胁迫
  •     2.8.2 激素处理
  •     2.8.3 番茄黄化曲叶病毒侵染
  • 3 讨论
  • 4 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 王雅慧,李彤,黄莹,刘洁霞,王枫,熊爱生

    关键词: 番茄,转录因子,乙烯反应元件结合蛋白,生物和非生物胁迫,酵母单杂交,响应

    来源: 核农学报 2019年10期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,园艺

    单位: 南京农业大学园艺学院/作物遗传与种质创新国家重点实验室/农业农村部华东地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室

    基金: 教育部新世纪优秀人才支持计划项目(NCET-11-0670),江苏省自然科学基金杰出青年基金(BK20130027),江苏高校优势学科建设项目(PAPD)

    分类号: Q943.2;S641.2

    页码: 1893-1904

    总页数: 12

    文件大小: 5529K

    下载量: 317

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