甜瓜自毒相关基因CmGST的克隆及其对自毒胁迫的响应

甜瓜自毒相关基因CmGST的克隆及其对自毒胁迫的响应

论文摘要

植物谷胱甘肽硫转移酶基因(GST)在清除生物和非生物胁迫产生的氧化损伤中扮演着重要的角色,为探究GST在根系分泌物介导的甜瓜自毒胁迫中的响应机制,该实验在转录组测序基础上,以甜瓜叶片cDNA为模板,采用RT-PCR技术获得了一个根系分泌物介导的甜瓜自毒作用密切相关的GST基因,命名为CmGST(GenBank登录号:AYU66762.1);对CmGST基因进行了相关生物信息学分析,同时对自毒胁迫过程中,CmGST的差异表达情况、谷胱甘肽硫转移酶(GST)活性和谷胱甘肽(GSH)含量进行了相关测定。结果显示:(1)CmGST基因含有完整开放阅读框(ORF)654 bp,编码217个氨基酸;CmGST蛋白为酸性亲水蛋白,且较为稳定,具有GST家族Tau亚家族的2个典型的保守结构域;CmGST蛋白与黄瓜的亲缘关系较近。(2)亚细胞定位结果表明CmGST定位于细胞质中。(3)qRT-PCR分析结果表明,CmGST在甜瓜根系和幼苗中均有表达,在正常生长的甜瓜幼苗中表达量相对稳定;自毒胁迫后在叶中的表达先降后升,后期迅速增加;在根系中变化趋势类似,但程度较为缓和。(4)GST活性和GSH含量分析表明,叶片中GST活性变化趋势与CmGST基因表达变化基本吻合;在根系中,GST活性呈现先升再降最后又升高的趋势;随胁迫时间增加,GSH含量在根系和叶片中均都有不同程度的增加,但根部含量低于叶片。研究认为,在自毒胁迫过程中,CmGST基因在甜瓜植株根和叶片均有相应表达水平的变化,参与了对根系分泌物介导的自毒胁迫响应。

论文目录

  • 1 材料和方法
  •   1.1 试验材料
  •   1.2 试验方法
  •     1.2.1 植物材料培养
  •     1.2.2 甜瓜植株根系分泌物的收集
  •     1.2.3 甜瓜幼苗的自毒胁迫处理
  •     1.2.4 甜瓜GST基因的克隆及生物信息学分析和亚细胞定位
  •     1.2.5 CmGST基因qRT-PCR分析及GST活性和谷胱甘肽 (GSH) 含量测定
  •     1.2.6 数据统计与分析
  • 2 结果与分析
  •   2.1 甜瓜CmGST克隆及序列分析
  •   2.2 甜瓜CmGST蛋白理化性质及结构分析
  •   2.3 甜瓜CmGST亚细胞定位
  •   2.4 甜瓜CmGST基因的生物信息学分析
  •   2.5 甜瓜CmGST基因在根系分泌物介导的自毒胁迫中的表达分析
  •   2.6 根系分泌物介导的自毒胁迫对GST活性和GSH含量的影响
  • 3 讨 论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 王景荣,张政达,樊佳茹,张贝贝,王革伏,张志忠

    关键词: 甜瓜,谷胱甘肽转移酶基因,自毒作用,根系分泌物

    来源: 西北植物学报 2019年07期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,农业科技

    专业: 生物学,园艺

    单位: 福建农林大学园艺学院福建农林大学-戴尔豪西大学联合实验室,加拿大戴尔豪西大学农学院

    基金: 福建农林大学创新专项基金(KFA17108A,KFA17347A),福建省级扶贫开发工作重点县人才支持计划专项(K1519060A)

    分类号: S652;Q943.2

    页码: 1172-1180

    总页数: 9

    文件大小: 4586K

    下载量: 123

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