不同启动子调控的两种半纤维素酶分泌表达的比较

不同启动子调控的两种半纤维素酶分泌表达的比较

论文摘要

为提高耐热木聚糖酶DSB和耐热甘露聚糖酶ManB在毕赤酵母GS115中分泌表达的酶活力,选择了3个调控蛋白表达能力较强的启动子PFLD1,PGAP和PTEF1,以PAOX1为参照,分别在毕赤酵母GS115中进行分泌表达.摇瓶发酵结果表明:PFLD1,PTEF1,PGAP和PAOX1能有效介导DSB和ManB的分泌,但其胞外酶活相差较大.对于DSB,使用PAOX1时酶活力明显高于PFLD1,PTEF1和PGAP,最高酶活达846 U/mL;对于ManB,使用PFLD1时酶活力高于PAOX1,最高酶活达222 U/mL.故在GS115中分泌表达DSB时选用PAOX1,而分泌表达ManB时选用PFLD1.

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 菌种与质粒
  •   1.2 工具酶及试剂
  •   1.3 培养基
  •   1.4 不同启动子序列的克隆及表达载体的构建
  •   1.5 重组毕赤酵母的构建和筛选
  •   1.6 重组菌的摇瓶发酵及酶活力测定
  •   1.7 SDS-PAGE电泳分析
  • 2 结果与讨论
  •   2.1 不同启动子基因片段的获得
  •   2.2 含不同启动子的DSB和ManB表达载体的构建
  •   2.3 不同启动子对木聚糖酶DSB表达水平的影响
  •   2.4 不同启动子对甘露聚糖酶ManB表达水平的影响
  •   2.5 各重组菌DSB或ManB胞内滞留情况的分析
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 熊海容,汪斌,杨青,张莉

    关键词: 启动子,巴斯德毕赤酵母,分泌表达,半纤维素酶

    来源: 中南民族大学学报(自然科学版) 2019年01期

    年度: 2019

    分类: 基础科学

    专业: 生物学

    单位: 中南民族大学生命科学学院

    基金: 湖北省技术创新专项重大项目(2018ABA093)

    分类号: Q78;Q55

    页码: 39-44

    总页数: 6

    文件大小: 1096K

    下载量: 139

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