牛多杀性巴氏杆菌znuA基因的原核表达及其免疫保护作用的研究

牛多杀性巴氏杆菌znuA基因的原核表达及其免疫保护作用的研究

论文摘要

为研究牛多杀性巴氏杆菌(P.multocida)高亲和力锌吸收蛋白znuA的免疫学活性及其免疫保护作用,本研究利用PCR方法扩增了P.multocida znuA基因,构建表达载体pET-28a-znuA,将其转化E.coli BL21后经诱导表达。表达产物经SDS-PAGE和western blot分析显示,重组蛋白约40 ku;以重组znuA蛋白免疫小鼠后用P.multocida菌株Y-1攻毒,结果显示重组znuA蛋白对免疫组小鼠保护率为60%,表明其具有免疫保护作用。本研究首次在原核系统中表达了P.multocida znuA蛋白,且验证了其免疫保护力,为深入探究znuA基因在P.multocida致病过程中的作用及其亚单位疫苗的开发奠定了基础。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 主要实验材料
  •   1.2 引物设计及znuA基因PCR扩增
  •   1.3 重组表达载体pET28a-znuA的构建
  •   1.4 重组蛋白原核表达[9]、纯化及western blot鉴定
  •   1.5 攻毒保护试验
  • 2 结果
  •   2.1 znuA基因克隆与重组表达载体的构建
  •   2.2 重组znuA蛋白的诱导表达及western blot鉴定
  •   2.3 重组蛋白znuA的动物免疫保护试验结果
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 嵇少泽,高云航,勾长龙,张喜庆,田佳琪,李晨,王思月

    关键词: 多杀性巴氏杆菌,保护性免疫

    来源: 中国预防兽医学报 2019年02期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 吉林农业大学动物科学技术学院

    基金: 肉牛产业技术体系废弃物处理与环境控制岗位(CARS-38),畜禽重大疫病防控与高效安全养殖综合技术研发(2016YFD0501400),畜禽养殖固体废弃物无害化处理及资源化利用技术研究(20170101073JC),养殖场固体废弃物处理功能性菌剂研发及资源化利用技术研究(JJKH20180643KJ)

    分类号: S852.61

    页码: 184-187

    总页数: 4

    文件大小: 221K

    下载量: 89

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