导读:本文包含了花粉介导法论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:花粉,基因,玉米,转基因,花粉管,自交系,蛋白。
花粉介导法论文文献综述
王晓敏,王耀辉,耿思宇,咸栓狮,杜春芳[1]（2018）在《利用花粉介导法获得油菜RNAi转基因植株》一文中研究指出以甘蓝型油菜7B为试验材料,利用花粉介导法将携带RNA干扰的HKL1基因的pCaMHKL1-RNAi质粒转入7B中,获得转基因油菜植株,通过PCR分别对T_1,T_2植株进行了转基因鉴定,并对转基因植株后代的生长发育进行研究。结果表明,T_2的RNAi植株与野生型植株相比,出真叶时间较晚,株型较矮小;qRT-PCR结果表明,RNAi植株中HKL1基因的相对表达量为野生型植株的24.6%~67.9%;不同的RNAi植株中HKL1基因的表达量各不相同;利用花粉介导法在甘蓝型油菜中进行RNAi质粒转化,外源基因可以在后代植株中稳定遗传。花粉介导法较之农杆菌侵染、基因枪法等基因转化方法操作更加简单、适用性更强。(本文来源于《山西农业科学》期刊2018年01期）
郭晓阳[2]（2017）在《花粉介导法获得转GFP基因玉米的农艺性状及遗传特性的分析》一文中研究指出玉米(Zea mays L.)属禾本科、玉米属植物,是世界上重要的粮食作物之一,有关玉米的遗传改良研究一直是农业科学领域重要的问题,玉米的遗传改良方法也深受关注。本实验采用超声波花粉介导法获得了转GFP基因玉米,旨在考察通过该转基因方法获得材料的农艺性状及遗传稳定性,本实验主要研究内容及结果如下:1.转GFP基因玉米的获得。利用超声波辅助花粉介导转化法将带有GFP基因的质粒导入自交系‘郑58’花粉中并人工授粉,获得结实植株6株,玉米籽粒15粒,结实率为13%。经PCR检测之后,其中6株为阳性植株。以收获的15粒种子为基数,用花粉介导法所获得T1代种子的阳性率约为40%。2.对转基因玉米自交后代农艺性状的分析。T2代转基因的玉米植株的田间农艺性状的调查分析显示,在茎粗上,除了T2-6之外,其它株系同对照相比均有显着性差异;除T2-5和T2-1株系出现诸如株高和穗位高的显着差异外,T2代转基因玉米植株同非转化对照组比较,它们主要的农艺性状基本一致。3.T2代转基因玉米植株的室内考种结果显示,除了T2-4和T2-5之外,其他株系的穗长与非转化对照组相比均有显着差异;所有株系的穗粗同对照组相比也均有显着性差异;在穗行数上有显着差异的株系为T2-2,T2-5和T2-6;但除了T2-1在行粒数和干穗重上有显着差异,其它株系在各考种项目上均无显着性差异;且各株系之间不同农艺性状的差异程度不同。4.通过对大田中种植的T2代转基因玉米观察表明:T2-5株系发生了较为明显的变异,表现为:气生根部分长出了玉米穗及玉米棒与玉米茎杆之间呈现约90o的夹角。5.对T2代玉米植株GFP基因遗传规律的分析得出:T2-1、T2-5和T2-6株系中的外源基因遵循孟德尔单基因显性基因的遗传分离规律。6.由转基因玉米RT-PCR检测的结果可分析得出:在T2代各株系的阳性植株中目的基因的表达量是不相同的,且同一个株系中不同植株的表达量也是各不相同的。7.对转基因玉米western-blot的结果分析得出:在不同的转基因玉米中,GFP蛋白的表达量是不同的,且有部分转基因玉米植株GFP基因发生了沉默,无GFP蛋白的表达。(本文来源于《山西师范大学》期刊2017-06-20）
杨慧珍,任志强,肖建红,卜华虎,刘惠民[3]（2016）在《花粉介导法获得耐草甘膦玉米植株及其耐性研究》一文中研究指出为获得耐草甘膦转基因玉米植株,进而研究其除草剂耐性及外源基因的遗传特性,以质粒p BI101-aroA-M12为外源基因供体,以玉米自交系昌‘7-2’为受体,采用花粉介导法将外源基因导入玉米自交系中。PCR扩增、Southern杂交分析的结果证明获得了54个转基因植株;对其后代株系的分子检测及田间生物学鉴定,结果证明目的基因可以稳定遗传给后代植株,且赋予和提高了转基因植株的除草剂耐性。目的基因在转化体中的遗传规律研究,结果显示导入的目的基因在F2受体植株中以3∶1的比例发生遗传分离,符合孟德尔单因子显性遗传分离规律。ELISA分析和蛋白质浓度测定的结果证实目的基因在转化植株中得到表达,表达量介于40.5-112.6 ng/g叶片鲜重之间,目的基因表达量与该植株的除草剂耐性性状间呈极显着相关,r=0.942 3(P<0.01)。最终研究获得了4个高草甘膦耐性的转基因纯合株系。(本文来源于《生物技术通报》期刊2016年11期）
南芝润,惠国强,罗绮,宋红霞,吴家和[4]（2015）在《超声波辅助花粉介导法获得转BtCry1Ac基因玉米的研究》一文中研究指出为了进一步分析玉米基因功能及基因转化,并为玉米抗虫提供种质资源,利用超声波辅助花粉介导法,将抗虫基因Cry1Ac导入玉米优良自交系昌7-2中,获得大量的转基因植株。结果表明:转基因植株经过草铵膦抗性筛选、PCR检测、BT蛋白试纸条检测和室内抗虫性鉴定等分析,最后获得高抗玉米螟的转BtCry1Ac基因株系9个。培育出了高抗玉米螟的种质资源材料,同时也建立了超声波辅助花粉介导转化玉米的高效转化体系,该方法是简捷、快速有效、无基因型限制的植物转化方法。(本文来源于《黑龙江农业科学》期刊2015年09期）
王小丽[5]（2014）在《花粉介导法获得转耐盐基因玉米植株及转化后代的耐盐性鉴定》一文中研究指出玉米在国民经济中占有重要地位,随着人民生活水平的不断提高对玉米的需求也日益增高。我国盐渍化土地面积有日趋增加的趋势为了培育出耐盐性增强的玉米新品种,以充分利用我国的盐碱化土地,本课题围绕叁个方面开展了研究,研究内容及结果如下：(1)采用超声波辅助花粉介导植物转基因方法,将甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因导入玉米自交系郑58,收获T0代种子246粒,T1代植株经卡那霉素抗性筛选及PCR检测获得37株阳性植株,转化率为15.04%(以收获的T0代种子为基数)。T2代阳性植株检出率达55%63%,T2代PCR阳性植株Southern杂交分析发现,BADH基因已经整合到部分玉米植株的染色体基因组上,并能遗传给后代。研究还证明,超声波辅助花粉介导法是一种经济、高效、实用的植物基因转化方法。(2)用不同浓度的NaCl溶液对T2代转基因玉米植株与对照进行盐胁迫处理,结果表明：转BADH基因玉米植株表现出一定的抗逆性,生长状况明显优于对照；根据非转化苗对NaCl的反应以及生长状况,确定250 mmol/L NaCl溶液为玉米幼苗耐盐性筛选的最适浓度；在此临界浓度下,玉米形态指标和生理生化指标的测定结果表明,与对照相比,转基因植株的株高提高了10.94%～25.7%,鲜重增加了8.62%～18.2%,干重增加了9%～18.18%,相对电导率降低37.21%～58.14%,叶绿素含量增加了15.89%～90.65%,超氧化物歧化酶活性提高64.92%～148.29%,丙二醛含量减少26.97%～48.05%。以上结果表明,转入甜菜碱醛脱氢酶基因提高了玉米的耐盐性。(3)采用Hoagland营养液水培方法,研究了不同浓度的NaCl胁迫条件下,转TaNHX2基因玉米自交系昌7-2和非转基因对照的幼苗生长情况、植株形态和生理指标的差异。结果显示,随着盐胁迫浓度的增加,转基因和非转基因玉米植株的株高、根长、鲜重、干重和叶绿素含量逐渐下降,丙二醛含量逐渐上升,但是转基因玉米的变化幅度较小,在几乎所有胁迫浓度下,转基因玉米植株的株高、根长、鲜重、干重、叶绿素含量均显着高于非转基因植株,丙二醛含量均比非转基因植株低。以上结果表明,转TaNHX2基因玉米幼苗的耐盐性明显优于非转基因对照。(本文来源于《山西大学》期刊2014-06-01）
任小燕[6]（2013）在《花粉介导法获得转耐盐基因AhCMO玉米植株的研究》一文中研究指出玉米(Zea mays L.)是世界上叁大重要粮食作物之一和首选的饲料作物,在我国占有极其重要的地位,盐碱地是我国重要的土地资源,但玉米的耐盐性相对较差。因此利用植物基因工程技术培育抗旱耐盐的转基因玉米新品种是在盐碱地上种植玉米行之有效的途径之一。本文就此目的开展了两方面的研究：1)利用超声波辅助花粉介导法将山菠菜胆碱单加氧酶基因AhCMO转入玉米自交系‘郑58’中,获得了转基因植株,证明此法在玉米遗传转化中是一种行之有效的方法。2)通过对花粉介导法获得的转基因玉米后代植株进行耐盐性鉴定,结果显示转基因玉米植株的耐盐性普遍高于对照株,且选出2份高耐盐株系。主要研究内容及结果如下：(1)采用超声波辅助花粉介导法将含有AhCMO基因的载体质粒pBin438导入玉米自交系‘郑58’中,秋季收获T0代转化种子。转化处理植株300株,收获结实株87株,收获玉米籽粒276粒,结实率为29%。T1代植株经卡那霉素抗性筛选及PCR检测获得37株转基因玉米植株。以收获的To代种子为基数,利用此转化法将CMO基因转入玉米植株的转化率约为13.41%。T1代植株PCR阳性结果率为19.7%；T2代植株的PCR阳性结实率达45%-55%,比T1代明显增加,表明部分转基因植株的目的基因可以遗传给后代,并趋向稳定。(2)本实验首先利用非转基因玉米植株为材料筛选出鉴定转基因玉米植株耐盐程度的临界盐浓度为250mmol/L NaCl溶液。其后对上述获得的转基因玉米T3代PCR检测阳性结果的玉米植株进行耐盐性鉴定。通过观察其生长状况,测定形态及生理生化指标得出如下结果：①形态观察显示：在盐胁迫下,对照植株逐渐表现出叶片发黄、叶片萎蔫直至最后枯萎死亡,而转基因植株在盐胁迫下能够正常生长；且转基因玉米植株的根系比对照株根系庞大。②形态指标测定结果显示：在Ommol/L NaCl溶液下转基因植株与对照株的各项形态指标基本无差异；随着处理盐浓度的增加,其生长均受到了一定的影响,但是在同一盐浓度下,转基因植株的各项形态指标均比对照好。在250mmol/L NaCl溶液处理下,转基因株系(除株系N36外)的株高比对照高10.4%—-33.6%,鲜重比对照高17.5%一55.2%,干重比对照株高13.6%-82.4%。③生理生化指标检测结果显示：在250mmol/L NaCl胁迫下,转基因玉米植株的超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化物酶(POD)活性及叶绿素含量高于非转基因玉米,丙二醛(MDA)含量低于非转基因玉米。SOD活性提高了2%—-208%；POD活性提高了22%—-65%；叶绿素含量增加了8%-61%；MDA含量减少了3%—-93%。依据生理生化指标变化情况建立的耐盐性级别评价方法显示,5份参试株系中耐盐性比对照提高3级的有2份。(本文来源于《山西大学》期刊2013-06-01）
王秀红,白建荣,孙毅,刘惠民,史向远[7]（2011）在《花粉介导法将TaPHR1∷GFP融合蛋白基因导入玉米》一文中研究指出利用超声波辅助花粉介导基因转化法,将小麦耐低磷调控基因TaPHR1和GFP构建成的融合蛋白基因(TaPHR1∷GFP)导入3个玉米自交系郑58、昌7-2和PH6WC中.结果表明:3个自交系的转化效果存在基因型差异,郑58是很好的转化受体材料,平均结籽穗率、每穗平均结籽数、BASTA除草剂抗性和转基因植株PCR阳性率均优于昌7-2和PH6W;对T1代植株进行Southern杂交表明,TaPHR1∷GFP融合蛋白基因已整合到玉米基因组中;RT-PCR结果显示,TaPHR1∷GFP融合蛋白基因得到有效转录;通过对发芽籽粒进行GFP荧光观察表明,TaPHR1∷GFP融合蛋白基因得到了表达.(本文来源于《西北植物学报》期刊2011年09期）
张婷婷,王铭,杜建中,孙毅[8]（2011）在《花粉介导法将水稻OsSIK1基因导入玉米自交系的研究》一文中研究指出采用超声波辅助的花粉介导法,将含有OsSIK1基因的植物表达载体导入3个玉米自交系中,在当代直接得到了T0转化处理种子。卡那霉素筛选和PCR检测表明,外源基因已整合到玉米基因组中。通过对这3个自交系的转化处理结实率、转化率和导入基因遗传率的比较分析,证明花粉介导法对不同自交系品种的转化率之间存在差异,从而得出自交系品种郑58和昌7-2更适合采用花粉介导法进行遗传转化。(本文来源于《山西农业科学》期刊2011年05期）
魏玉杰,张金文,何庆祥[9]（2010）在《花粉介导法将萝卜抗菌肽基因导入野罂粟的影响因素研究》一文中研究指出以野罂粟开放花蕾为受体,载有萝卜抗菌肽AFP(antifungal protein)基因的质粒pBIAFP为供体,在不同浓度的蔗糖溶液中,加入新鲜花粉与含有目的基因的质粒DNA,应用SKH250LH型超声波震荡器进行震荡处理得到花粉处理液,在不同的时间用带有Coolsnap的OLYPUS光学显微镜下观察野罂粟花粉萌发情况;在不同授粉时间后,辅以人工授粉的方法将花粉处理液滴注野罂粟柱头上,套袋后获得种子,测定其结实率。实验证明:利用花粉介导法进行萝卜抗菌肽基因转化,以蔗糖浓度11%,处理后10-15h后的野罂粟花粉萌发最好;在蔗糖浓度8%的溶液中,以5h的结籽量较好。后代经卡那霉素筛选和PCR检测,初步证明外源AFP基因整合到野罂粟基因组中,并获得转基因T1代。为特殊中药材育种提供一个新方法。(本文来源于《中国农学通报》期刊2010年15期）
张文珠,魏爱民,杜胜利,韩毅科,张桂华[10]（2010）在《黄瓜农杆菌介导法与花粉管通道法转基因技术》一文中研究指出采用农杆菌介导法和花粉管通道法进行抗虫基因EQ KAM转入黄瓜的研究。优化了以子叶节为外植体的农杆菌介导转化技术;比较了切割柱头、子房注射和子房涂抹3种花粉管通道法处理授粉后黄瓜子房的转化效果,切割柱头和子房注射均可成功获得黄瓜抗虫转基因植株。PCR及斑点杂交证明EQ KAM基因已整合到黄瓜基因组中。(本文来源于《纪念天津科润黄瓜研究所建所二十五周年论文摘要集（2001—2010）》期刊2010-05-22）
花粉介导法论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
玉米(Zea mays L.)属禾本科、玉米属植物,是世界上重要的粮食作物之一,有关玉米的遗传改良研究一直是农业科学领域重要的问题,玉米的遗传改良方法也深受关注。本实验采用超声波花粉介导法获得了转GFP基因玉米,旨在考察通过该转基因方法获得材料的农艺性状及遗传稳定性,本实验主要研究内容及结果如下:1.转GFP基因玉米的获得。利用超声波辅助花粉介导转化法将带有GFP基因的质粒导入自交系‘郑58’花粉中并人工授粉,获得结实植株6株,玉米籽粒15粒,结实率为13%。经PCR检测之后,其中6株为阳性植株。以收获的15粒种子为基数,用花粉介导法所获得T1代种子的阳性率约为40%。2.对转基因玉米自交后代农艺性状的分析。T2代转基因的玉米植株的田间农艺性状的调查分析显示,在茎粗上,除了T2-6之外,其它株系同对照相比均有显着性差异;除T2-5和T2-1株系出现诸如株高和穗位高的显着差异外,T2代转基因玉米植株同非转化对照组比较,它们主要的农艺性状基本一致。3.T2代转基因玉米植株的室内考种结果显示,除了T2-4和T2-5之外,其他株系的穗长与非转化对照组相比均有显着差异;所有株系的穗粗同对照组相比也均有显着性差异;在穗行数上有显着差异的株系为T2-2,T2-5和T2-6;但除了T2-1在行粒数和干穗重上有显着差异,其它株系在各考种项目上均无显着性差异;且各株系之间不同农艺性状的差异程度不同。4.通过对大田中种植的T2代转基因玉米观察表明:T2-5株系发生了较为明显的变异,表现为:气生根部分长出了玉米穗及玉米棒与玉米茎杆之间呈现约90o的夹角。5.对T2代玉米植株GFP基因遗传规律的分析得出:T2-1、T2-5和T2-6株系中的外源基因遵循孟德尔单基因显性基因的遗传分离规律。6.由转基因玉米RT-PCR检测的结果可分析得出:在T2代各株系的阳性植株中目的基因的表达量是不相同的,且同一个株系中不同植株的表达量也是各不相同的。7.对转基因玉米western-blot的结果分析得出:在不同的转基因玉米中,GFP蛋白的表达量是不同的,且有部分转基因玉米植株GFP基因发生了沉默,无GFP蛋白的表达。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
花粉介导法论文参考文献
[1].王晓敏,王耀辉,耿思宇,咸栓狮,杜春芳.利用花粉介导法获得油菜RNAi转基因植株[J].山西农业科学.2018
[2].郭晓阳.花粉介导法获得转GFP基因玉米的农艺性状及遗传特性的分析[D].山西师范大学.2017
[3].杨慧珍,任志强,肖建红,卜华虎,刘惠民.花粉介导法获得耐草甘膦玉米植株及其耐性研究[J].生物技术通报.2016
[4].南芝润,惠国强,罗绮,宋红霞,吴家和.超声波辅助花粉介导法获得转BtCry1Ac基因玉米的研究[J].黑龙江农业科学.2015
[5].王小丽.花粉介导法获得转耐盐基因玉米植株及转化后代的耐盐性鉴定[D].山西大学.2014
[6].任小燕.花粉介导法获得转耐盐基因AhCMO玉米植株的研究[D].山西大学.2013
[7].王秀红,白建荣,孙毅,刘惠民,史向远.花粉介导法将TaPHR1∷GFP融合蛋白基因导入玉米[J].西北植物学报.2011
[8].张婷婷,王铭,杜建中,孙毅.花粉介导法将水稻OsSIK1基因导入玉米自交系的研究[J].山西农业科学.2011
[9].魏玉杰,张金文,何庆祥.花粉介导法将萝卜抗菌肽基因导入野罂粟的影响因素研究[J].中国农学通报.2010
[10].张文珠,魏爱民,杜胜利,韩毅科,张桂华.黄瓜农杆菌介导法与花粉管通道法转基因技术[C].纪念天津科润黄瓜研究所建所二十五周年论文摘要集（2001—2010）.2010
论文知识图
