河豚毒素人工抗原的制备及其免疫原性鉴定

河豚毒素人工抗原的制备及其免疫原性鉴定

论文摘要

目的:选择血蓝蛋白(KLH)和牛血清白蛋白(BSA)分别作为载体蛋白与河豚毒素(TTX)进行偶联制备人工抗原,并对合成结果进行鉴定。方法:通过甲醛法将TTX分别与大分子载体蛋白,即血蓝蛋白(KLH)和牛血清白蛋白(BSA)进行偶联。利用紫外扫描法、电泳法对偶联产物进行鉴定,并对6周龄Balb/c雌性小鼠免疫注射检测其免疫原性。结果:紫外扫描显示偶联抗原较载体蛋白有轻微的红移现象出现,且经过琼脂糖凝胶及SDS-PAGE 2种方法电泳检测后发现,载体蛋白较人工抗原之间迁移率均不相同;对免疫小鼠进行间接酶联免疫吸附试验(iELISA)及间接竞争酶联免疫吸附试验(icELISA)联用检测其多抗血清效价及特异性,经过共计6次免疫后的效价能达到1:40w,且能有效抑制TTX。结论:河豚毒素人工抗原制备成功且具备良好的免疫原性。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料与试剂
  •   1.2 仪器与设备
  •   1.3 试验方法
  •     1.3.1 TTX人工抗原合成
  •     1.3.2 人工抗原的鉴定
  • 2 结果与分析
  •   2.1 紫外扫描结果
  •   2.2 琼脂糖凝胶电泳结果
  •   2.3 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳结果
  •   2.4 抗血清效价检测结果
  •   2.5 多抗血清特异性检测结果
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 刘敏慧,刘新峰,丁向彬,李新,张林林,方淑兵,郭宏

    关键词: 河豚毒素,人工抗原,载体蛋白,抗体,酶联免疫吸附试验

    来源: 食品科技 2019年03期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑

    专业: 轻工业手工业

    单位: 天津农学院动物科学与动物医学学院

    基金: 农业动物繁育及产品检测生物技术国际联合研究中心平台项目(200934)

    分类号: TS254.7

    DOI: 10.13684/j.cnki.spkj.2019.03.057

    页码: 313-317

    总页数: 5

    文件大小: 4027K

    下载量: 300

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