肠炎沙门菌icdA基因缺失株的构建及重要特性分析

肠炎沙门菌icdA基因缺失株的构建及重要特性分析

论文摘要

为研究肠炎沙门菌异柠檬酸脱氢酶(IDH)的功能,本研究利用λ-Red重组技术构建了肠炎沙门菌IDH编码基因icdA缺失突变株c50336ΔicdA,对其进行生长和生化特性检测,并通过体外模拟应激试验、药敏试验、生物被膜检测、抗蛋清杀伤、胞内存活和动物感染实验,分析icdA基因在肠炎沙门菌致病机制中的重要作用。研究结果显示,icdA基因缺失不影响肠炎沙门菌的生长特性和生化特性,在热应激(42℃)、酸应激(pH3.5)和高渗应激(NaCl 2.4 mol/L)条件下其存活率也未出现显著变化,但icdA基因缺失能够显著降低肠炎沙门菌对碱、低渗透压和过氧化氢应激的抵御能力,降低肠炎沙门菌对多粘菌素B的耐药性和生物被膜的形成能力;同时,该基因缺失能够降低肠炎沙门菌对蛋清杀伤的防御能力、在巨噬细胞内的存活能力和其对小鼠的毒力。研究结果表明icdA基因参与肠炎沙门菌的抗应激能力、耐药性、生物被膜形成和抗蛋清杀伤能力,从而影响细菌的毒力。本研究为肠炎沙门菌疫苗的研究奠定了重要基础。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 主要实验材料
  •   1.2 引物的设计与合成
  •   1.3 icd A基因缺失株及回补株的构建
  •   1.4 重组菌生长曲线及生化特性检测
  •   1.5 重组菌的体外应激试验
  •   1.6 重组菌的耐药试验
  •   1.7 重组菌的生物被膜形成能力检测
  •   1.8 重组菌的抗蛋清杀伤试验
  •   1.9 重组菌胞内存活能力的测定
  •   1.1 0 动物感染实验
  • 2 结果
  •   2.1 icd A基因缺失株和回补菌株的构建与鉴定
  •   2.2 重组菌生长曲线测定和生化特性分析
  •   2.3 重组菌的抗体外应激试验结果
  •   2.4 重组菌耐药试验结果
  •   2.5 重组菌生物被膜形成能力分析
  •   2.6 重组菌抗蛋清杀伤试验
  •   2.7 重组菌的胞内存活能力测定结果
  •   2.8 动物感染试验结果
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 吴同垒,张艳英,陈娟,于秀剑,黄翠琴,张志强,史秋梅,朱国强

    关键词: 肠炎沙门菌,基因缺失

    来源: 中国预防兽医学报 2019年06期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 河北科技师范学院,中国农业大学,福建省家畜传染病防治与生物技术重点试验室,扬州大学

    基金: 河北省高等学校科学技术研究项目(QN2018205),福建省家畜传染病防治与生物技术重点实验室开放基金课题(ZDSYS2017001,ZDSYS2016KL01),科技部畜禽重大疫病防控与高效安全养殖综合技术研发重点专项(2017YFD0500105,2016YFD0500905)

    分类号: S852.61

    页码: 573-578

    总页数: 6

    文件大小: 663K

    下载量: 115

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