褐藻胶裂解酶论文-吴丽云,朱艳冰,银小倩,李鹤宾,倪辉

褐藻胶裂解酶论文-吴丽云,朱艳冰,银小倩,李鹤宾,倪辉

导读:本文包含了褐藻胶裂解酶论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:丁香假单孢菌,褐藻胶裂解酶,酶学性质,抗氧化活性

褐藻胶裂解酶论文文献综述

吴丽云,朱艳冰,银小倩,李鹤宾,倪辉[1](2019)在《丁香假单孢菌重组褐藻胶裂解酶的酶学性质及酶解产物的抗氧化活性》一文中研究指出目的:将丁香假单孢菌的褐藻胶裂解酶进行克隆表达和纯化,研究重组酶的酶学性质及酶解产物的抗氧化活性,为进一步研究该酶的结构与功能奠定良好的基础。方法:利用PCR扩增褐藻胶裂解酶基因,将它克隆至表达载体pET-28a;表达产物用亲和层析纯化,研究重组酶的酶学性质;通过测定酶解产物的还原能力和清除ABTS·+和·OH自由基的能力,分析酶解产物的抗氧化活性。结果:来自丁香假单孢菌的重组褐藻胶裂解酶的分子质量为40.8 ku。该重组酶专一性降解聚甘露糖醛酸,酶的最适反应温度和pH分别为30℃和7.5,温度低于50℃时稳定。除了SDS和DTT,重组酶对其它抑制剂和去垢剂具有较好的抗性。酶解产物对ABTS·+和·OH自由基的半数抑制剂量IC50分别为1.56 mg/mL和0.56 mg/mL,还原能力较强。结论:该重组褐藻胶裂解酶的酶解产物有一定的抗氧化活性,具有应用潜力。(本文来源于《中国食品学报》期刊2019年11期)

律倩倩,张柯柯,朱巧云,刘伟治[2](2019)在《新型海洋褐藻胶裂解酶裂解机制研究》一文中研究指出褐藻胶占海洋多糖的1/3以上,是一种重要的海洋生物多糖。AlyB是弧菌中发现的一种褐藻胶裂解酶,序列比对显示其含有两个结构域,CBM32和PL7催化结构域。CBM(Carbohydrate binding moduel)是多糖活性酶中常见的一类结构域,在底物识别、破坏不溶性多糖的结构、辅助催化等过程中起重要作用。在多糖裂解酶(Polysaccharide lyases,PL)家族中也发现了CBM,但尚未对其功(本文来源于《第十二届中国酶工程学术研讨会论文摘要集》期刊2019-08-08)

闫军军,陈朋,田朝玉,张同,朱玥明[3](2019)在《海洋细菌来源的新型耐碱褐藻胶裂解酶研究》一文中研究指出褐藻胶是由α-L-古罗糖醛酸(Guluronicacid,G)和β-D-甘露糖醛酸(Mannuronic acid, M)两种糖单元通过糖苷键链接而成的线性多糖,分子内由聚M段、聚G段和M/G混合段交替排列。经褐藻胶降解形成的褐藻寡糖是一类聚合度为2-10功能低聚糖,具有多种特殊的生物活性,如免疫调节、降血脂、抗病毒、抗肿瘤以及抗氧化等。褐藻胶裂解酶能够通过β消除反应降解褐藻胶,可作(本文来源于《第十二届中国酶工程学术研讨会论文摘要集》期刊2019-08-08)

李昌明[4](2019)在《海参肠道微生物多样性分析及菌株s12~T褐藻胶裂解酶研究》一文中研究指出褐藻胶大量存在于褐藻细胞壁中,是地球上一种储量丰富的可再生碳水化合物资源。褐藻胶及其降解产物褐藻寡糖都具有良好的生物活性和经济价值,具有进一步开发和利用的潜力。海洋环境蕴藏着丰富的微生物资源。海洋的极端环境条件使海洋微生物进化出了特殊且多样的代谢通路,能生产多种具有极高开发利用潜力的酶。海洋动物的肠道微生物不仅仅在动物肠道寄居,而且具有协助宿主消化食物的能力,因此海洋动物的肠道微生物是天然的降解酶资源库,但目前相关研究较少。本文以海参肠道微生物为主要研究对象,以“肠道微生物的分离培养和多样性分析——功能菌株筛选——褐藻胶裂解酶的表达及研究”为主线展开研究。取得的成果如下:1.对海参肠道内容物样品中的微生物进行分离培养,与16S rRNA基因高通量测序技术相结合,分析海参肠道微生物多样性从海参肠道内容物中共分离到226株细菌,分布于4个门,49个属,102个物种中。在所有样品的可培养细菌中,占优势地位的是变形菌门和厚壁菌门。在属层面,分离到芽孢杆菌属细菌的物种数量最多。16S rRNA高通量测序的结果显示,海参周围沉积物中的微生物丰度和多样性最高,其次是海参肠道,最后是海参周围水样。海参肠道中优势的类群是变形菌门、绿弯菌门、放线菌门、厚壁菌门和拟杆菌门,共占肠道菌群的90%左右。海参肠道微生物组成与沉积物微生物组成更为相似,但肠道中厚壁菌门、绿弯菌门和变形菌门的比例高于沉积物,而拟杆菌门和放线菌门的比例略低于沉积物。水样中疣微菌门和拟杆菌门的比例更高。2.从海参肠道中筛选到具有产褐藻胶裂解酶潜力的菌100余株,并对部分潜在高产菌株进行了验证和评估从两批海参肠道内容物中分离得到的可培养细菌中共筛选到潜在褐藻胶裂解酶产生菌株102株,其中有31株水解圈半径大于等于10 mm,高产菌株主要分布于弧菌属和芽孢杆菌属。对部分菌株进行复筛,有16株菌确定具有褐藻胶降解能力,但总体活性均低于实验室之前分离到的高产褐藻胶裂解酶菌株s12T。筛选出的菌株6-3-04的酶活能够达到菌株s12T的90%以上。在较长时间发酵实验中,菌株6-3-04的酶活整体低于菌株s12T。3.对菌株s12T的4个褐藻胶裂解酶基因进行异源表达、分离纯化和酶学性质研究对高效降解褐藻胶菌株s12T的4个潜在褐藻胶裂解酶基因alg3、alg7、alg9和alg10进行了异源表达,在给定的表达条件下,基因alg3、alg7表达产物主要以沉淀形式存在,检测到极微弱的褐藻胶裂解酶活性。基因alg9和alg10得到了可溶性表达,但基因alg9表达产物的活性较弱,基因alg10的表达产物检测出了明显的褐藻胶降解活性,将其产物命名为重组褐藻胶裂解酶rAlg10。使用镍柱亲和层析方法对重组酶rAlg10进行纯化,然后检测其酶学性质。重组酶rAlg10是具有Poly-G偏好性的双功能酶。最适温度为40℃,最适pH为7.4,最适盐度为300 mMNaCl,常见的其它金属离子都会降低其降解活性,最适条件下重组酶rAlg10的比酶活为106.1U/mg。4.对叁株分离于海洋环境的潜在新菌进行了多相分类鉴定通过包含系统发生学、基因组学、表型特征和化学分类学等手段在内的多相分类研究,确定菌株E4404T、YLY04T和SEH01T的分类地位。菌株E4404T代表变形菌门、Y-变形菌纲、弧菌目、弧菌科、弧菌属下的一个新种,命名为白色弧菌,学名为Vibrio albus sp.nov.,模式菌株为E4404T(=MCCC 1H00197T= KCTC 52890T)。菌株YLY04T代表变形菌门、a-变形菌纲、红杆菌目、红杆菌科、海棍菌属下的一个新物种,命名为舌齿鲈海棍菌,学名为Pelagivirga dicentrarchi sp.nov.,模式菌株为YLY04T(=MCCC 1H00334T=KCTC 62452T)。菌株SEH01T属于变形菌门、δ-变形菌纲、慢生单胞菌目、慢生单胞菌科,与菌株B210T共同组建一个新属,命名为卢金星菌属(Lujinxingiagen.nov.)菌株SEH01T代表卢金星菌属的一个新物种,命名为沉积物卢金星菌,学名为Lujinxingia sediminis sp.nov.,模式菌株为SEH01T(=KCTC 42950T=DSM 101859T)。(本文来源于《山东大学》期刊2019-05-18)

国晶晶,宋悦凡,何云海,武龙,汪秋宽[5](2019)在《高效产褐藻胶裂解酶菌株产酶条件优化及降解寡糖结构分析》一文中研究指出为筛选高效产褐藻胶裂解酶菌株,以褐藻胶作为唯一碳源,在海星Asteroidea sp.内脏中筛选出一株产胞外褐藻胶裂解酶的菌株AlgX2,并进行了菌株鉴定、产酶条件优化及降解寡糖结构分析。结果表明:经过菌株形态、生理生化及16S rRNA基因鉴定,该菌株属于盐单胞菌属,命名为Cobetia AlgX2;以3,5-二硝基水杨酸法(DNS)测定的菌株酶活性为指标,对褐藻胶裂解酶菌株产酶活性进行正交试验显示,产褐藻胶裂解酶的菌株最适产酶培养基成分为褐藻胶14 g/L、硫酸铵4 g/L、NaCl 30 g/L、初始pH 6.0,优化产酶培养条件为培养温度22℃、接种量2%、装液量50 mL/250 mL、转速150 r/min;在最优产酶培养条件下进行10 L发酵罐产酶试验显示,发酵液酶活力最高为0.176 U/mL;利用粗酶液酶解制备褐藻胶寡糖,并对寡糖进行HPLC色谱检测显示,样品的聚合度为dp2~dp5。研究表明,Cobetia AlgX2菌株可用于扩大发酵生产,产酶效率高且褐藻胶裂解效果显着。(本文来源于《大连海洋大学学报》期刊2019年02期)

周敏,冷凯良,王致鹏,苗钧魁,刘小芳[6](2019)在《产褐藻胶裂解酶菌株的筛选及发酵条件优化》一文中研究指出为进一步探索高产褐藻胶裂解酶菌株,促进其工业化应用,以褐藻酸钠为唯一碳源筛选培养基,从鲍鱼内脏中筛选出一株高产褐藻胶裂解酶菌株B4,通过形态学观察和系统发育分析,鉴定为弧菌属细菌Vibrio sp.B4。通过单因素实验对B4菌株的发酵条件和发酵培养基进行优化,获得发酵培养基的最适碳源为褐藻酸钠10g/L,最适氮源为(NH4)2SO410g/L,最适发酵条件为温度30℃,接种量1%,培养基初始pH 6.0。在单因素实验的基础上,通过Plackett-Burman(PB)筛选出3个影响产酶活力的显着因素:(NH4)2SO4浓度、pH、接种量。通过响应面进一步分析优化,得到最佳的发酵培养基为褐藻酸钠10g/L,(NH_4)_2SO_4 10.91g/L,NaCl 10g/L,KH_2PO_4 1g/L,MgSO4·7H2O 0.5g/L,CaCl_2 0.2g/L,FeSO_4·7H_2O 0.02g/L,最佳发酵条件为温度30℃,接种量1.1%,起始pH 6.07。在最佳培养条件下,褐藻胶裂解酶活力可达19.09U/mL,比基础培养条件下提高了3.67倍。该菌经过产酶发酵条件的优化,酶活力得到较大幅度的提高,且其发酵产酶时间短,可为褐藻胶裂解酶的进一步研究应用提供参考。(本文来源于《青岛大学学报(自然科学版)》期刊2019年01期)

黄惠琴,宋鑫,刘敏,胡永华,鲍时翔[7](2018)在《产褐藻胶裂解酶芽胞杆菌的筛选、鉴定及其降解效果评价》一文中研究指出褐藻胶是广泛存在于褐藻中的一类多糖,降解为褐藻寡糖后能表现出更多的生物活性。从海洋样品中筛选出产褐藻胶裂解酶芽胞细菌16株,基于形态、生理生化特征和16S r DNA系统发育分析初步鉴定菌株HB12274为解淀粉芽胞杆菌植物亚种(Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum)。TLC结果显示,海藻酸钠经粗酶液降解形成2~7聚合度的褐藻寡糖和单糖,菌株与马尾藻叶片共培养时能明显降解叶状体结构。为褐藻胶裂解酶的生产和工业应用提供了新的菌株来源。(本文来源于《微生物学杂志》期刊2018年06期)

梁梅芳,吴利洋,倪辉,姜泽东,肖安风[8](2018)在《褐藻胶裂解酶AlgL17酶解工艺优化及酶解产物分析》一文中研究指出为探索重组褐藻胶裂解酶AlgL17酶解工艺的优化条件,采用3,5-二硝基水杨酸法(3,5-dinitrosalicylic acid,DNS)和苯酚-硫酸法分别测定反应生成的还原糖及总糖含量,计算平均聚合度,从反应温度、反应pH值、底物质量分数、加酶量及振荡速率5方面探讨各因素对酶解反应的影响,确定褐藻胶裂解酶酶解工艺的最优条件。结果表明,AlgL17酶解海藻酸钠的最优工艺条件:反应温度为35℃,pH=8. 0,初始底物质量分数为1. 1%,加酶量为1. 16 U,不振荡反应180 min。在此条件下,产生的还原糖质量浓度为7. 09 g/L,酶解产物的平均聚合度为2。液相色谱质谱联用(liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS)分析海藻酸钠酶解终产物为单糖、二糖、叁糖和四糖。(本文来源于《集美大学学报(自然科学版)》期刊2018年06期)

吴晨烁,李晓月,秦明珍,严芬[9](2019)在《海洋来源褐藻胶裂解酶及其基因B1SM的克隆和表达》一文中研究指出从海洋来源的假交替单胞菌(Pseudoalteromonas sp.) B1基因组中克隆1个褐藻胶裂解酶基因,并在大肠杆菌中实现异源表达,分离纯化重组酶并研究其酶学性质。通过Touch down PCR与热不对称交错PCR(thermal asymmetric interlaced PCR,TAIL-PCR)从假交替单胞菌B1基因组中扩增到1个褐藻胶裂解酶基因(B1SM),将目的基因插入到p GEX-4T-1载体,转化到宿主大肠杆菌(Escherichia coli,E. coli) BL21 (DE3)。结果显示,从菌株B1克隆得到褐藻胶裂解酶基因B1SM,序列长度为1 005 bp,编码334个氨基酸,理论等电点为8. 51,编码蛋白质的理论分子质量为37. 13 k Da。重组褐藻胶裂解酶B1SM的最适pH和温度分别为8. 0和25℃。该褐藻胶裂解酶在pH 7. 0~9. 0范围内,25℃下保温1 h,仍剩余60%以上活力,pH稳定性较好。在最适pH 8. 0和30℃下保温1 h重组酶仍剩余60%以上活力。该研究为褐藻胶裂解酶基因B1SM在E. coli BL21(DE3)中实现了异源表达,为褐藻胶裂解酶的制备和研究奠定基础。(本文来源于《食品与发酵工业》期刊2019年03期)

吴利洋,梁梅芳,倪辉,肖安风,姜泽东[10](2018)在《微泡菌ALW1褐藻胶裂解酶AlgL14的表达及信息学分析》一文中研究指出以微泡菌(Microbulbifer sp.) ALW1的基因组为模板,使用褐藻胶裂解酶AlgL14特异性引物进行PCR扩增,将扩增产物克隆至p MD18-T载体后进行测序,并对该基因编码的蛋白质序列进行生物信息学分析。将目的基因插入pET-28α(+)表达载体,转入Escherichia. coli BL21 (DE3)中进行诱导表达,并利用亲和层析进行重组蛋白纯化。结果显示,克隆基因的大小为1 350 bp,预测编码含有449个氨基酸残基的蛋白质。该蛋白质序列与其他菌株来源的褐藻胶裂解酶序列具有一定的相似性,预测克隆的目的基因编码褐藻胶裂解酶,归属于PL-14家族。褐藻胶裂解酶AlgL14的理论分子质量大小为48. 772 ku,理论等电点为6. 27。采用同源建模法建立菌株ALW1褐藻胶裂解酶AlgL14的叁维结构,富含β-折迭。将目的基因在E. coli BL21 (DE3)中进行诱导表达,并纯化获得重组褐藻胶裂解酶。SDS-PAGE分析显示,表达的目的蛋白分子质量约为48. 8 ku。(本文来源于《集美大学学报(自然科学版)》期刊2018年05期)

褐藻胶裂解酶论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

褐藻胶占海洋多糖的1/3以上,是一种重要的海洋生物多糖。AlyB是弧菌中发现的一种褐藻胶裂解酶,序列比对显示其含有两个结构域,CBM32和PL7催化结构域。CBM(Carbohydrate binding moduel)是多糖活性酶中常见的一类结构域,在底物识别、破坏不溶性多糖的结构、辅助催化等过程中起重要作用。在多糖裂解酶(Polysaccharide lyases,PL)家族中也发现了CBM,但尚未对其功

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

褐藻胶裂解酶论文参考文献

[1].吴丽云,朱艳冰,银小倩,李鹤宾,倪辉.丁香假单孢菌重组褐藻胶裂解酶的酶学性质及酶解产物的抗氧化活性[J].中国食品学报.2019

[2].律倩倩,张柯柯,朱巧云,刘伟治.新型海洋褐藻胶裂解酶裂解机制研究[C].第十二届中国酶工程学术研讨会论文摘要集.2019

[3].闫军军,陈朋,田朝玉,张同,朱玥明.海洋细菌来源的新型耐碱褐藻胶裂解酶研究[C].第十二届中国酶工程学术研讨会论文摘要集.2019

[4].李昌明.海参肠道微生物多样性分析及菌株s12~T褐藻胶裂解酶研究[D].山东大学.2019

[5].国晶晶,宋悦凡,何云海,武龙,汪秋宽.高效产褐藻胶裂解酶菌株产酶条件优化及降解寡糖结构分析[J].大连海洋大学学报.2019

[6].周敏,冷凯良,王致鹏,苗钧魁,刘小芳.产褐藻胶裂解酶菌株的筛选及发酵条件优化[J].青岛大学学报(自然科学版).2019

[7].黄惠琴,宋鑫,刘敏,胡永华,鲍时翔.产褐藻胶裂解酶芽胞杆菌的筛选、鉴定及其降解效果评价[J].微生物学杂志.2018

[8].梁梅芳,吴利洋,倪辉,姜泽东,肖安风.褐藻胶裂解酶AlgL17酶解工艺优化及酶解产物分析[J].集美大学学报(自然科学版).2018

[9].吴晨烁,李晓月,秦明珍,严芬.海洋来源褐藻胶裂解酶及其基因B1SM的克隆和表达[J].食品与发酵工业.2019

[10].吴利洋,梁梅芳,倪辉,肖安风,姜泽东.微泡菌ALW1褐藻胶裂解酶AlgL14的表达及信息学分析[J].集美大学学报(自然科学版).2018

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