论文摘要
目的:构建斑马鱼FOXP3A融合蛋白的原核表达系统,诱导表达并制备多克隆抗血清。方法:选取斑马鱼foxp3a基因cDNA的894 bp特异区段（s-foxp3a）,对该片段进行密码子优化后构建原核表达载体pET-32a-s-foxp3a,转化大肠杆菌BL21（DE3）,诱导表达斑马鱼S-FOXP3A-His融合蛋白并纯化,纯化后的蛋白免疫家兔,制备斑马鱼FOXP3A蛋白的多克隆抗血清,4次免疫后取血清,采用间接ELISA法检测抗血清效价。结果:在16℃经0.5 mmol/LIPTG诱导10 h的条件下,SDS-PAGE分析表明斑马鱼S-FOXP3A-His融合蛋白以包涵体形式产生;间接ELISA检测结果显示,FOXP3A蛋白多克隆抗血清的效价在1.6×105以上。结论:制备了高效价的斑马鱼FOXP3A多克隆抗血清,为进一步解析斑马鱼FOXP3A蛋白的功能提供了基础工具。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 陈芳,王兰,张左兵
关键词: 斑马鱼,密码子优化,原核表达,多克隆抗血清
来源: 生物技术通讯 2019年01期
年度: 2019
分类: 基础科学
专业: 生物学
单位: 山西大学生命科学学院
基金: 山西省高等学校创新人才支持计划
分类号: Q78
页码: 47-52
总页数: 6
文件大小: 2705K
下载量: 90
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