山东省猪瘟Erns基因系统进化分析与表达模式的研究

山东省猪瘟Erns基因系统进化分析与表达模式的研究

论文摘要

采用RT-PCR方法从山东省采集的怀疑携带猪瘟病毒(CSFV)的病料组织中扩增出全长为696 bp囊膜糖蛋白ErnscDNA,其编码232个氨基酸的蛋白质,命名为SDCQ。通过构建Erns蛋白家族系统进化树分析可知,山东省内流行的CSFV毒株与传统强毒株和疫苗用毒株在主要抗原编码基因上存在较大差异。将阳性重组表达质粒pPIC9K/Erns电转化GS115酵母菌,经筛选、鉴定、甲醇诱导表达,SDS-PAGE电泳分析,在培养液上清中检测到了目的蛋白Erns,大约50 kDa。Western Blot显示,Erns是以同源二聚体的形式存在,且表达产物可以特异性识别CSFV抗体。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 菌种及质粒
  •   1.2 试剂与工具酶
  •   1.3 病毒和细胞
  •   1.4 RT-PCR和Erns基因的克隆
  •   1.5 序列与系统进化分析
  •   1.6 pPIC9K-Erns基因重组质粒构建
  •   1.7 目的蛋白的诱导表达
  •   1.8 蛋白印迹 (Western-Blot) 检测
  • 2 结果与分析
  •   2.1 Erns基因扩增产物的鉴定
  •   2.2 序列与系统进化分析
  •   2.3 pPIC9K /Erns重组质粒与重组酵母菌的筛选
  •   2.4 Erns基因表达产物的SDS-PAGE和Western Blot分析
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 兰邹然,张月,楚遵锋,徐淑华,田夫林,王金宝

    关键词: 猪瘟,基因,进化树,表达

    来源: 中国兽医杂志 2019年04期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 山东省动物疫病预防与控制中心,山东省农业厅

    基金: 山东省优秀青年科学家科研奖励基金资助项目(BS2010NY020)

    分类号: S852.651

    页码: 7-11

    总页数: 5

    文件大小: 3196K

    下载量: 37

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