导读:本文包含了乳清酸蛋白基因论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:蛋白,小鼠,乳清,序列,基因,染色体,乳腺。
乳清酸蛋白基因论文文献综述
邵振鲁,吴晓洁,林艳丽,熊福银,周艳荣[1]（2012）在《连续3步缺口修复构建小鼠乳清酸蛋白-人溶菌酶杂合基因座》一文中研究指出目的:构建一个利用小鼠乳清酸蛋白(mWAP)基因座完整的上下游调控序列指导人溶菌酶(hLYZ)基因组序列在乳腺内特异性高效表达的mWAP-hLYZ杂合基因座,实现人溶菌酶的高效表达。方法:采用连续3步缺口修复的方法。首先,以pBR322载体作为骨架,插入预先合成的6个同源臂序列,构成能够连续进行3次缺口修复的基因抓捕载体。然后在大肠杆菌内利用λ噬菌体Red同源重组系统介导的同源重组方法:第一步,从含mWAP基因座的细菌人工染色体(BAC)上亚克隆8 kb的mWAP基因3'端完整侧翼序列到抓捕载体上;第二步,从含hLYZ基因的BAC上亚克隆5 kb的从起始密码子(ATG)到终止密码子(TAA)的hLYZ基因组序列;第叁步,从mWAP BAC上亚克隆9kb的mWAP基因5'端完整侧翼序列,并使上述3个片段在抓捕载体上自动无痕地连接在一起。结果:构建了全长约22 kb的mWAP-hLYZ杂合基因座,经PCR扩增、限制性内切酶酶切和序列测定验证,构建的杂合基因座达到原mWAP基因座中mWAP基因组编码序列从起始密码子(ATG)到终止密码子(TAA)完全被hLYZ基因组序列精确置换的目的。结论:通过连续3步缺口修复构建杂合mWAP-hLYZ基因座乳腺表达载体,为乳腺生物反应器高效表达人溶菌酶提供了可行的思路和方法。(本文来源于《生物技术通讯》期刊2012年05期）
吴晓洁,林艳丽,施庚寿,熊福银,周艳荣[2]（2012）在《连续3次缺口修复构建小鼠乳清酸蛋白-人血清白蛋白杂合基因座》一文中研究指出目的:构建人血清白蛋白(hSA)与小鼠乳清酸蛋白(mWAP)调控序列的杂合基因座。方法与结果:在pBR322载体上连入预先无痕连接的3对同源臂,利用基于Red同源重组系统的缺口修复(gap-repair)技术,分别对8kb的mWAP基因座3′调控区、16 kb的hSA基因组编码序列及13 kb的mWAP基因座5′调控区进行连续3次基因抓捕,最终将全长37 kb的乳蛋白杂合基因座构入pBR322载体;通过PCR扩增、限制性内切酶消化和序列测定验证,确定mWAP基因座中的编码序列被精确地置换为hSA的基因组编码序列。结论:构建了整合有mWAP-hSA杂合基因座的pBR322载体,为研究杂合基因座在乳腺中的表达效果及置换型基因座表达的可行性提供了数据。(本文来源于《生物技术通讯》期刊2012年03期）
杜卫华,赵君,张守峰,任文陟,扈荣良[3]（2003）在《小鼠乳清酸蛋白上游调控序列的克隆及其指导下CAT基因在家兔乳腺中的表达》一文中研究指出应用 PCR技术 ,从小鼠基因组中克隆了 1 .6 kb乳清酸蛋白 (WAP)基因 5′上游调控序列 ,经酶切和测序证实与已知序列基本一致。为了证实此调控序列能否指导外源基因在乳腺中的表达 ,将此序列与报告基因 CAT融合 ,构建了 p WAP- CAT- poly A乳腺定位表达载体 ,脂质体包裹后 ,经乳导管将其注入到妊娠中后期家兔乳腺中进行暂时表达。分别于家兔分娩后 1～ 1 0 d采奶 ,用 EL ISA检测乳汁中 CAT含量。结果表明 ,所构建的载体在家兔乳腺中能够表达 ,表达水平在家兔分娩后 1～ 5 d较高(本文来源于《中国兽医学报》期刊2003年03期）
杜卫华,赵君,张守峰,王凤阳,宋德光[4]（2000）在《小鼠乳清酸蛋白上游调控序列的克隆及其指导下CAT基因在家兔乳腺中的表达》一文中研究指出应用PCR技术,从小鼠基因组中克隆了1.6kb乳清酸蛋白(WAP)基因5′上游调控序列,经酶切和测序证实与已知序列基本一致.为了证实此调控序列能否指导外源基因在乳腺中的表达,将此序列与报告基因CAT融合构建pWAP-CAT-polyA乳腺定位表达载体,脂质体包裹后,经乳导管将其注入到妊娠中后期家兔乳腺中,进行暂时表达.分别于家兔分娩后1～25天采奶,用ELISA方法检测乳汁中CAT含量,结果表明所构建的载体在家兔乳腺中能够表达,表达水平在家兔分娩后1～5天较高.(本文来源于《中国实验动物学会第五届学术年会论文汇编》期刊2000-12-01）
张旭晨,成国祥,陈建泉,成勇,魏影允[5]（1999）在《小鼠乳清酸蛋白启动区指导人促红细胞生成素在转基因小鼠乳腺的表达》一文中研究指出以小鼠乳清酸蛋白基因 (mWAP)调控区与人促红细胞生成素基因 (hEPO)构建融合基因 ,经动物个体暂态表达方法确证hEPO可在乳腺特异表达后 ,用显微注射方法将融合基因导入小鼠受精卵 ,再将受精卵移植到假孕小鼠 ,获得 86只G0 代小鼠 ,经PCR Southernblot及Southernblot证实 ,有 5 8只整合阳性小鼠 ,整合率为 6 7% ,ELISAkit,dotELISA等方法检测小鼠39只 ,有 1 6只表达阳性 ,乳汁中人hEPO的表达量高于 1 5 μg/mL .(本文来源于《科学通报》期刊1999年14期）
卢一凡,邓继先,肖成祖,马清钧[6]（1998）在《乳清酸蛋白基因调控序列的鉴定及转基因小鼠乳腺表达G-CSF载体的构建》一文中研究指出乳清酸蛋白基因经亚克隆、酶切鉴定，并对该基因５′区进行克隆和序列分析，在核实序列正确后，构建了以其为调控序列、指导人Ｇ－ＣＳＦ基因的真核表达质粒，以用于转基因动物乳腺表达研究。(本文来源于《中国兽医学报》期刊1998年05期）
卢一凡,邓继先,周江,肖成祖,马清钧[7]（1998）在《乳清酸蛋白(WAP)基因调控序列的鉴定及在小鼠乳腺细胞表达LacZ基因的研究》一文中研究指出乳清酸蛋白（ＷＡＰ）是小鼠乳中的主要蛋白质．在亚克隆该基因的基础上，对其进行了酶切鉴定，并对该基因５′区进行克隆和序列分析，在核实序列正确后，构建了以其为调控序列，指导β－半乳糖苷酶基因的真核表达质粒，采用直接注射质粒的方法在小鼠乳腺中表达出β－半乳糖苷酶活性，从而证实基因调控序列的功能正确性，可以用于转基因动物乳腺表达研究，同时证实该方法可以作为一种暂时性表达载体的验证方法．(本文来源于《中国生物化学与分子生物学报》期刊1998年02期）
乳清酸蛋白基因论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:构建人血清白蛋白(hSA)与小鼠乳清酸蛋白(mWAP)调控序列的杂合基因座。方法与结果:在pBR322载体上连入预先无痕连接的3对同源臂,利用基于Red同源重组系统的缺口修复(gap-repair)技术,分别对8kb的mWAP基因座3′调控区、16 kb的hSA基因组编码序列及13 kb的mWAP基因座5′调控区进行连续3次基因抓捕,最终将全长37 kb的乳蛋白杂合基因座构入pBR322载体;通过PCR扩增、限制性内切酶消化和序列测定验证,确定mWAP基因座中的编码序列被精确地置换为hSA的基因组编码序列。结论:构建了整合有mWAP-hSA杂合基因座的pBR322载体,为研究杂合基因座在乳腺中的表达效果及置换型基因座表达的可行性提供了数据。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
乳清酸蛋白基因论文参考文献
[1].邵振鲁,吴晓洁,林艳丽,熊福银,周艳荣.连续3步缺口修复构建小鼠乳清酸蛋白-人溶菌酶杂合基因座[J].生物技术通讯.2012
[2].吴晓洁,林艳丽,施庚寿,熊福银,周艳荣.连续3次缺口修复构建小鼠乳清酸蛋白-人血清白蛋白杂合基因座[J].生物技术通讯.2012
[3].杜卫华,赵君,张守峰,任文陟,扈荣良.小鼠乳清酸蛋白上游调控序列的克隆及其指导下CAT基因在家兔乳腺中的表达[J].中国兽医学报.2003
[4].杜卫华,赵君,张守峰,王凤阳,宋德光.小鼠乳清酸蛋白上游调控序列的克隆及其指导下CAT基因在家兔乳腺中的表达[C].中国实验动物学会第五届学术年会论文汇编.2000
[5].张旭晨,成国祥,陈建泉,成勇,魏影允.小鼠乳清酸蛋白启动区指导人促红细胞生成素在转基因小鼠乳腺的表达[J].科学通报.1999
[6].卢一凡,邓继先,肖成祖,马清钧.乳清酸蛋白基因调控序列的鉴定及转基因小鼠乳腺表达G-CSF载体的构建[J].中国兽医学报.1998
[7].卢一凡,邓继先,周江,肖成祖,马清钧.乳清酸蛋白(WAP)基因调控序列的鉴定及在小鼠乳腺细胞表达LacZ基因的研究[J].中国生物化学与分子生物学报.1998
论文知识图
