深黄被孢霉论文_王长远,全越,沈冰蕾,姚笛,于长青

导读:本文包含了深黄被孢霉论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:深黄,突变,花生,脂肪酸,差异,微生物,亚麻酸。

深黄被孢霉论文文献综述

王长远,全越,沈冰蕾,姚笛,于长青[1](2016)在《深黄被孢霉Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因在毕赤氏酵母SMD1168中表达的研究》一文中研究指出引物根据Δ~6-脂肪酸脱氢酶(D6D)基因以及酵母蛋白表达载体p GAPZαA的多克隆位点进行引物设计,并在上游插入ECo RⅠ位点、下游插入XhoⅠ位点,从深黄被孢霉中克隆D6D基因,构建p MD18-T-D6D载体与p GAPZαA-D6D载体。将重组质粒线性化,并将其电转导入到毕赤氏酵母(Pichia pastoris SMD1168)中,Zeocin抗生素筛选高拷贝转化子,对重组菌进行诱导表达。经过Tricine-SDS-PAGE分析和蛋白质免疫印迹(Western bloting)试验,证明Δ~6-脂肪酸脱氢酶融合蛋白具有免疫学活性。结果成功构建了重组酵母p GAPZαA-SMD1168,为利用基因工程菌生产γ-亚麻酸(GLA)奠定理论基础。(本文来源于《农产品加工》期刊2016年14期)

郝冉,楚乐乐,胡申才[2](2016)在《基于代谢控制育种技术选育深黄被孢霉γ-亚麻酸高产菌株》一文中研究指出为了获得深黄被孢霉合成γ-亚麻酸(GLA)的高产菌株,该研究采用了紫外照射和氮离子注入技术2种诱变方法建立突变体库。根据γ-亚麻酸代谢合成途径中的部分关键因子,设计并建立抗丙二酸和红四氮唑(TTC)筛选模型,旨在提高菌体生物量和不饱和脂肪酸含量。结果显示,采用丙二酸质量浓度为2 g/L的平板可筛选得到高产油脂菌株;在发酵培养的第54小时收集菌体,用0.9%TTC染色4 h,可作为TTC法的最佳染色条件。经过两轮不同方法的诱变筛选后,最终得到了一株具良好遗传稳定性的突变株I-0281,其GLA产量为889.80 mg/L,比原始菌株提高了60.27%。(本文来源于《中国酿造》期刊2016年04期)

张敏,关随霞,张玉先,韩四海[3](2016)在《响应面法优化深黄被孢霉产油突变株的发酵培养基配方》一文中研究指出为了优化深黄被孢霉突变株的发酵培养基,在单因素实验基础上,采用响应面法(RSM)对深黄被孢霉产油突变株发酵培养基配方进行优化。结果表明,深黄被孢霉产油突变株最佳发酵培养基配方为:葡萄糖90.29 g/L,酵母膏4.14 g/L,Mg SO40.96 g/L,KH2PO41.99 g/L,p H 6.0。在最佳条件下油脂产量为12.01 g/L,比优化前(6.22 g/L)提高了93.09%。(本文来源于《中国油脂》期刊2016年03期)

杨勇,王中江,毕爽,张辉,李杨[4](2016)在《深黄被孢霉突变菌株发酵制备花生四烯酸工艺研究》一文中研究指出在单因素试验基础上,采用响应面分析法优化深黄被孢霉突变菌株发酵制备花生四烯酸工艺,确定最优发酵工艺条件为:接种量15.66%,发酵温度28.29℃,发酵时间6.58 d,发酵p H 5.96。花生四烯酸产量为3.12 g·L-1,在最优发酵工艺条件下,可提高产量,同时减少接种量,缩短发酵时间,降低生产成本。(本文来源于《东北农业大学学报》期刊2016年01期)

张敏,袁云霞,张玉先,王大红,韩四海[5](2015)在《深黄被孢霉产脂突变株培养条件优化研究》一文中研究指出为了优化深黄被孢霉突变株的培养基,采用单因素与正交试验法相结合对油脂高产突变株深黄被孢霉产油培养基进行优化。单因素试验得到初步发酵培养基成分为葡萄糖、酵母膏和MgSO_4。选取葡萄糖、酵母膏和MgSO_43个对油脂产量影响较为显着的培养基成分作为优化对象,得到最佳培养基参数:葡萄糖80.0g/L、酵母膏3.8g/L和MgSO_40.8g/L,在此条件下油脂产量为11.08g/L,比优化前(6.22 g/L)提高了78.14%。(本文来源于《粮油加工(电子版)》期刊2015年12期)

刘胜男,王亚洲,李市场,李晓琳,石琳霞[6](2015)在《基于代谢调控深黄被孢霉产γ-亚麻酸培养基优化》一文中研究指出研究深黄被孢霉产γ-亚麻酸过程的代谢调控,从中得出对深黄被孢霉产γ-亚麻酸有促进作用的营养成分,并利用Plackett-Burman实验对培养基营养成分进行筛选。得出葡萄糖、KNO3、乙酸钠、柠檬酸钠为影响产油量的关键因素。在此基础上,以γ-亚麻酸产量为响应值,采用响应面法优化,确定4个关键因素的最佳水平。综合Plackett-Burman实验和响应面法确定的最佳培养基配方为:葡萄糖100.90 g/L、KNO31.57 g/L、乙酸钠3.42 g/L、柠檬酸钠4.56 g/L、酵母膏3.75g/L、KH2PO42.25 g/L、Mg SO4·7H2O 0.60 g/L、Ca Cl20.30 g/L、Fe SO40.15 g/L、Zn SO40.20 g/L。在最佳条件下γ-亚麻酸的产量达1 525.20 mg/L,比初始产量725.90 mg/L提高了1.1倍。(本文来源于《中国油脂》期刊2015年09期)

姜楠,于长青[7](2015)在《深黄被孢霉高产花生四烯酸差异表达基因的鉴定及序列分析》一文中研究指出为了分析不同花生四烯酸产量深黄被孢霉的差异表达基因与花生四烯酸含量的相关性,利用前期构建的不同花生四烯酸产量的深黄被孢霉消减cDNA文库,并采用反向斑点杂交技术,对该文库进行差异表达基因的鉴定,同时对鉴定的差异表达基因进行分析。结果获得了诱变前后深黄被孢霉的差异表达基因共55个。对55个阳性克隆进行测序和序列分析,结果显示25个基因在深黄被孢霉诱变前后差异表达,其中22个基因是霉菌或其他真菌基因的已知序列,其他3个基因无明显的相似序列。这些差异表达基因的鉴定可能与花生四烯酸的产生密切相关,这为进一步探讨深黄被孢霉生产花生四烯酸的分子机理研究提供一定的参考。(本文来源于《农产品加工》期刊2015年12期)

刘胜男[8](2015)在《γ-亚麻酸产生菌深黄被孢霉的诱变选育》一文中研究指出γ-亚麻酸(γ-linolenic acid,GLA)作为人体必需脂肪酸参与细胞膜的组成,是前列腺素(PG)、血栓素A2(TxA2)和白叁烯(LT)的直接前体。对人体的激素调节和脂肪酸代谢也发挥着重要作用,尤其在心血管疾病、糖尿病并发症、特征性湿疹、病毒感染以及癌症等方面具有很好的预防与治疗作用。传统的γ-亚麻酸主要来源于植物,由于资源和环境的局限性近年来微生物法生产γ-亚麻酸的研究逐渐成为了热门。本文以深黄被孢霉As3.3410为出发菌株,通过对紫外氯化锂复合诱变和初筛条件的研究,建立了快速、便捷、高通量的诱变筛选体系。诱变条件,氯化锂添加量3 g/L,紫外诱变时间30 s;初筛,马来酰肼在培养基中的添加量为40mg/L,深黄被孢霉中脂肪酸脱氢酶酶活测定的条件为pH8.4、温度35℃、红四氮唑(TTC)添加量0.8%、时间1 h。经过反复诱变筛选获得一株遗传稳定的γ-亚麻酸高产菌株F312。其γ-亚麻酸产量达到了1236 mg/L,比出发菌株(725mg/L)提高了70%。研究深黄被孢霉产γ-亚麻酸过程的代谢调控,从中得出对深黄被孢霉产γ-亚麻酸有促进作用的营养成分,并利用Plackett-Burman实验设计和响应面设计对培养基营养成分进行筛选优化。Plackett-Burman实验设计与统计分析表明:葡萄糖、KNO3、乙酸钠、柠檬酸钠为发酵的关键因素。以γ-亚麻酸产量为响应目标,对4因素进行中心旋转组合设计,并经响应面法优化分析得到影响γ-亚麻酸产量的二阶模型,确定出四个关键因素的最佳水平。综合Plackett-Burman实验设计和中心旋转组合设计得出最佳的培养基配方:葡萄糖100.90 g/L、KNO3 1.57 g/L、乙酸钠3.42 g/L、柠檬酸钠4.56 g/L、酵母膏3.75 g/L、KH2PO42.25 g/L、MgSO4?7H2O 0.60 g/L、CaCl2 0.30 g/L、Fe SO4 0.15 g/L、ZnSO4 0.20g/L。在最佳条件下γ-亚麻酸产量达到了1500.73 mg/L比诱变后产量1236 mg/L提高了21%。(本文来源于《河南科技大学》期刊2015-06-01)

杨溪[9](2015)在《深黄被孢霉诱变菌株Δ5脂肪酸脱氢酶基因在酵母中的表达》一文中研究指出花生四烯酸(ARA)是由亚油酸和亚麻酸等经过脱氢和碳链延长的反应合成,而此过程中△5脂肪酸脱氢酶可催化此反应,作为ARA合成途径中的限速酶,在反应中起到了脱饱和的作用。本研究采用pBR322作为克隆载体,以提取的深黄被孢霉基因组总的RNA为模版通过反转录和重组克隆获得△5脂肪酸脱氢酶基因,再以pGAPZαA作为表达载体将△5脂肪酸脱氢酶基因转入巴斯德毕赤酵母SMD1168中进行表达,并验证检验其对二高-γ亚麻酸底物的转化率水平。为后续开展脂肪酸脱氢酶功能性表达及新型菌株构建研究奠定理论基础。本研究通过克隆获得的基因片段长度为1364bp,通过NCBI-Blast在线对比可知,此克隆片段不仅与已公布的深黄被孢霉的△5脱氢酶基因(AF067654)的同源性很高,而且同样具有完整开放阅读框(1341bp),可编码446个氨基酸。在序列中还存在脂肪酸脱氢酶特有的3个极保守的组氨酸簇,以上结果证明了克隆获得的基因片段为△5脂肪酸脱氢酶基因。采用电击转化法诱导构建带有△5脂肪酸脱氢酶基因重组酵母工程菌株,表达产物经SDS-PAGE电泳和Western bloting鉴定分析,分子量在50kDa左右,且具有生物活性。通过发酵验证试验,采用GC对重组酵母工程菌株发酵液进行脂肪酸的分析,该工程菌株具备生产花生四烯酸的能力,发酵液中花生四烯酸占总脂肪酸含量的9.53%,且对底物二高γ-亚麻酸转化率达到了51.7%。(本文来源于《黑龙江八一农垦大学》期刊2015-06-01)

杨晓霞,何仕武,赵汝丽,魏云林,林连兵[10](2015)在《mRNA差异显示技术研究低温条件下深黄被孢霉基因的表达差异》一文中研究指出mRNA差异显示技术已经广泛应用于研究植物、动物和微生物在各种环境条件下基因的差异表达研究.研究以15℃和30℃培养的深黄被孢霉M6-22菌体为材料,利用mRNA差异显示技术研究两种培养条件下基因的表达差异.经实时荧光定量PCR验证,共获得7条差异片段,相似性搜索结果表明它们是6-磷酸葡萄糖异构酶、单糖核苷酸转运蛋白、Ras1鸟苷酸转移因子、依赖于NAD的苹果酸脱氢酶、Δ12-脂肪酸脱氢酶、CLK4关联的丝氨酸/精氨酸丰富蛋白和假定蛋白,涉及糖酵解、蛋白质修饰、信号传导、脂肪酸合成和mRNA加工等生命过程,表明深黄被孢霉M6-22低温适应性是多种途径协同调控的结果.(本文来源于《云南大学学报(自然科学版)》期刊2015年02期)

深黄被孢霉论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

为了获得深黄被孢霉合成γ-亚麻酸(GLA)的高产菌株,该研究采用了紫外照射和氮离子注入技术2种诱变方法建立突变体库。根据γ-亚麻酸代谢合成途径中的部分关键因子,设计并建立抗丙二酸和红四氮唑(TTC)筛选模型,旨在提高菌体生物量和不饱和脂肪酸含量。结果显示,采用丙二酸质量浓度为2 g/L的平板可筛选得到高产油脂菌株;在发酵培养的第54小时收集菌体,用0.9%TTC染色4 h,可作为TTC法的最佳染色条件。经过两轮不同方法的诱变筛选后,最终得到了一株具良好遗传稳定性的突变株I-0281,其GLA产量为889.80 mg/L,比原始菌株提高了60.27%。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

深黄被孢霉论文参考文献

[1].王长远,全越,沈冰蕾,姚笛,于长青.深黄被孢霉Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因在毕赤氏酵母SMD1168中表达的研究[J].农产品加工.2016

[2].郝冉,楚乐乐,胡申才.基于代谢控制育种技术选育深黄被孢霉γ-亚麻酸高产菌株[J].中国酿造.2016

[3].张敏,关随霞,张玉先,韩四海.响应面法优化深黄被孢霉产油突变株的发酵培养基配方[J].中国油脂.2016

[4].杨勇,王中江,毕爽,张辉,李杨.深黄被孢霉突变菌株发酵制备花生四烯酸工艺研究[J].东北农业大学学报.2016

[5].张敏,袁云霞,张玉先,王大红,韩四海.深黄被孢霉产脂突变株培养条件优化研究[J].粮油加工(电子版).2015

[6].刘胜男,王亚洲,李市场,李晓琳,石琳霞.基于代谢调控深黄被孢霉产γ-亚麻酸培养基优化[J].中国油脂.2015

[7].姜楠,于长青.深黄被孢霉高产花生四烯酸差异表达基因的鉴定及序列分析[J].农产品加工.2015

[8].刘胜男.γ-亚麻酸产生菌深黄被孢霉的诱变选育[D].河南科技大学.2015

[9].杨溪.深黄被孢霉诱变菌株Δ5脂肪酸脱氢酶基因在酵母中的表达[D].黑龙江八一农垦大学.2015

[10].杨晓霞,何仕武,赵汝丽,魏云林,林连兵.mRNA差异显示技术研究低温条件下深黄被孢霉基因的表达差异[J].云南大学学报(自然科学版).2015

论文知识图

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