刘凤琴(大庆油田总医院龙南医院163453）
【中图分类号】R392.1【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2013）14-0423-02
【摘要】目的讨论免疫球蛋白的检验。方法对采集到的样本进行检验，从而为医生诊断提供可靠依据。结论免疫球蛋白(Ig)是具有抗体活性和(或)抗体样结构的一类球蛋白，它存在于机体的血液、体液、外分泌腺及某些细胞膜上，约占血浆蛋白总量的20%。它是机体免疫系统重要的组成部分，又是机体进行自我调节的重要因素。
【关键词】免疫球蛋白检验
免疫球蛋白(Ig)是具有抗体活性和(或)抗体样结构的一类球蛋白，它存在于机体的血液、体液、外分泌腺及某些细胞膜上，约占血浆蛋白总量的20%。它是机体免疫系统重要的组成部分，又是机体进行自我调节的重要因素。
1.测定方法
(1)IgG、IgM、IgA和轻链测定方法有单向琼脂扩散法与散射比浊法：单向琼脂扩散法原理是将抗血清均匀的分散于琼脂或琼脂糖凝胶内，胶板上打孔，孔内注入抗原或待测血清，抗原向含有抗血清的胶内呈放射状(环状)扩散，在抗原抗体的量达到一定比例时形成可见的沉淀线。在一定条件下，抗原含量越高，沉淀环越大。将已知含量的标准抗原稀释成不同浓度，分别置于含抗体的琼脂板上，以沉淀环的大小和抗原含量做图得到一条标准曲线，通过待测标本的沉淀环大小在标准曲线上可以找到对应的抗原浓度。该方法由于影响因素多，实验时间较长，结果的重复性差，目前基本上已被自动化分析所替代。
散射比浊法是指一定波长的光沿水平轴照射，通过溶液时遇到抗原抗体复合物粒子，光线被粒子颗粒折射，发生偏转，光线偏转的角度与发射光的波长和抗原抗体复合物颗粒大小和多少密切相关。散射光的强度与复合物的含量成正比，即待测抗原越多，形成的复合物越多，散射光强度越强。多种自动化免疫分析仪采用速率散射比浊测定方法，使免疫球蛋白的测定更快速、方法更可靠、结果更准确。速率的含义是指在单位时间内抗原抗体结合形成免疫复合物的速度。抗原和相应抗体以一定比例混合后，随着反应时间的延长，免疫复合物的总量逐渐增加，而速率的变化是慢-快-慢，反应时间最快的某一时刻称为速率峰。当反应液中的抗体量保持过剩时，速率峰的高低与抗原含量成正比，仪器自动通过标准曲线将速率峰值转化为所测抗原的终浓度。反应液中加入促聚剂聚乙二醇可加速抗原抗体复合物的形成，达到快速检测的目的。
(2)血清总IgE测定方法有放射免疫法、化学发光免疫分析法、乳胶颗粒免疫浊度法和酶联免疫试验：血清总IgE由于含量较低，对测定方法的灵敏度要求较高。放射免疫法常用125Ⅰ标记抗人IgE为第二抗体，测定值与待测血清中IgE含量呈正相关。化学发光免疫分析法是将化学发光分析和免疫反应相结合而建立的一种新的免疫分析技术。利用发光信号的测量仪器，分析接收的光量子产额，通过计算机系统转化成被测物质的浓度单位。
针对不同过敏原的特异性IgE测定目前多采用固相荧光免疫测定法，又称为CAP变应原检测系统。检测时在吸附有特异性抗原的纤维素颗粒上，加入待测血清后孵育、冲洗，再加入β-半乳糖苷酶标记的抗人IgE，使之与固定在纤维素上的特异性IgE结合。β-半乳糖苷酶作用于此后加入4-甲基-β-半乳糖苷使之产生荧光，读取吸光度值。通过标准曲线，找出相应的IgE浓度。
(3)IgD测定方法有放射免疫测定、乳胶颗粒免疫浊度法、单向环状免疫扩散法：乳胶颗粒免疫浊度法是将抗人IgD抗体吸附在大小适中、均匀一致的乳胶颗粒上，当遇到相应抗原时，则使乳胶颗粒发生凝集。单向环状免疫扩散法将抗血清均匀的混合于琼脂糖凝胶内，待测样品中的抗原呈辐射状向含抗体的凝胶内扩散，当抗原与抗体的量达恰当比例时形成可见的沉淀环。沉淀环的直径与抗原含量成正比。
2.参考范围
(各实验室仪器方法不同，参考值有所区别)
血：(成人)IgG：7.0～17.0g/L，IgA：0.7～3.8g/L，IgM：0.6～2.5g/L
IgE<lOOIU/ml；IgD<：200IU/ml。
(婴幼儿)IgG：5.7～13.7g/L，IgA：0.02～1.62g/L，IgM：0.54～2.01g/L。
血：κ：598～1329mg/dl；λ：280～665mg/dl。
尿：κ<18.5mg/dl；λ＜5.0mg/dl。
3.检测指征
(1)免疫缺陷疾病的诊断与监测：如原发性体液免疫缺陷病，由恶性肿瘤、感染、代谢性疾病、营养不良和其他疾病等诱发因素导致的继发性免疫缺陷病。
(2)免疫增殖疾病的诊断与监测：如多发性骨髓瘤、原发性巨球蛋白血症、恶性淋巴瘤等原发性单克隆丙种球蛋白，单核细胞白血病、风湿性疾病、冷球蛋白血症等继发性单克隆丙种球蛋白病。
(3)超敏反应性疾病的诊断与监测：由IgE介导的I型超敏反应是临床上最多见的一种变态反应性疾病。
(4)感染性疾病的诊断与监测：如细菌、病毒等慢性感染导致的Ig异常。
参考文献
陶义训编.免疫学和免疫学检验.1989.