导读:本文包含了酪氨酸磷酸化蛋白论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:酪氨酸,磷酸化,蛋白,精子,对虾,塔里木,蛋白质。
酪氨酸磷酸化蛋白论文文献综述
杨梅[1]（2015）在《N-糖基化和酪氨酸磷酸化蛋白的分离富集研究》一文中研究指出糖基化修饰和磷酸化修饰是两种重要的蛋白质翻译后修饰方法,但翻译后修饰蛋白或肽段在生物体内含量极低,在质谱鉴定中常常被其他中高丰度蛋白或肽段的信号所淹没。因此,发展简单快速、高效、特异的翻译后修饰蛋白的分离富集方法具有重要意义。本研究以尿液为研究对象,采用自制的C18反相固相萃取柱,结合高pH反相分离技术,分离了尿液中的蛋白质,并采用液质联用技术从尿液中鉴定到了 2550个蛋白。以多组分嵌段亲水聚合物修饰的HILIC填料为固相材料,建立了人尿液中N-糖基化修饰蛋白的富集新方法,质谱结果表明可鉴定到1331个N-糖基化肽段,对应612个糖基化蛋白。论文又以小鼠肝脏为研究对象,发展了小鼠肝脏蛋白中酪氨酸磷酸化蛋白/肽段的串联富集鉴定策略。首先将TiO2富集技术与C18反相固相萃取技术联合使用,成功地分离富集了小鼠肝脏蛋白中的磷酸化蛋白/肽段。随后采用酪氨酸磷酸化抗体从TiO2富集产物中实现了酪氨酸磷酸化蛋白/肽段的特异性富集。质谱鉴定结果表明,经过TiO2富集后,在小鼠肝脏蛋白中鉴定到了 1297个磷酸化肽段,再经酪氨酸抗体富集后,鉴定到916个酪氨酸磷酸化肽段,酪氨酸磷酸化肽段占鉴定到的总磷酸化肽段的70.62%。(本文来源于《东北大学》期刊2015-06-01）
王黉遒,战毅[2]（2015）在《蛋白酪氨酸磷酸酶基因和磷酸化蛋白激酶B在中耳胆脂瘤上皮中的表达和意义》一文中研究指出目的检测蛋白酪氨酸磷酸酶基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)、磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,P-AKT)在人类中耳胆脂瘤上皮组织中的表达情况及其相关性,探讨他们在中耳胆脂瘤上皮细胞形成机制中的重要作用。方法应用免疫组织化学SP法检测40例人中耳胆脂瘤组织标本及15例正常皮肤标本中PTEN、P-AKT蛋白的表达。结果免疫组化显示细胞质PTEN主要在胆脂瘤组织和正常皮肤组织的上皮细胞浆着色,阳性表达率为50.0%,明显低于正常皮肤组的86.6%(χ2=5.075,P<0.01);P-AKT蛋白在中耳胆脂瘤上皮组织和正常皮肤组的上皮细胞浆着色,阳性表达率分别为72.5%和26.7%,两者差异具有显着性(χ2=7.605,P=0.006,P<0.01),15例外耳道正常上皮组织中,PTEN与P-AKT蛋白的表达之间呈显着负相关(r=-0.689,P<0.0001,P<0.01)。结论 PTEN和P-AKT蛋白在中耳胆脂瘤上皮组织中的异常表达可能与胆脂瘤上皮的高度增殖和抗凋亡状态密切相关。PTEN蛋白表达缺失导致其抑制作用减弱,使P-AKT蛋白表达过度,继而引起胆脂瘤上皮细胞凋亡受抑制。(本文来源于《中国耳鼻咽喉头颈外科》期刊2015年01期）
冯继兴[3]（2014）在《酪氨酸磷酸化蛋白和胞质动力蛋白在对虾白斑症病毒（WSSV）感染过程中的作用研究》一文中研究指出为研究蛋白酪氨酸磷酸化在WSSV感染过程中所发挥的作用，本论文综合运用磷酸化特异性流式细胞术、激光共聚焦显微技术和蛋白免疫印迹法（westernblotting）检测了WSSV感染后中国对虾血细胞中蛋白酪氨酸磷酸化水平的变化，并通过基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱（Matrix-assisted laserdesorption/ionization tandem mass spectrometry: MALDI-TOF-MS/MS）鉴定了血细胞内在WSSV感染过程中发生酪氨酸磷酸化的蛋白质。以期为WSSV和宿主细胞相互作用过程的研究提供理论基础。研究表明，胞质动力蛋白在很多病毒的感染过程中发挥转运病毒的功能。为研究其在WSSV感染过程中的作用，本论文首次克隆得到了胞质动力蛋白中间链基因，综合运用实时荧光定量PCR检测技术、激光共聚焦显微技术和RNA干扰技术研究了胞质动力蛋白在WSSV感染过程中基因表达量的变化及其在WSSV转运过程中的作用。本研究为探索WSSV在宿主细胞内的转运过程提供了研究线索和理论基础。具体研究内容包括以下几个部分：（1）利用磷酸化特异性流式细胞术检测了WSSV感染后中国对虾血细胞内蛋白酪氨酸磷酸化水平的变化。结果显示，WSSV感染后，中国对虾血细胞分为两群：R2和R3，其中R2群血细胞表现出蛋白酪氨酸磷酸化水平的下降，而R3群血细胞则表现出蛋白酪氨酸磷酸化水平的升高。随着WSSV感染进程的持续，总体血细胞的平均蛋白酪氨酸磷酸化水平表现出显着的动态变化并呈现出上调趋势，分别在WSSV感染后1和12h出现两个峰值。（2）通过激光共聚焦显微镜观察到的WSSV感染后中国对虾血细胞内蛋白酪氨酸磷酸化信号强度变化和western blotting检测到的中国对虾血细胞内蛋白酪氨酸磷酸化蛋白条带粗细的变化与流式检测的中国对虾血细胞内蛋白酪氨酸磷酸化水平的变化趋势基本一致。激光共聚焦显微观察结果显示酪氨酸磷酸化蛋白既存在于血细胞质中也存在于细胞核中，但是WSSV感染后细胞核中酪氨酸磷酸化水平的变化较细胞质显着。Western blotting共检测到五个酪氨酸磷酸化蛋白，经质谱鉴定为α2-巨球蛋白（Alpha-2-macroglobulin:A2M）、热应激蛋白70（Heat shock protein70: HSP70）、组蛋白H3（Histone H3）、组蛋白H2A（Histone H2A）和组蛋白H4（Histone H4），其中HSP70、组蛋白H3和组蛋白H4只在WSSV感染后才发生酪氨酸磷酸化；利用实时荧光定量技术检测了中国对虾血细胞内组蛋白H2A、H3和H4基因表达量在WSSV感染后的变化，叁者在病毒感染后均显着性上调表达。（3）首次利用RACE技术从甲壳纲动物——中国对虾血细胞克隆得到了胞质动力蛋白中间链（FcDYNCI）基因全序列，为研究胞质动力蛋白在WSSV转运过程中的作用奠定了基础。结果显示，FcDYNCI cDNA序列全长2582bp，含有一个1983bp的开放阅读框，该开放阅读框可以编码一个含有660个氨基酸的多肽，其理论分子量和理论等电点分别为73.4kDa和5.16。通过与昆虫纲的四种DYNCI蛋白的多序列比对分析，结果表明FcDYNCI属于胞质动力蛋白Ⅱ型中间链蛋白。（4）利用实时荧光定量技术检测了FcDYNCI基因在健康中国对虾体内各组织中的表达差异，结果显示，FcDYNCI基因在血细胞中的表达量远高于其他组织；WSSV感染后，中国对虾血细胞内FcDYNCI基因表现出显着性上调表达，约为未感染WSSV中国对虾血细胞内FcDYNCI基因表达量的3倍；WSSV感染12h后，对虾血细胞内的胞质动力蛋白能够与WSSV共定位。（5）利用RNAi技术对中国对虾体内FcDYNCI基因进行了沉默，经过两次FcDYNCI dsRNA注射后，血细胞内FcDYNCI基因表达量和蛋白量都出现显着性下调；在沉默FcDYNCI基因后，血细胞内WSSV叁种基因ie1、wsv477和vp28在24h均表现出最大程度的下调表达，分别约为对照组的1/2700、1/3000和1/150。（6）利用STRING软件预测了FcDYNCI的相互作用蛋白，结果显示除胞质动力蛋白的其他组成链外，Rab7与FcDYNCI发生相互作用的概率达到80%。我们试图利用兔抗Rab7多抗，通过免疫共沉淀实验验证两者之间的相互作用关系。结果显示，在沉淀物中确实存在一条分子量大约为74kDa的蛋白条带。但是，将此条带进行质谱鉴定后，结果显示这个蛋白不能与FcDYNCI蛋白的氨基酸序列匹配。(本文来源于《中国海洋大学》期刊2014-05-23）
库尔班·吐拉克,敬斌宇,迪力夏提,王旭光,李和平[4]（2013）在《塔里木马鹿不同个体冻融精子酪氨酸磷酸化蛋白的差异表达初报》一文中研究指出蛋白的酪氨酸磷酸化对精子运动力的维持,精子获能,超激活运动以及顶体反应等生理过程十分重要。为探讨塔里木马鹿不同生理状态下,不同个体精液精子蛋白酪氨酸磷酸化的关系,以塔里木马鹿冷冻保存的精子为试验材料,采用非离子型去污剂(NP-40)裂解法提取精子膜蛋白,用SDS-PAGE凝胶电泳和Western免疫印迹技术检测精子膜蛋白及发生酪氨酸磷酸化蛋白的表达情况。结果表明:精液异常(黄棕色,黏稠)个体的冻融精子活力,精子蛋白酪氨酸磷酸化水平明显下降(P<0.01);含卵黄稀释液作为冷冻保存稀释时,其冻融精子蛋白的磷酸化水平显着高于无卵黄稀释液的其它个体(P<0.05);另外,相同生理状态下冷冻保存的不同个体的冻融精子酪氨酸磷酸化蛋白的表达水平也有显着差异(P<0.05),但除了精液异常个体外所有公鹿冻融精子的40 ku和47 ku蛋白的磷酸化表现出较强的表达(P<0.05)。以上结果提示,塔里木马鹿冻融精子蛋白酪氨酸磷酸化水平与精液的生理状态有关,并且不同个体之间也存在一定的差异。(本文来源于《经济动物学报》期刊2013年03期）
胡启蒙,张媛媛,陈振亮,王亮亮,李新红[5]（2012）在《猪精子获能前后细胞亚组分蛋白分离及酪氨酸磷酸化蛋白的鉴定》一文中研究指出本研究对猪精子获能前后细胞亚组分蛋白进行分离以及对酪氨酸磷酸化蛋白进行鉴定,旨在为哺乳动物精子受精生物学研究奠定理论基础。利用动物精子体外获能培养、细胞亚组分分离技术及蛋白免疫印迹的方法,分离猪精子细胞亚组分蛋白及酪氨酸磷酸化蛋白鉴定。结果表明,猪精子经过获能培养后各项活力指标均得到显着提高,且与精子蛋白发生酪氨酸磷酸化修饰密切相关;获能精子中126、108、79ku的高分子量蛋白磷酸化程度明显高于未获能精子;分子质量约为25、47、50ku的膜蛋白及47ku胞浆蛋白发生酪氨酸磷酸化,其中25、47ku的膜蛋白酪氨酸磷酸化程度显着高于未获能精子(P<0.05);分子量约为23、37、42～50ku的核蛋白发生酪氨酸磷酸化,获能精子中23ku的核蛋白酪氨酸磷酸化程度显着高于未获能精子(P<0.05)。结果提示,猪精子细胞不同亚组分中,发生酪氨酸磷酸化修饰的蛋白以膜蛋白及核蛋白为主,同时有少量的胞浆蛋白。(本文来源于《畜牧兽医学报》期刊2012年08期）
李曼[6]（2011）在《HCV NS3质粒转染的肝细胞中差异表达酪氨酸磷酸化蛋白的筛选》一文中研究指出目的：通过差异磷酸化蛋白质组学研究,筛选和鉴定出HCV/NS3质粒转染肝细胞后差异表达的酪氨酸磷酸化蛋白。方法：首先建立细胞系,将HCV/NS3质粒(pRcHCNS3-5')和空白质粒(pRcCMV)分别转染入人源性肝细胞系QSG7701,通过G418筛选,构建稳定表达HCV/NS3蛋白的细胞系(QSG/NS3)和阴性对照组(QSG/CMV)。通过RT-PCR检测转染细胞HCV/NS3表达情况。然后进行蛋白质组学分析,分别抽提两组细胞的总蛋白,每组蛋白平行进行2次双向凝胶电泳,其中一块作为制备胶,另一块作为分析胶,分析胶中将蛋白质转移至PVDF膜后,与抗酪氨酸磷酸化抗体孵育,进行Western Blot分析,获得差异表达酪氨酸磷酸化蛋白质的反应图谱。将制备胶的电泳图谱和Western Blot的反应图谱进行比对分析,在制备胶上找到相应的差异酪氨酸磷酸化蛋白质点,经脱色、还原、酶解,通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析,获得肽质量指纹图(PMF),在Http://www.matrixscience.com/上搜索,匹配蛋白质,应用在线软件Netphos预测蛋白质酪氨酸磷酸化位点。结果：在QSG/NS3和QSG/CMV两组细胞系中,识别了13个差异表达的酪氨酸磷酸化蛋白质,其中鉴定了8个差异表达蛋白。4个蛋白质的酪氨酸磷酸化水平在QSG/NS3细胞系中表达上调,另4个蛋白质的酪氨酸磷酸化水平表达下调。软件预测每个蛋白质均存在酪氨酸磷酸化位点。结论：(1)鉴定出8个可能与HCV NS3致病相关的酪氨酸磷酸化蛋白质,为揭示HCV NS3致癌机制提供新的科学理论线索。(2)鉴定出的差异蛋白功能涉及细胞代谢、凋亡增殖及信号转导等方面。(3)应用在线软件分析预测蛋白质的酪氨酸磷酸化位点,鉴定出的8个蛋白均有至少一个酪氨酸磷酸化位点。(本文来源于《中南大学》期刊2011-05-01）
张旭成,袁慧敏,金一[7]（2010）在《酪氨酸磷酸化蛋白在体外获能猪精子上的分布》一文中研究指出为研究猪精子获能过程中蛋白酪氨酸磷酸化的变化规律,将猪精子悬浮于改良的Tris缓冲液(mTBM)获能培养基中,在5%CO2孵箱37℃培养,以考马斯亮蓝染液染色为指标评价精子获能状态,用免疫荧光技术检测酪氨酸磷酸化的蛋白在精子上的分布。结果显示,随着获能的进行,发生蛋白酪氨酸磷酸化的精子占总精子的百分比增加,由未获能前35%增至获能1.5 h时的88%,酪氨酸磷酸化的蛋白分布变广,由精子头部扩增至精子头部、鞭毛主段和中段。(本文来源于《畜牧与兽医》期刊2010年09期）
张士芳[8]（2010）在《体外获能马鹿精子酪氨酸磷酸化蛋白的分布与表达》一文中研究指出人及哺乳动物的受精过程是一系列的复杂事件。哺乳动物精子必须在雌性生殖道内经历成熟过程才能获得受精能力,这一现象称为获能(Capacitation)。精子获能是精卵结合的前提,许多因素参与调节精子获能,其中精子蛋白酪氨酸磷酸化是精子运动力、精子超激活运动、精子获能等多种生理生化过程的重要调控因素。精子获能的机理目前还不是十分清楚,但己知酪氨酸蛋白的磷酸化与精子获能相关,本研究的目的是研究酪氨酸磷酸化蛋白在马鹿精子获能过程中的变化。本研究以马鹿精子为研究对象,对体外获能过程中酪氨酸磷酸化的分布和表达规律进行了研究。采用上浮法TALP获能培养基诱导马鹿精子体外获能,以精子与金霉素(CTC)荧光结合类型为指标评价精子获能状态,用免疫荧光技术和Western blot方法检测酪氨酸磷酸化的蛋白在精子上的分布以及酪氨酸磷酸化水平的变化规律。结果显示：随着获能培养的进行,发生蛋白酪氨酸磷酸化的精子的比例增加,并且酪氨酸磷酸化分布由头部扩增至鞭毛,至获能后期几乎所有的精子上都出现酪氨酸磷酸化位点。Western blot在获能前检测到一种分子量为32kDa的酪氨酸磷酸化蛋白,获能后又检测到分子量为55kDa,37kDa,27kDa,80kDa和95kDa的磷酸化酪氨酸蛋白。酪氨酸磷酸化蛋白与马鹿精子获能具有一定的相关性。(本文来源于《东北林业大学》期刊2010-04-01）
谭运年,金亚平[9]（2008）在《前列腺癌和前列腺良性增生上皮细胞酪氨酸磷酸化蛋白谱分析》一文中研究指出前列腺癌一直是西方国家老年男性常见肿瘤,是男性肿瘤死亡的第二位病因。近年来,我国前列腺癌的发病率呈逐年上升趋势。虽然仅几十年在前列腺癌的研究中,取得了不少的成就,但有关前列腺癌的发生、发展机制仍不清楚,对其仍然难以制定有效的临床治疗策略。目前在这些大量的研究中,信号传导通路异常激活和磷酸化的修饰(本文来源于《2008年浙江省检验医学学术年会论文汇编》期刊2008-08-01）
魏继鹏,刘振华,谢惠芳,高筱雅[10]（2007）在《磷酸化蛋白酪氨酸激酶及信号转导子和转录激活子在谷氨酸诱导的PC12细胞凋亡中的表达研究》一文中研究指出目的探讨谷氨酸诱导PC12细胞凋亡后磷酸化蛋白酪氨酸激酶2(P-JAK2)、磷酸化信号转导子与转录激活子3(P-STAT3)表达的变化及意义。方法采用谷氨酸诱导PC12细胞发生凋亡,实验分为6组,分别为正常对照组、500μmol/L谷氨酸作用5、10、20、30、60 min组,应用流式细胞仪观察PC12细胞凋亡,Western blot定量观测PC12细胞P-JAK2与P-STAT3蛋白表达的变化。结果对照组PC12细胞的凋亡率为(2.71±0.32)%;经500μmol/L谷氨酸作用PC12细胞20 min,凋亡率增加到(61.20±4.60)%,与对照组相比差异有显着性意义(P=-0.000);Western blot检测结果表明P-JAK2 5 min在胞浆中开始表达,20 min达最高峰,是5 min组(3.52±0.20)倍(P= 0.002);P-STAT3 5 min表达增强,30 min达高峰,为5 min组的(4.76±0.17)倍(P=0.000)。结论细胞损伤激活了JAK/STAT信号转导通路,该通路参与了神经细胞凋亡的过程。(本文来源于《中华神经医学杂志》期刊2007年06期）
酪氨酸磷酸化蛋白论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的检测蛋白酪氨酸磷酸酶基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)、磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,P-AKT)在人类中耳胆脂瘤上皮组织中的表达情况及其相关性,探讨他们在中耳胆脂瘤上皮细胞形成机制中的重要作用。方法应用免疫组织化学SP法检测40例人中耳胆脂瘤组织标本及15例正常皮肤标本中PTEN、P-AKT蛋白的表达。结果免疫组化显示细胞质PTEN主要在胆脂瘤组织和正常皮肤组织的上皮细胞浆着色,阳性表达率为50.0%,明显低于正常皮肤组的86.6%(χ2=5.075,P<0.01);P-AKT蛋白在中耳胆脂瘤上皮组织和正常皮肤组的上皮细胞浆着色,阳性表达率分别为72.5%和26.7%,两者差异具有显着性(χ2=7.605,P=0.006,P<0.01),15例外耳道正常上皮组织中,PTEN与P-AKT蛋白的表达之间呈显着负相关(r=-0.689,P<0.0001,P<0.01)。结论 PTEN和P-AKT蛋白在中耳胆脂瘤上皮组织中的异常表达可能与胆脂瘤上皮的高度增殖和抗凋亡状态密切相关。PTEN蛋白表达缺失导致其抑制作用减弱,使P-AKT蛋白表达过度,继而引起胆脂瘤上皮细胞凋亡受抑制。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
酪氨酸磷酸化蛋白论文参考文献
[1].杨梅.N-糖基化和酪氨酸磷酸化蛋白的分离富集研究[D].东北大学.2015
[2].王黉遒,战毅.蛋白酪氨酸磷酸酶基因和磷酸化蛋白激酶B在中耳胆脂瘤上皮中的表达和意义[J].中国耳鼻咽喉头颈外科.2015
[3].冯继兴.酪氨酸磷酸化蛋白和胞质动力蛋白在对虾白斑症病毒（WSSV）感染过程中的作用研究[D].中国海洋大学.2014
[4].库尔班·吐拉克,敬斌宇,迪力夏提,王旭光,李和平.塔里木马鹿不同个体冻融精子酪氨酸磷酸化蛋白的差异表达初报[J].经济动物学报.2013
[5].胡启蒙,张媛媛,陈振亮,王亮亮,李新红.猪精子获能前后细胞亚组分蛋白分离及酪氨酸磷酸化蛋白的鉴定[J].畜牧兽医学报.2012
[6].李曼.HCVNS3质粒转染的肝细胞中差异表达酪氨酸磷酸化蛋白的筛选[D].中南大学.2011
[7].张旭成,袁慧敏,金一.酪氨酸磷酸化蛋白在体外获能猪精子上的分布[J].畜牧与兽医.2010
[8].张士芳.体外获能马鹿精子酪氨酸磷酸化蛋白的分布与表达[D].东北林业大学.2010
[9].谭运年,金亚平.前列腺癌和前列腺良性增生上皮细胞酪氨酸磷酸化蛋白谱分析[C].2008年浙江省检验医学学术年会论文汇编.2008
[10].魏继鹏,刘振华,谢惠芳,高筱雅.磷酸化蛋白酪氨酸激酶及信号转导子和转录激活子在谷氨酸诱导的PC12细胞凋亡中的表达研究[J].中华神经医学杂志.2007
论文知识图
