表达MERS-CoVS1蛋白重组狂犬病病毒rSRV9-MERSS1纯化方法的建立

论文摘要

建立一种可线性放大、应用于表达中东呼吸综合征冠状病毒（Middle East respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV）S1蛋白重组狂犬病病毒rSRV9-MERSS1的规模化纯化方法。将收获的病毒去除细胞碎片、灭活后,分别通过3种方法(醋酸锌沉淀+Sepharose 4FF凝胶过滤层析、500 000中空纤维超滤柱+Sepharose 4FF凝胶过滤层析、500 000中空纤维超滤柱+CellufineTMSulfate亲和层析)进行纯化,经比较筛选出一种温和、目的蛋白回收率高、纯度高的纯化方法。结果显示,500 000中空纤维超滤柱+Sepharose 4FF凝胶过滤层析回收的抗原含量最高,50 mL重组病毒原液经纯化后可得到1.82 mg蛋白,杂蛋白去除率达到97.02%,病毒纯度较高,电镜下可见到病毒囊膜刺突。结合成本等方面综合考虑,此方法优于其他2种纯化方法。本试验筛选获得了一种适用于rSRV9-MERSS1的纯化方法,为rSRV9-MERSS1规模化纯化工艺的建立与MERS新型疫苗的研制奠定了基础。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 刘川玉,金宏丽,迟航,李恩涛,胡星星,冯娜,赵永坤,高玉伟,王化磊,杨松涛,夏咸柱

关键词: 纯化,中空纤维超滤柱,亲和层析

来源: 中国兽医学报 2019年09期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 吉林农业大学动物科技学院,军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所,吉林大学动物医学院/人兽共患病研究教育部重点实验室,华南农业大学兽医学院,扬州大学江苏省重大动物传染病与人畜共患病预防与控制联合创新中心

基金: 国家“十三五”重点研发计划资助项目(2016YFD0501004)

分类号: S852.65

DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2019.09.17

页码: 1763-1769

总页数: 7

文件大小: 972K

下载量: 132

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