论文摘要
背景:近二十几年来伴随肥胖发病率的快速增加,一些肥胖相关的疾病如2型糖尿病的发病率也在快速上升,给个人、家庭和社会带来沉重的医疗负担。高脂膳食和运动不足是肥胖及其相关疾病的两个重要诱因。高脂膳食不仅可导致肥胖而且可引发胰岛素抵抗等;运动则改善高脂膳食诱导的胰岛素抵抗。了解骨骼肌胰岛素抵抗机制及运动干预的生理基础,对寻找肥胖或肥胖相关疾病防治的药理靶位点具有重要意义。研究表明mTORC1持续激活及慢性低度炎症在肥胖诱导的胰岛素抵抗中起了重要作用。炎症信号通常包括经典通炎症信号通路和非经典炎症信号通路,但mTORC1与经典和非经典炎症信号在高脂膳食状态下不同组织间的相互关系并不清楚。研究目的:本研究旨在用骨骼肌细胞、肝细胞和大鼠原代脂肪细胞在高脂环境孵育下进行相关体外细胞学实验,探讨高脂环境下雷帕霉素信号是否会影响炎症信号(NF-κB-P65)、非经典炎症信号(NF-κB-RelB)及其下游炎症因子。研究方法:首先体外培养大鼠骨骼肌L6细胞、大鼠原代脂肪细胞、肝脏BRL-3A细胞,待其分化为成熟。分化成熟的L6细胞、大鼠原代脂肪细胞、肝脏BRL-3A细胞分别按下述分组进行三个独立实验:(1)将分化的L6细胞、大鼠原代脂肪细胞、肝脏BRL-3A细胞置于浓度为0.5mM和0.2mM的软脂酸(PA)孵育液中孵育,然后在孵育0h,1h,3h,6h,12h,24h进行收样。(2)选取0.5mM浓度软脂酸孵育液中孵育的L6细胞、大鼠原代脂肪细胞、肝脏BRL-3A细胞再分别分为两组:高脂组(0.5mM PA)、高脂(0.5mM PA)+雷帕霉素(50nM)组,并在孵育0h,1h,3h,6h,12h进行收样。所有实验收样冻存于-80度保存。分别用于Westernblotting和荧光PCR定量检测炎症相关蛋白(NF-κB-P65、NF-κB-RelB、IL-6、TNF-α)基因表达和蛋白含量(P65、P-P65、RelB、P-RelB、IL-6和TNF-α)变化。内参基因采用ppia,并用2-ΔΔCt计算基因相对含量。所有数据用SPSS 17.0软件进行处理。数据用均数±标准差表示。组间差异用双因素方差分析高脂和雷帕霉素主效应,有主效应时进一步用Turkey进行两两比较。若有交互效应,进一步用单因素方差分析,显著水平为P<0.05。研究结果:(1)L6细胞、大鼠原代脂肪细胞、肝脏BRL-3A细胞在0.5mM浓度软脂酸孵育后比在0.2m M浓度软脂酸孵育后能更早地显著观察到NF-κB信号通路的激活和炎症因子的上调(P<0.05)(2)在骨骼肌细胞和脂肪细胞中软脂酸可激活NF-κB信号通路,促进炎症因子IL6、TNF-α的上调(P<0.05);在肝脏细胞中,软脂酸能使NF-κB-p65磷酸化上调,炎症因子TNF-α显著性增加(P<0.05)(3)用雷帕霉素干预软脂酸诱导的细胞后,骨骼肌细胞的NF-κB家族p65,Rel B表达量上调,炎症因子表达均上调(P<0.05);脂肪细胞中NF-κB家族p65,RelB,炎症因子表达均减少(P<0.05);肝脏细胞中NF-κB家族p65磷酸上调,炎症因子IL6、TNF-α表达增加(P<0.05)。研究结论:1.软脂酸可促进骨骼肌细胞,脂肪细胞,肝细胞中NF-κB通路的激活,引起炎症反应,同时NF-κB信号通路的激活和炎症因子IL6、TNF-α的上调与软脂酸有着相关的时间和剂量依赖性关系。2.雷帕霉素在不同组织细胞中的作用机制不同,在骨骼肌中进一步恶化了高脂引起的炎症反应,在脂肪细胞中却能抑制高脂引起的炎症因子的分泌,在肝脏中一定程度上恶化了炎症反应,并可能引发胰岛素抵抗。
论文目录
文章来源
类型: 国内会议
作者: 廖八根,屈浩飞
关键词: 高脂,炎症
来源: 第十一届全国体育科学大会 2019-11-01
年度: 2019
分类: 基础科学,社会科学Ⅱ辑
专业: 生物学,体育
单位: 广州体育学院
分类号: G804.2
DOI: 10.26914/c.cnkihy.2019.032418
页码: 7555-7556
总页数: 2
文件大小: 1646k
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