孙宝春[1]2003年在《乌拉地尔对伤害性刺激大鼠脊髓镇痛作用的研究》文中提出前言 乌拉地尔是α_1肾上腺素能受体阻滞剂，临床上主要用于高血压治疗中，其机理是阻断突触后α_1受体，使外周阻力明显下降，在中枢通过激活5-HT_(1A)受体的作用，降低延脑心血管调节中枢的交感神经反馈而起降压作用。 5-HT_(1A)受体大量存在于脊髓背角，在疼痛的神经传导中起着重要的作用，不但参与上行神经冲动的传导，也参与下行抑制性冲动传导的作用。 FOS免疫反应阳性细胞的检测是确定神经损伤程度和药物镇痛疗效的有力指标。SP作为初级传入神经末稍释放的物质，对伤害性刺激信息的传递和调控方面，扮演着至关重要的角色，检测SP也是判断镇痛药疗效的重要方法。 本实验通过增加可乐定、枢丹及吗啡等影响因素，以细胞外电生理技术和细胞免疫组织生化技术以及透射电镜来观察乌拉地尔在脊髓镇痛中的对比研究，以探讨其作用机制和相互作用。 实验材料与方法 一、实验材料 1．实验动物：Wistar大白鼠(中国医科大学动物实验中心) 2．主要仪器：图像分析仪(Quantime970，Cambridge Ins) 生理多导记录仪(PM6000，NIHON KOHDEN) 恒温水浴箱(上海医疗仪器厂) 透射电镜(1200EX，USA) 3．主要试剂：乌拉地尔注射液(西安制药厂) 可乐定注射液(北京制药厂) 枢丹注射液(宁波天衡制药厂) 吗啡注射液(沈阳第一制药厂) FOS—抗及试剂盒(博士德生物工程有限公司) SP—抗及试剂盒(博士德生物工程有限公司) 二、实验方法 实验动物250一320mg Wistar大白鼠以抽签方式随机分为8组，每组6只。分别是①正常对照组，实验动物不给以任何刺激，直接在麻醉后开胸灌注，取脊髓标本;②电刺激生理盐水组，实验动物给以长程电刺激后，开胸灌注，取脊髓标本;③电刺激乌拉地尔组，实验条件同电刺激生理盐水组;④电刺激可乐定组，实验条件同电刺激生理盐水组;⑤电刺激枢丹组，实验条件同电刺激生理盐水组;⑥电刺激乌拉地尔和可乐定复合用药组，实验条件同电刺激生理盐水组;⑦电刺激乌拉地尔和吗啡复合用药组，实验条件同电刺激生理盐水组;⑧电刺激乌拉地尔和枢丹复合用药组，实验条件同电刺激生理盐水组。 方法一:20%氨基甲酸乙脂1 .0扩kg腹腔麻醉下，取正中切口，锐、钝性剥离至棘突，在外科显微镜下暴露L:_4椎板，以咬合钳去除椎板，小心暴露L，_4段脊髓，以温盐水纱布覆盖。药物以注射器滴于脊髓表面，暴露游离坐骨神经，安置刺激电极，在L:水平以钨丝微电极(IMn)沿背根内侧垂直插人脊髓安置记录电极。设定电刺激参数为周期34Ins，波宽100畔，电压8v的单次电刺激，数据由PM6000生理多导记录仪记录。 所有数据均由又土s表示，运用配对及组间t检验行统计学分析。 方法二:20%氨基甲酸乙脂1 .0扩kg腹腔麻醉下，行气管插管，潘库澳铁0.Zm扩kg维持肌松。大白鼠在无菌操作下，沿背部中线Tl，一玩段做切口，剥离至L:椎板，在外科显微镜下用直径1.5~的球形牙钻在L:根板钻孔至暴露硬脊膜，以25G针头横向划开硬脊膜，用PO川陀X导管(内经0.28~，外径0.61~)改良后向尾侧置人约10~，骨水泥封闭创口并固定导管，逐步缝合软组织，皮下游离至颈部出皮肤并加以固定.动物苏醒后半小时以2%利多卡因10川以行利多卡因试验，若出现双后肢瘫痪、运动丧失，表明试验结果阳性，收人饲养笼内饲养，留待2一3天内做药物实验。实验时由留置导管内缓慢注人药液，暴露游离坐骨神经，将一对不锈钢电极环绕其上进行电刺激，由DUAL sEN一3205电子刺激仪于给药后10分钟行电刺激，参数为:单脉冲、间期0.lms、频率IHZ、直流电流lrnA.，时程为10分钟。半小时后大白鼠开胸，主动脉近端夹闭，远端插管，先以0.9%盐水冲去血液，再以sood含4%多聚甲醛和0.05%戊二醛的0.lmolL磷酸缓冲液(PBS.PH7.3)灌注固定.注毕，立即取肠_5段脊健及脊神经节，置人上述新鲜固定液中后固定，用于组化及电镜研究。 光镜下将切片上神经细胞内的FOS、SP免疫组织化学阳性信号投射到图象分析仪(Quantime 970，Combridge Inc)的荧光屏，经假彩色处理和灰度调节后，按设定程序确定每个免疫组织化学阳性信号的神经元，测量并读数其积分光密度值。测量结果均以又土s表示。实验结果 在乌拉地尔的剂量相关性实验中，乌拉地尔0.075mg组与盐水组相比，其复合动作电位的幅度与时程改变均不明显，P>0.05，差异不显着;乌拉地尔0.巧mg及0.3mg组与盐水组相比P<0.05，差异显着;但乌拉地尔0.3mg组与乌拉地尔0.巧mg组相比P>0.05，差异不显着;在乌拉地尔的对比性研究中，乌拉地尔组与盐水对照组相比，其复合动作电位的幅度与时程均延长，相关性检验P<0.05，差异显着;可乐定组与盐水对照组相比P<0.01，差异非常显着，与乌拉地尔组相比P<0.05，差异显着;乌拉地尔和可乐定组与盐水对照组相比P<0.01，差异非常显着，与乌拉地尔组相比P<0.05，差异显着，与可乐定组相比P>0.05，差异不显着。枢丹组与盐水对照组、乌拉地尔组相比P>0.05，
孙宝春, 贡祥林, 秦正敏[2]2003年在《乌拉地尔和枢丹对伤害性刺激大鼠脊髓镇痛的电生理研究》文中研究表明目的:通过乌拉地尔和枢丹影响大鼠脊髓神经电生理的观察,进行其对比性研究。方法:24只Wistar大鼠随机分为生理盐水组、0.5％乌拉地尔组、0.08％枢丹组、乌拉地尔和枢丹复合用药组,于坐骨神经行电刺激,在脊髓近心端记录其复合动作电位。结果:0.5％乌拉地尔组与生理盐水组相比,脉冲电压的幅度改变及传导时程的改变显着(P<0.05);0.08％枢丹组与盐水对照组和0.5％乌拉地尔组相比相差不显着(P>0.05);乌拉地尔和枢丹复合用药组与生理盐水组相比(P<0.05),差异显着,和0.08％枢丹组与0.5％乌拉地尔组相比,差异不显着(P>0.05)。结论:乌拉地尔在脊髓水平上抑制神经冲动的传导,枢丹无此作用,两药合用也无相加作用。
雷亚娟[3]2003年在《乌拉地尔对大鼠心肌缺血诱发丘脑束旁核痛敏神经元放电的影响》文中指出目的：利用结扎冠脉造成的急性心肌缺血模型，结合神经电生理细胞外记录单位放电的方法，观察大鼠丘脑束旁核(Parafascicular nucleus，Pf)在心肌缺血性伤害刺激感受中的作用以及5-TH受体激动剂乌拉地尔(urapidil)对其干预作用。 方法：体重260-300克的SD雄性大鼠100只。采用细胞外记录单位放电的方法，分别记录痛觉敏感神经元(PSN)的基础放电、冠状动脉阻塞(coronary artery occlusion)CAO即刻及随后60分钟内隔5分钟一次的放电频率。实验分叁组：单纯CAO组，扎闭冠状动脉心肌缺血后观察记录60分钟，作为参照；urapidil干预组，在CAO后15分钟静注urapidil 0.21mg／kg，并且观察随后45分钟细胞放电变化；及乌拉地尔-美西麦角(Methysergide)拮抗组，在静注urapidil 20分钟后，静脉注射Methysergide 0.1mg／kg，观察记录随后细胞放电变化。 结果：完成记录的31个PSN中有13个在CAO前后放电频率没有改变，其余18个在CAO后放电频率明显增高。所有的实验观察在这些细胞进行。单纯CAO组(n=6)，CAO后即刻细胞放电频率明显增加，5-10分钟内达到高峰(P＜0.01)。在实验记录过程的60分钟内一直维持相对稳定的高频放电。urapidil组(n=6)，静注urapidil后细胞的增频反应被明显抑制，给药20分钟作用达峰值，与基础背景放电相比差异无显着性(P＞0.05)。urapidil-Methysergide拮抗组(n=6)，静脉注射Methysergide后urapidil的作用被部分拮抗。 结论：①CAO可以诱发大鼠急性内脏伤害性感受(内脏痛觉)；②Pf参与心肌缺血性内脏伤害性刺激(内脏疼痛)的中枢感受；③5HT在心肌缺血性内脏伤害性刺激感受(内脏痛觉)的调制中发挥重要作用。
参考文献：
[1]. 乌拉地尔对伤害性刺激大鼠脊髓镇痛作用的研究[D]. 孙宝春. 中国医科大学. 2003
[2]. 乌拉地尔和枢丹对伤害性刺激大鼠脊髓镇痛的电生理研究[J]. 孙宝春, 贡祥林, 秦正敏. 江苏大学学报(医学版). 2003
[3]. 乌拉地尔对大鼠心肌缺血诱发丘脑束旁核痛敏神经元放电的影响[D]. 雷亚娟. 山西医科大学. 2003