鼠伤寒沙门氏菌PCR快速检测试剂盒的研制

论文摘要

为了能快速、准确、灵敏地检测鼠伤寒沙门氏菌,而研制一种基于PCR技术的检测试剂盒。该试剂盒采用了一对特异引物,该引物是以鼠伤寒沙门氏菌的基因STM4495中一段特异序列为检测靶点设计的,可使试剂盒具有良好的特异性。特异性评价试验结果显示,可从22株沙门氏菌(12种血清型)和20株非沙门氏菌(12个常见属)中,准确地检测出鼠伤寒沙门氏菌。此外,从5种PCR增强剂中筛选到了3种,并添加到试剂盒中,以避免PCR反应受到引物二聚体和食品中PCR抑制剂的干扰,使试剂盒具备良好的灵敏性。经评价试验表明,试剂盒检测鼠伤寒沙门氏菌的检测限可以达到37.5 fg/PCR,即使贮存于—20℃放置30 d,仍然能够达到原有检测限;而将该试剂盒反复冻融60次后,也可达375 fg/PCR。对食品样品进行检测,经过增菌24 h后,可以从0～1 CFU/10 g乳粉中检测出鼠伤寒沙门氏菌。从以上结果可知,研制的PCR试剂盒能够准确地检测出鼠伤寒沙门氏菌,具有较高的灵敏性和稳定性,可以用于食品中鼠伤寒沙门氏菌的快速筛检。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 侯宛宛,李可,张艺沛,方莹,陈晴,柳雅馨,刘斌,岳田利

关键词: 鼠伤寒沙门氏菌,聚合酶链式反应,检测试剂盒

来源: 食品科技 2019年07期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 化学,轻工业手工业

单位: 西北农林科技大学食品科学与工程学院,西北农林科技大学富平现代农业综合试验示范站,浙江省检验检疫科学技术研究院

基金: 国家重点研发计划项目(2018YFC1602201),国家自然基金项目(31471638),浙江省公益性技术应用研究(分析测试)项目(2018C37015),质检总局科技计划项目(2017IK206),西北农林科技大学试验示范站(基地)科技成果推广项目(TGZX2017-27)

分类号: TS207.4;O657

DOI: 10.13684/j.cnki.spkj.2019.07.059

页码: 359-366

总页数: 8

文件大小: 3423K

下载量: 231

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