导读:本文包含了裸鼠荷瘤实验论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:实时剪切波弹性,靶向纳米微泡,基因治疗,人肝癌荷瘤裸鼠
裸鼠荷瘤实验论文文献综述
尚海涛,梁锡天,吴博,林程文[1]（2019）在《实时剪切波弹性(SWE)评价载NET-1 siRNA靶向纳米微泡的治疗效果:肝癌荷瘤裸鼠的体内实验研究》一文中研究指出目的本研究的目的是通过实时剪切波弹性技术(SWE)体外测量人肝癌荷瘤鼠肿瘤硬度及大小的变化来评价载NET-1 siRNA靶向纳米微泡的治疗效果,并且验证SWE是否能够通过测量肿瘤硬度的改变来反应肿瘤病理上的改变,从而作为一种非侵入性的方法来评价肿瘤的治疗效果。方法通过注射SMCC(7721细胞系成功建立人肝癌裸鼠模型共18只,制备载NET-1 siRNA靶向纳米微泡。将荷瘤裸鼠随机分成3组,分别注射载NET-1 siRNA靶向纳米微泡、载阴性对照基因靶向纳米微泡、生理盐水,即组成实验组、阴性基因组、空白对照组进行治疗,在治疗过程中采用低频超声辐照。实时剪切波弹性技术共进行3次,分别记录各组实验裸鼠所荷肿瘤的弹性最大值Emax和弹性平均值Emean。所有的肿瘤都被移除进行免疫组化分析。结果叁组裸鼠肿瘤随肿瘤体积增长SWE各值均增加,其中,Emax与肿瘤大小成正相关(P<0.05)。相对于其他两组,NET-1 siRNA (载基因靶向纳米微泡治疗组)明显延缓了肿瘤的生长(P<0.0001),而肿瘤硬度的最大值Emax增加尤为显着(P<0.05).免疫组化结果显示实验组的NET-1蛋白表达显着低于其他两组。结论本研究显示,载NET-1 siRNA靶向纳米微泡能够抑制肿瘤的生长并延长了实验动物的整存期,同时,SWE能够将不同实验组间肿瘤内部组织的变化通过检测肿瘤硬度变化显示出来,提供了一种无创实时的检查成像方法,对于肿瘤的治疗过程有着重要的意义。(本文来源于《中国超声医学工程学会第五届全国介入超声医学学术交流大会论文汇编》期刊2019-08-23）
滕晓晶,董学妍,王智毅,余道军,王贤军[2]（2019）在《扶正康复合剂联合顺铂抑制胃癌SGC7901细胞荷瘤裸鼠肿瘤增殖作用的实验研究》一文中研究指出目的:探讨扶正康复合剂联合顺铂抑制小鼠移植性胃癌的增殖作用。方法:将28只裸鼠随机分为4组:模型对照组,扶正组,顺铂组,顺铂+扶正组,每组7只。皮下注射胃癌SGC7901细胞株,建立胃癌荷瘤裸鼠模型,顺铂及扶正康复合剂连续给药7 d,称取体重及瘤重,计算抑瘤率,并利用PCR法和免疫组化法分别检测瘤体内细胞凋亡靶点(Bcl-2、Bax、Survivin)和血管新生促进因子(VEGF)的mRNA和蛋白的表达情况。结果:在抑瘤率方面,与模型对照组相比,各组裸鼠瘤重均有不同程度的减轻(P<0.05),且顺铂+扶正组抑瘤率最高(66.67%)。在细胞凋亡方面,扶正康复合剂联合顺铂能明显上调Bax的表达,下调Bcl-2、Survivin和VEGF的表达(P<0.05)。结论:扶正康复合剂联合顺铂具有抑制肿瘤增殖的作用。(本文来源于《中国临床药理学与治疗学》期刊2019年07期）
王亚坤,邹媛媛,裴静波[3]（2019）在《南方红豆杉水提物逆转胃癌细胞NCI-N87荷瘤裸鼠曲妥珠单抗耐药实验研究》一文中研究指出目的:观察南方红豆杉水提物联合曲妥珠单抗抑制人胃癌细胞NCI-N87裸鼠移植瘤的作用及对PI3K/AKT信号通路的影响,探索南方红豆杉水提物克服曲妥珠单抗耐药的机制。方法:建立荷瘤裸鼠模型,将40只BALB/c裸鼠接种人HER2阳性胃癌NCI-N87耐药细胞株并随机分组给药及取瘤,TUNEL法检测移植瘤细胞凋亡,Western-blot检测移植瘤中PI3K、AKT1、mTOR蛋白的表达水平,实时荧光定量PCR法检测mRNA表达水平。结果:各治疗组均可见到凋亡细胞,凋亡率同对照组比较显着升高(P<0.05),联合组最为显着(P<0.01)。南方红豆杉联合组较曲妥珠单抗单药能显着降低移植瘤PI3K、AKT1、mTOR蛋白及mRNA的表达(P<0.05)。结论:南方红豆杉水提物可以诱导胃癌细胞的凋亡,联合西药曲妥珠单抗后增强其诱导作用。南方红豆杉水提物可能通过抑制HER2及下游PI3K/AKT信号通路的激活,从而克服曲妥珠单抗耐药。(本文来源于《中医学报》期刊2019年08期）
曹茜[4]（2018）在《阿帕替尼抑制胆囊癌荷瘤裸鼠肿瘤生长的实验研究》一文中研究指出[背景和目的]胆囊癌是发生在胆囊管以及胆囊底部、体部、颈部的高度恶性肿瘤,由于胆囊癌早期缺乏特异性症状,并且极易发生淋巴转移及远处脏器转移,所以大多数患者诊断时已是晚期、失去了外科手术机会,而目前放疗、化疗等传统治疗手段并未在晚期胆囊癌中体现出显着的疗效优势,故胆囊癌患者总体预后极差,严重威胁着人类健康,因此探索新的方法来治疗胆囊癌、改善患者预后是非常重要的。血管生成已经通过血管内皮生长因子(VEGF)信号通路抑制剂在很多肿瘤中被证实是一个很有前景的治疗靶点,使得抗血管生成靶向治疗恶性肿瘤的作用越来越得到肯定。阿帕替尼是一种新型小分子酪氨酸激酶抑制剂,能够高度选择性的抑制血管内皮生长因子受体-2(VEGFR-2),具有良好的靶向抗肿瘤血管生成和抑瘤活性。多项研究结果显示阿帕替尼在多种肿瘤体内移植模型中均显现出了良好的抑瘤作用,且耐受性良好,但目前尚未有相关实验进行过阿帕替尼对胆囊癌的体内抑瘤作用的研究,因此探索阿帕替尼对于胆囊癌的抑瘤作用是非常有意义和价值的。本研究通过建立人胆囊癌GBC-SD裸鼠皮下移植瘤模型,采用阿帕替尼分高、低两种剂量进行治疗,并以生理盐水灌胃处理的荷瘤裸鼠作为安慰剂对照组,初步探讨阿帕替尼对胆囊癌的体内抑瘤作用,验证阿帕替尼对胆囊癌的治疗作用,为研究阿帕替尼的临床应用提供依据。[材料和方法]选择人胆囊癌GBC-SD细胞株进行细胞培养。选取5-6周龄SPF级BALB/c-nu雌性裸鼠作为实验动物。将对数期生长的GBC-SD细胞悬液注射于裸鼠右侧腋窝皮下,.建立人胆囊癌裸鼠移植荷瘤模型。接种2周待移植瘤生长至一定大小后,选择肿瘤体积相近的裸鼠24只,随机分成3组,并按以下方案给药:①对照组(8只),予以生理盐水灌胃,每天一次;②低剂量阿帕替尼组(8只):给予生理盐水稀释的甲磺酸阿帕替尼混悬液,剂量为100 mg/kg,每天1次,灌胃给药;③高剂量阿帕替尼组(8只):阿帕替尼混悬液剂量为200mg/kg,每天1次,灌胃给药。治疗过程中每隔3天称量肿瘤体积,并计算相对肿瘤增长率T/C(%)评价药物对肿瘤的抑制作用。14天后停止给药,裸鼠在最后一次给药24 h后,解剖小鼠,完整切除裸鼠皮下胆囊癌组织,胆囊癌组织石蜡包埋,光镜下观察胆囊癌移植瘤细胞形态,采用免疫组化(利用CD31标记肿瘤微血管数目、Ki67标记肿瘤细胞增殖状态、VEGFR-2表达阳性标记血管内皮细胞生长因子受体2)来检测阿帕替尼的抗胆囊癌疗效及作用机制。[结果]1.给药第9天后,两个治疗组移植瘤体积增长明显小于安慰剂对照组(P<0.05)。第12天、第15天低剂量组、高剂量组肿瘤体积均显着低于对照组(p<0.05),且高剂量组移植瘤体积同低剂量组间的差异有统计学意义(p<0.05);2.给药2周后,低剂量阿帕替尼组(100mg/kg Qd)与高剂量阿帕替尼组(200mg/kg Qd)相对肿瘤生长率分别为70.21%与59.46%。3.治疗14天后,100mg/kg阿帕替尼组和200mg/kg阿帕替尼组微血管数目均小于对照组(19.98±2.76 VS 25.92±2.88,P=0.001;12.99±2.75 VS 25.92±2.88,P<0.001),高、低剂量组间微血管数目的差异具有统计学意义(12.99±2.75 VS 19.98±2.76,P=0.003)。4.治疗14天后,100mg/kg阿帕替尼组及200mg/kg阿帕替尼组Ki67阳性细胞的比值均显着小于对照组(37.42±4.99VS 53.28±8.72,P=0.001;26.19±3.63VS 53.28±8.72,P<0.001),高、低剂量组间 Ki67 阳性细胞的比例有显着性差异(26.19±3.63VS 37.42±4.99,P=0.003)。5.治疗14天后,100mg/kg阿帕替尼组及200mg/kg阿帕替尼组VEGFR-2抗体的阳性细胞表达比值均显着小于空白对照组(21.5'7±5.01 VS 32.56±4.43,P=0.001;15.23±2.13VS32.56±4.43,P<0.001),高、低剂量组间VEGFR-2阳性细胞比值有显着性差异(15.23±2.13 VS 21.57±5.01,P=0.025)。[结论]1.阿帕替尼能够抑制人胆囊癌GBC-SD裸鼠移植瘤的生长,200mg/kg Qd的阿帕替尼对人胆囊癌GBC-SD裸鼠移植瘤的抑制作用比100mg/kg Qd的阿帕替尼更明显。2.阿帕替尼可以抑制胆囊癌组织VEGFR-2的表达,降低组织中的微血管密度以及癌细胞的增殖。(本文来源于《湖南师范大学》期刊2018-06-01）
丁志超[5]（2018）在《磁共振靶向对比剂VEGF_(125-136)-Gd肝癌荷瘤裸鼠活体内成像实验研究》一文中研究指出目的:以肿瘤细胞VEGFR-2为成像靶点,多肽VEGF125-136为转运载体偶联磁共振阳性显像剂——钆剂,制备磁共振靶向对比剂VEGF_(125-136)-Gd,通过对HEP G2肝癌荷瘤裸鼠活体内磁共振成像实验,探讨其对肿瘤细胞VEGFR-2的靶向成像能力及其代谢规律。方法:(1)磁共振靶向和非靶向对比剂的制备:应用酰胺键合成法将Gd分别标记靶向多肽VEGF125-136和随机多肽NTSP,制备合成靶向磁共振对比剂VEGF_(125-136)-Gd和非靶向磁共振对比剂NTSP-Gd,并对其进行HPLC分离纯化及化学质谱检测。(2)HEP G2肝癌荷瘤裸鼠组织病理及免疫组织化学实验:观察HEP G2肝癌荷瘤裸鼠各兴趣区组织学及细胞学特征,并对各组织VEGFR-2表达强度进行评分及半定量分析。(3)HEP G2肝癌荷瘤裸鼠活体内最大耐受量初步评估:HEP G2肝癌荷瘤裸鼠12只,随机分成3组,每组4只,设3个给药剂量;观察给药后HEP G2肝癌荷瘤裸鼠的毒性反应和死亡情况。(4)HEP G2肝癌荷瘤裸鼠活体内磁共振成像实验:HEP G2肝癌荷瘤裸鼠10只,随机分为2组,每组5只,实验组和对照组分别经鼠尾静脉注射靶向对比剂VEGF_(125-136)-Gd和非靶向对比剂NTSP-Gd,进行间断多时间点磁共振扫描并图像信息采集,测定各兴趣区的T1WI信号强度变化并制作时间-信噪比曲线。(5)数据统计分析:测得的磁共振信号强度数据为重复测量的计量资料,采用独立样本的t检验方法分析相同时间点组内或者组间不同兴趣区的磁共振信噪比差异,以P<0.05认为两者差异有统计学意义。结果:(1)HPLC分离纯化:靶向对比剂VEGF_(125-136)-Gd和非靶向对比剂NTSP-Gd均呈“单峰”,纯度均超过98%。化学质谱检测表明两种磁共振对比剂偶联成功。(2)HEP G2肝癌荷瘤裸鼠组织病理及免疫组织化学实验:HEP G2肝癌组织符号典型恶性肿瘤的组织学特征,肝脏、肾脏、肌肉、脾脏组织内均未发现转移瘤,不同组织的VEGFR-2表达强度不同。VEGFR-2表达强度半定量分析(评分法):肿瘤(12分)>肝脏(3分)>肾脏(2分)=肌肉(2分)>脾脏(0分)。(3)自制的靶向对比剂VEGF_(127-133)-Gd在HEP G2肝癌荷瘤裸鼠活体内最大耐受量为50 mg/kg。(4)实验组与对照组肿瘤区明显强化,实验组肿瘤区时间-信噪比曲线呈“双峰”表现,即“5min峰”和“60min峰”;对照组肿瘤区时间-信噪比曲线呈“单峰”表现,即“5min峰”。肿瘤区“60min峰”成像时间点实验组与对照组信噪比差异具有统计学意义(P<0.05);实验组肿瘤区与肌肉区信噪比差异具有统计学意义(P<0.05)。实验组和对照组肾脏区均明显强化,时间-信噪比曲线呈“双峰”表现;肌肉组织均轻度强化,时间-信噪比曲线呈“单峰”表现。实验组与对照组肾脏区信噪比差异无统计学意义(P>0.05);实验组与对照组肌肉区信噪比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:自制的磁共振靶向对比剂VEGF_(125-136)-Gd偶联成功,并初步实现对HEP G2肝癌荷瘤裸鼠活体内肿瘤细胞VEGFR-2靶点的特异性成像;该磁共振靶向对比剂主要由肾脏代谢。(本文来源于《海南医学院》期刊2018-05-01）
刘嘉晖[6]（2018）在《~(99)Tc~m标记Z_(HER2:V2)-培美曲塞在人肺腺癌荷瘤裸鼠体内分布及显像的实验研究》一文中研究指出目的:本研究将制备人表皮生长因子受体2(Human epidermal growth receptor 2,HER2)亲合体分子影像探针~(99)Tc~m-Z_(HER2:V2)-培美曲塞,研究3种不同HER2表达情况的人肺腺癌H2009、A549及H23细胞荷瘤裸鼠体内分布和显像,并进行对比分析,探讨~(99)Tc~m-Z_(HER2:V2)-培美曲塞在靶向诊疗一体化分子探针在HER2高表达肺腺癌中的靶向摄取特性和诊断价值。方法:应用随机数字表法取12只H2009荷瘤裸鼠,利用随机数字表法随机分为4组,每组为3只;各组分别经尾静脉注射~(99)Tc~m-Z_(HER2:V2)-培美曲塞100μl(37kBq),另制备同剂量同体积~(99)Tc~m-Z_(HER2:V2)-培美曲塞标准源。分别于注药后1、2、4、6h眼静脉取血后,颈椎脱臼处死,分别测定肿瘤及心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胃、小肠、肌肉、骨骼、脑的放射性计数并称重,同时测定标准源的放射性计数,计算每克组织中放射性计数与标准源的比值(%ID/g)。肺腺癌A549及H23细胞荷瘤裸鼠模型体内分布实验同上。研究各时间点~(99)Tc~m-Z_(HER2:V2)-培美曲塞分子探针在HER2高表达及低表达情况下荷瘤裸鼠模型的体内分布。用随机数字表法随机取肺腺癌H2009、A549及H23荷瘤裸鼠各5只,经尾静脉注射~(99)Tc~m-Z_(HER2:V2)-培美曲塞100μl(37MBq),分别于注药后1、2、4、6h行SPECT显像,利用感兴趣区(Region of Interest,ROI)技术测定肿瘤部位放射性计数与对侧相应正常部位放射性计数,计算肿瘤与非肿瘤部位的放射性计数比值(T/NT),并比较各组间显像的差异。另用随机数字表法随机取肺腺癌H2009及A549细胞荷瘤裸鼠各5只,先注射过量未标记的Z_(HER2:V2)-培美曲塞,5min后再注射~(99)Tc~m-Z_(HER2:V2)-培美曲塞分子影像探针,分别于注药后1、2、4、6h行SPECT显像并计算荷瘤裸鼠T/NT比值,观察过量未标记的Z_(HER2:V2)-培美曲塞对~(99)Tc~m-Z_(HER2:V2)-培美曲塞分子影像探针的阻断效果,分析分子探针的特异性。所有实验数据均以±s(均数±标准差)表示,采用SPSS 22.0统计学软件进行统计学分析及统计图制作,对数据进行两样本t检验(或t'检验)或Wilcoxon秩和检验,以P<0.05为差异有统计学意义。结果:荷瘤裸鼠体内分布结果显示,~(99)Tc~m-Z_(HER2:V2)-培美曲塞在HER2高表达H2009荷瘤裸鼠及HER2中高表达A549肺腺癌荷瘤裸鼠中,肿瘤组织内分布较高,且摄取随着时间延长逐渐增加,而在HER2低表达H23荷瘤裸鼠肿瘤组织分布极少。H2009荷瘤裸鼠在注射~(99)Tc~m-Z_(HER2:V2)-培美曲塞后1、2、4、6h肿瘤组织的%ID/g分别为3.42±2.54、4.76±2.27、5.29±3.16、5.67±3.43;A549荷瘤裸鼠在注射~(99)Tc~m-Z_(HER2:V2)-培美曲塞后1、2、4、6h肿瘤组织的%ID/g分别为1.79±0.23、2.17±0.44、2.68±0.58、3.22±0.71;H23荷瘤裸鼠模型在注射~(99)Tc~m-Z_(HER2:V2)-培美曲塞后1、2、4、6h肿瘤组织的%ID/g极低,分别为0.19±0.04、0.17±0.08、0.23±0.05、0.08±0.05。~(99)Tc~m-Z_(HER2:V2)-培美曲塞体内分布显示,除HER2阳性肿瘤、肾脏外,~(99)Tc~m-Z_(HER2:V2)-培美曲塞在大部分正常组织或器官中被快速清除。荷瘤裸鼠SPECT体内显像实验示,HER2阳性H2009及A549肺腺癌荷瘤裸鼠注射~(99)Tc~m-Z_(HER2:V2)-培美曲塞分子影像探针1h后肿瘤组织即有明显放射性核素浓聚,随时间延长浓聚程度增加,6h摄取最高。H2009荷瘤裸鼠显像示肿瘤在1、2、4、6h的T/NT分别为1.85±0.52、2.61±0.65、3.43±1.07、4.62±1.65;A549荷瘤裸鼠显像示肿瘤在1、2、4、6h的T/NT分别为1.79±0.23、2.17±0.44、2.68±0.58、3.22±0.71。HER2低表达H23荷瘤裸鼠注药后1h显像肿瘤部位无明显放射性核素浓聚,之后可见轻度放射性浓聚,注射显像剂后1、2、4、6h各时间点T/NT分别为1.19±0.13、1.53±0.31、1.80±0.33、2.07±0.30。将各时间点T/NT比值对比,HER2阳性H2009及A549荷瘤裸鼠模型肿瘤摄取均明显高于HER2低表达H23荷瘤裸鼠模型肿瘤组织。其中H2009与H23相比,各时间点P或Z值分别为0.008,0.001,0.000,0.008(差异具有显着性);A549与H23相比,各时间点P或Z值分别为0.002,0.009,0.004,0.002(差异具有显着性)。HER2高表达H2009及A549荷瘤裸鼠先注射过量未标记的Z_(HER2:V2)-培美曲塞,然后注射~(99)Tc~m-Z_(HER2:V2)-培美曲塞显像结果,各时间点均未见明显的肿瘤组织摄取,表明~(99)Tc~m-Z_(HER2:V2)-培美曲塞HER2阳性肿瘤显像可被过量未标记的Z_(HER2:V2)-培美曲塞阻断,表明~(99)Tc~m-Z_(HER2:V2)-培美曲塞分子探针与HER2高表达肿瘤组织体内具有HER2靶向结合特性。结论:~(99)Tc~m标记的~(99)Tc~m-Z_(HER2:V2)-培美曲塞具有良好的体内分布,在HER2高表达H2009及HER2中高表达A549荷瘤裸鼠中肿瘤明显摄取,肾脏次之。~(99)Tc~m-Z_(HER2:V2)-培美曲塞分子影像探针对HER2阳性肺腺癌组织具有良好的靶向显像效果,并且~(99)Tc~m-Z_(HER2:V2)-培美曲塞分子探针与HER2高表达肿瘤组织在体内具有明确的靶向结合特性。分子影像探针~(99)Tc~m-Z_(HER2:V2)-培美曲塞可用于HER2高表达肿瘤体内特异性显像,对HER2高表达肿瘤靶向诊疗中具有潜在的临床应用价值。(本文来源于《河北医科大学》期刊2018-03-01）
梁会杰,刘阁玲[7]（2016）在《CCNG2基因过表达对甲状腺癌裸鼠移植瘤实验研究》一文中研究指出目的利用人K1甲状腺癌移植型裸鼠模型,探讨细胞周期蛋白G2(cyclin G2)的体内抑制肿瘤效应。方法将18只4周龄SPF级BALB/C雌性裸鼠编号,随机数字表法分为空白对照组、阴性转染对照组和CCNG2基因转染组,每组6只。常规扩大培养叁种细胞,将生长状态良好的细胞消化后重悬于无血清培养基中,0.2ml/只(终浓度为5×107)于裸鼠右侧腋窝皮下按组别接种建立甲状腺癌动物模型,同时游标卡尺测量瘤体的长轴、短轴计算移植瘤体积,绘制生长曲线。30天后断颈处死所有组别的裸鼠,摘取瘤组织,免疫组织化学检测CCNG2蛋白的表达。结果所有组别裸鼠全部成瘤,成瘤率100%(18/18)。CCNG2基因转染组细胞组裸鼠成瘤时间延迟、瘤组织体积及生长速度缓慢,平均体积明显小于空白对照组和阴性转染对照组(F=54.983,P<0.001),体积抑瘤率分为67.07%、62.32%。免疫组织化学检测结果示:LV-CCNG2转染组染色阳性指数分别为9.79±0.658,与空白对照组和阴性转染对照组染色指数4.659±0.371和4.719±0.367相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论慢病毒介导CCNG2过表达于人K1甲状腺癌细胞在裸鼠体内的生长受到了明显的抑制。(本文来源于《现代养生》期刊2016年15期）
田磊[8]（2016）在《基因工程细胞hTNFα/CHO的构建及其细胞微囊抑制荷瘤裸鼠肿瘤生长的实验研究》一文中研究指出恶性肿瘤的发病率和致死率甚高,成为当今世界人类疾病中的头号杀手。常规的叁大疗法(手术、化疗和放疗)对肿瘤的治愈率很低,并存在很大的毒副作用。近年兴起的肿瘤生物疗法及细胞疗法给肿瘤治疗带来了新的希望。已知人肿瘤坏死因子α(hTNFα)具有较强的杀伤或抑制肿瘤组织细胞生长的作用,已用于临床治疗某些肿瘤。但由于该因子的半衰期短,静脉全身用药后到达肿瘤组织的浓度低、持续时间短,难以达到满意的抑瘤效果;并且大剂量的使用会引发严重的寒战、高热及休克等全身不良反应,极大地限制了其在临床的应用。本组前期以人胚肾293细胞为载体,构建了能持续分泌hTNFα的hTNFα/293细胞;以APA微囊包裹该细胞,制备出APA-hTNFα/293细胞微囊;将该细胞微囊植入荷瘤裸鼠肿瘤组织内部及周围;结果初步表明在APA微囊发挥免疫隔离作用的前提下,该细胞微囊可在肿瘤组织局部发挥持续释放hTNFα、抑制肿瘤组织生长的效应。具有提高肿瘤组织局部hTNFα浓度、延长作用时间、降低全身不良反应的优点,可更好地发挥抑制肿瘤组织细胞生长的作用。作为全新的抑瘤方法,是否能在多种载体细胞及抑瘤实验中得到证实,需进一步的扩展性研究。本研究采用常用的CHO细胞(中国仓鼠卵巢细胞)作为载体细胞,应用脂质体转染技术,构建hTNFα/CHO基因工程细胞;采用APA微囊包裹该基因工程细胞,制备APA-hTNFα/CHO细胞微囊;植入荷瘤鼠肿瘤组织内部及周围,以期利用APA微囊克服异基因细胞的免疫排斥反应,通过hTNFα/CHO细胞提供持续分泌和释放hTNFα的微型生物泵作用,达到维持肿瘤组织局部高浓度hTNFα、全身其他组织低浓度hTNFα的效应,以更好地发挥hTNFα的抑瘤作用,并降低全身不良反应,旨在为恶性肿瘤的治疗提供全新的生物治疗方法。一、实验目的:构建hTNFα/CHO基因工程细胞;制备APA-hTNFα/CHO细胞微囊;在体内、外实验中了解该细胞微囊对肿瘤组织细胞生长的抑制效应及对宿主的毒副作用。二、实验内容:应用脂质体转染技术,构建hTNFα/CHO基因工程细胞;在体外实验中证明该细胞可持续释表达hTNFα基因并分泌放人肿瘤坏死因子α;用ELISA法检测该细胞培养液中hTNFα蛋白的含量。用APA微囊包裹所构建的细胞系,制备出APA-hTNFα/CHO细胞微囊。将APA-hTNFα/CHO细胞微囊与9种不同的人肿瘤细胞共培养,观察该细胞微囊对不同人肿瘤细胞的生长是否具有抑制作用。选取2肿肿瘤细胞制备APA细胞微囊,将该细胞微囊植入荷瘤裸鼠的肿瘤组织内部和周围,了解其对荷瘤裸鼠肿瘤组织的生长是否具有抑制作用,及其对宿主体重和生存的影响。叁、实验方法:1、构建htnfα/cho基因工程细胞系:采用pcr技术对htnfα目的基因进行合成并扩增。通过质粒酶切与重组技术,将合成的目的基因整合入质粒gv141中,并检测目的基因整合水平。使用脂质体(lipofectamine2000)将整合htnfα目的基因的重组质粒gv141转染入cho细胞中,通过g418抗性筛选,构建出基因工程细胞htnfα/cho细胞系。提取筛选后扩增的该细胞的总rna,采用pt-pcr方法检测htnfα/cho细胞的外源性htnfα基因的表达;采用elisa法测定不同传代数的htnfα/cho细胞的培养上清液中htnfα蛋白的含量。在倒置光学显微镜下,观察培养中的htnfα/cho细胞、cho细胞的生长状态,并用mtt法测定该2种细胞的生长曲线,对比转染前、后htnfα/cho细胞与cho细胞生长增殖的变化。2、观察apa-htnfα/cho细胞微囊对共培养的肿瘤细胞生长的影响:分别用apa微囊包裹htnfα/cho细胞、0/cho细胞(转染空载体的cho细胞),用倒置光学显微镜观察体外培养的apa-htnfα/cho细胞微囊、apa-0/cho细胞微囊的形态变化及囊内细胞的生长状态。将定量的apa-htnfα/cho细胞微囊分别与9种不同的人肿瘤细胞(肝癌细胞hepg2、结肠癌细胞lovo、宫颈癌细胞hela、肺癌细胞h460、乳腺癌细胞mcf-7、膀胱癌细胞t24、乳腺癌细胞t47d、肺腺癌细胞a549、肾癌细胞achn)共培养。按照培养肿瘤细胞的加入物的不同分组:不加任何处理因素、仅培养的肿瘤细胞为空白对照组;加入htnfα溶液为阳性对照组;加入apa-0/cho细胞微囊为阴性对照组;加入不同剂量(低剂量50个、中剂量100个、高剂量200个细胞微囊)apa-htnfα/cho细胞微囊为实验组。采用mtt法检测各组肿瘤细胞叁天的增殖值,计算并绘制增殖曲线,了解apa-htnfα/cho细胞微囊分别对9种不同的人肿瘤细胞生长的影响。应用spss19.0软件对实验数据进行重复测量资料的方差分析,按照α=0.05水平,p<0.05表示有明显统计学差异,p<0.01表示有显着统计学差异。3、观察apa-htnfα/cho细胞微囊植入对荷瘤裸鼠肿瘤组织细胞生长的影响:参考上述体外实验结果,选取2种人肿瘤细胞,分别制备出移植瘤模型荷瘤裸鼠。分别将apa-htnfα/cho细胞微囊注射植入成模的荷瘤裸鼠肿瘤组织的内部及周围。按照给荷瘤裸鼠肿瘤组织中注射物的不同分组:注射生理盐水的为空白对照组;注射htnfα溶液的为阳性对照组;注射apa-0/cho细胞微囊的为阴性对照组;注射不同剂量的apa-htnfα/cho细胞微囊为实验组,并依剂量分为高、中、低剂量组。植入后每隔3天观察荷瘤裸鼠的生存状态,称重荷瘤裸鼠的体重,测量其肿瘤组织的长短径。于植入细胞微囊后第21天时测量结束后,用脊髓脱臼法处死荷瘤裸鼠,分离出荷瘤裸鼠的肿瘤组织,称重其瘤组织重量,测量其肿瘤组织的长短径。对数据进行整理计算。应用spss19.0软件对实验数据进行重复测量资料的方差分析,按照α=0.05水平,p<0.05表示有统计学差异,p<0.01表示有显着统计学差异。四、实验结果:1、htnfα/cho基因工程细胞的构建及其htnfα蛋白分泌功能的检定:pcr检测结果表明重组质粒中包含有htnfα基因;阳性克隆基因与htnfα基因测序比对结果表明整合的htnfα基因完整一致。rt-pcr检测结果显示:阳性对照基因gapdh电泳条带显示正常,表明整个rt-pcr检测体系正常;从5个转化株中筛选出4株含有htnfα基因,其中1号和2号的htnfα基因电泳条带呈强阳性,选用1号htnfα/cho细胞进行后续实验。光镜下观察和细胞生长曲线表明cho细胞转染前后生长未出现明显变化。2、apa-htnfα/cho细胞微囊对体外共培养的肿瘤细胞生长的抑制效应:⑴倒置光学显微镜下见apa-htnfα/cho细胞微囊呈圆球状,htnfα/cho细胞在囊内均一分布,培养3天后可见囊内细胞聚集成团。⑵与空白对照组比较,apa-0/cho细胞微囊组对9种肿瘤细胞的生长无明显抑制作用(p>0.05);阳性药物htnfα组对除t47d和hela外的7种肿瘤细胞的生长具有显着的抑制作用(p<0.01);对t47d和hela细胞无抑制作用(p>0.05)。⑶与空白对照组比较,各剂量apa-htnfα/cho细胞微囊对除t47d和hela外的7种肿瘤细胞的生长具有显着的抑制作用(p<0.01);中剂量该细胞微囊组对t47d细胞的生长具有抑制作用(p<0.05),高剂量该细胞微囊组对t47d和hela细胞的生长具有显着的抑制作用(p<0.01);大部分剂量的该细胞微囊抑制效果强于阳性药物htnfα组(p<0.05);部分存在剂量依赖关系。3、apa-htnfα/cho细胞微囊植入对裸鼠移植瘤生长的抑制效应⑴对荷lovo细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用植入apa-htnfα/cho细胞微囊对荷人结肠癌细胞lovo裸鼠的体重没有影响(p>0.05),21天后裸鼠均存活。21天时,与空白对照组比较,阳性药物htnfα组和高剂量apa-htnfα/cho细胞微囊组对瘤重量有明显的抑制作用(p<0.05)。高中低叁个剂量apa-htnfα/cho细胞微囊组对人结肠癌lovo裸鼠移植瘤的瘤体积抑制率分别为31.9%、29.1%和14.7%;瘤重抑制率分别为54.8%、46.2%和29.9%。并可见阳性药物htnfα组的瘤体积抑制率为48.9%,瘤重抑制率为63.5%。而apa-0/cho细胞微囊组的瘤体积抑制率为-21.8%,瘤重抑制率为3.1%,无抑制肿瘤生长的作用。⑵对荷hepg2细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用植入APA-hTNFα/CHO细胞微囊对荷人肝癌细胞HEPG2裸鼠的体重没有影响(P>0.05),21天后裸鼠均存活。21天时,与空白对照组比较,各剂量APA-hTNFα/CHO细胞微囊组对瘤组织无明显的抑制作用(P>0.05);高、中、低叁个剂量组对人肝癌细胞HEPG2裸鼠移植瘤的瘤体积抑制率分别为14.6%、7.9%和-7.6%;瘤重抑制率分别为7.5%、3.2%和-12.7%。并可见阳性药物hTNFα组的瘤体积抑制率为45.3%,瘤重抑制率为45.4%。而APA-0/CHO细胞微囊组的瘤体积抑制率为-35.6%,瘤重抑制率为-32.2%,无抑制肿瘤生长的作用。五、结论1、成功的构建了hTNFα/CHO细胞系,该细胞能够较为稳定地遗传外源性hTNFα基因,并且能够通过增殖代谢将其翻译表达并释放出细胞外。选用1号筛选株的第五代细胞进行下一步实验。2、APA-hTNFα/CHO细胞微囊对共培养的9种肿瘤细胞的生长具有明显的抑制作用,部分实验中抑制效应存在明确的剂量依赖关系。APA微囊中的hTNFα/CHO细胞可通过分泌释放hTNFα至培养液中,产生抑制这些肿瘤细胞生长的作用。选用的HEPG2和LOVO细胞进行下一步实验。3、APA-hTNFα/CHO细胞微囊对荷人结肠癌细胞LOVO具有明显的抑制瘤组织生长的作用;对荷HEPG2细胞裸鼠的瘤组织生长具有一定的抑制趋势;对荷瘤裸鼠的生存没有明显的影响。提示APA-hTNFα/CHO细胞微囊中的hTNFα/CHO细胞可通过分泌释放hTNFα至肿瘤组织中,发挥抑制肿瘤组织细胞生长的作用,特别是对荷LOVO细胞裸鼠。本研究构建了hTNFα/CHO细胞系,在APA微囊的包裹下,通过体内、外实验证明其具有抑制多种肿瘤组织细胞生长的作用。进一步表明APA-hTNFα/X细胞微囊有望成为治疗恶性肿瘤的全新的细胞治疗产品,他可克服异基因载体细胞的免疫排斥反应问题,可解决hTNFα临床应用的难题,以基因工程活细胞产生持续分泌hTNFα的微型生物泵作用,达到维持肿瘤组织局部高浓度hTNFα、全身其他组织低浓度hTNFα的效应,可更好地发挥hTNFα的抑瘤作用,并降低全身不良反应。可望为难治的恶性肿瘤提供全新有效的辅助治疗手段。(本文来源于《中国人民解放军军事医学科学院》期刊2016-06-08）
刘浩[9]（2016）在《PET评价槐耳浸膏治疗乳腺癌荷瘤裸鼠的实验研究》一文中研究指出目 的本研究通过小动物正电子发射型计算机断层显像(micro-PET)对槐耳浸膏治疗管腔B型以及叁阴性乳腺癌荷瘤裸鼠移植瘤进行疗效监测与评价,为槐耳浸膏应用于不同分子亚型乳腺癌的治疗提供实验依据。方 法建立人乳腺癌BT474(管腔B型)以及MDA-MB-231(叁阴性)裸鼠移植瘤模型,每种模型裸鼠随机分为对照组和治疗组,每组6只。对照组裸鼠灌胃给予生理盐水,治疗组裸鼠灌胃给予槐耳浸膏(2.5g/kg),每天一次,连续3周。每天观察裸鼠以及移植瘤生长情况,每周2次测量肿瘤大小及裸鼠体重。在治疗前(第0周)以及治疗后第1、2、3周分别进行18F-FDG micro-PET扫描。最后一次micro-PET扫描完成后,运用免疫组织化学方法检测肿瘤组织增殖细胞核抗原(Ki-67)、半胱氨酸蛋白酶-3 (Caspase-3)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况。结果治疗后第17天开始,BT474荷瘤裸鼠治疗组肿瘤生长指数(TGI)明显小于对照组(P<0.05); MDA-MB-231荷瘤裸鼠治疗组与对照组TGI在治疗期间无明显统计学差异(P>0.05)。 micro-PET结果显示,治疗后第2周开始,BT474荷瘤裸鼠治疗组移植瘤18F-FDG摄取明显低于对照组(P<0.01)；而MDA-MB-231荷瘤裸鼠两组移植瘤18F-FDG摄取无明显统计学差异(P>0.05)。免疫组化显示,BT474治疗组Ki-67阳性细胞数及VEGF的积分光密度(IOD)值均明显低于对照组(P<0.05), Caspase-3的IOD值明显高于对照组(P<0.05)；而MDA-MB-231治疗组与对照组之间免疫组化结果均无明显统计学差异(P>0.05)。结论槐耳浸膏对于管腔B型乳腺癌BT474移植瘤生长具有明显的抑制作用,而对于叁阴性乳腺癌MDA-MB-231移植瘤治疗效果并不显着。18F-FDG PET在早期监测槐耳浸膏对于管腔B型乳腺癌的治疗效果以及疗效评价方面起重要作用。(本文来源于《浙江大学》期刊2016-05-01）
明慧[10]（2016）在《~(131)I标记RGD纳米脂质体的裸鼠荷瘤动物模型实验研究》一文中研究指出背景:肺癌是国内外最常见及死亡率最高的恶性肿瘤之一,目前研究新生血管生成是肺癌生物学治疗热点之一。精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(Arg-Gly-Asp,RGD)肽是一种小分子肽类,能特异性地与整合素结合,本研究应用放射性核素标记的RGD肽纳米载体,对肺癌肿瘤进行动物体内外研究。目的:探讨~(131)I-RGD-BSA-PCL核素纳米载体对非小细胞肺癌荷瘤裸鼠模型进行SPECT/CT显像及其对肿瘤的抑制作用进行初步的探讨及研究。方法:本研究第一部分先构建RGD纳米脂质体,并对其分子式、结构及粒径的等方面进行了描述。在细胞水平实验中通过荧光共聚焦显微镜观察该载体在H460肺癌细胞系中的靶向性结合及细胞摄取情况。采用氯氨T法标记纳米载体,构建核素纳米载体~(131)I-BSA-PCL及~(131)I-RGD-BSA-PCL,进行细胞摄碘实验,观察~(131)I标记的RGD靶向性核素纳米载体的胞内停留时间,初步评估此核素纳米载体的存留效果。此外,为了观察此核素纳米载体对H460细胞的杀伤效果,采用流失细胞术观察其凋亡效果。本研究第二部分为裸鼠体内研究,采用3-4周龄雌性裸鼠进行实验,将裸鼠随机分为~(131)I-BSA-PCL组、~(131)I-RGD-BSA-PCL组、~(131)I对照组及生理盐水对照组,研究核素纳米载体在荷瘤裸鼠体内的生物分布、各组荷瘤裸鼠SPECT/CT断层显像及各治疗组对肿瘤的治疗疗效观察等。结果:细胞水平实验中,经荧光共聚焦显微镜观察证明H460细胞对RGD-BSA-PCL、BSA-PCL两种纳米载体均有明显摄取,包括细胞质和细胞核,RGD-BSA-PCL存留于细胞内的时间比BSA-PCL长。摄~(131)I实验显示~(131)I能快速被H460细胞摄取,并于加入核素纳米载体后4h达到高峰,~(131)I-RGD-BSA-PCL的最高摄碘率要高于~(131)I-BSA-PCL。凋亡实验表明两种核素纳米载体对肺癌H460细胞系具有明显的杀伤作用,对于抑制肿瘤的生长起着重要作用。体内实验中,生物分布实验结果示肿瘤对~(131)I-BSA-PCL组摄取率在24h、48h、72h分别为11.06±2.15%,10.31±3.04%g,3.83±0.87%,~(131)I-RGD-BSA-PCL组摄取率在24h、48h、72h分别为39.49±6.06%,9.99±3.11%g,6.9±1.43%,RGD组生物分布明显高于非RGD组,差异有统计学意义(p<0.05),而两种核素纳米载体组其他组织包括心、肝、脾、肺、肾、脑、骨、胃及小肠等摄取率未见明显差异。体内显像研究表明,核素纳米载体组肿瘤可见明显清晰显像,~(131)I对照组在24h时肿瘤可见微弱信号,生理盐水对照组无信号。而在治疗疗效方面,截止到接受不同治疗后27天,与对照组相比较,治疗组肿瘤体积生长受到明显抑制、小鼠体重下降幅度显着减慢。病理切片HE染色示治疗组裸鼠主要器官(心、肝、脾、肾)未见明显组织破坏。对照组中镜下可见肿瘤细胞大小不一,形态各异,并可见核分裂相;同时治疗组中镜下可见大片肿瘤细胞变性坏死。结论:~(131)I标记的两种纳米脂质体RGD-BSA-PCL和BSA-PCL对NCI-H460人大细胞肺癌裸鼠移植瘤具有明显的抑制肿瘤细胞生长增值作用,其中~(131)I-RGD-BSA-PCL能较长的停留在肿瘤细胞内,明显增加其在肿瘤细胞内的存留时间,而对荷瘤裸鼠主要器官无明显毒副作用。(本文来源于《天津医科大学》期刊2016-05-01）
裸鼠荷瘤实验论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:探讨扶正康复合剂联合顺铂抑制小鼠移植性胃癌的增殖作用。方法:将28只裸鼠随机分为4组:模型对照组,扶正组,顺铂组,顺铂+扶正组,每组7只。皮下注射胃癌SGC7901细胞株,建立胃癌荷瘤裸鼠模型,顺铂及扶正康复合剂连续给药7 d,称取体重及瘤重,计算抑瘤率,并利用PCR法和免疫组化法分别检测瘤体内细胞凋亡靶点(Bcl-2、Bax、Survivin)和血管新生促进因子(VEGF)的mRNA和蛋白的表达情况。结果:在抑瘤率方面,与模型对照组相比,各组裸鼠瘤重均有不同程度的减轻(P<0.05),且顺铂+扶正组抑瘤率最高(66.67%)。在细胞凋亡方面,扶正康复合剂联合顺铂能明显上调Bax的表达,下调Bcl-2、Survivin和VEGF的表达(P<0.05)。结论:扶正康复合剂联合顺铂具有抑制肿瘤增殖的作用。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
裸鼠荷瘤实验论文参考文献
[1].尚海涛,梁锡天,吴博,林程文.实时剪切波弹性(SWE)评价载NET-1siRNA靶向纳米微泡的治疗效果:肝癌荷瘤裸鼠的体内实验研究[C].中国超声医学工程学会第五届全国介入超声医学学术交流大会论文汇编.2019
[2].滕晓晶,董学妍,王智毅,余道军,王贤军.扶正康复合剂联合顺铂抑制胃癌SGC7901细胞荷瘤裸鼠肿瘤增殖作用的实验研究[J].中国临床药理学与治疗学.2019
[3].王亚坤,邹媛媛,裴静波.南方红豆杉水提物逆转胃癌细胞NCI-N87荷瘤裸鼠曲妥珠单抗耐药实验研究[J].中医学报.2019
[4].曹茜.阿帕替尼抑制胆囊癌荷瘤裸鼠肿瘤生长的实验研究[D].湖南师范大学.2018
[5].丁志超.磁共振靶向对比剂VEGF_(125-136)-Gd肝癌荷瘤裸鼠活体内成像实验研究[D].海南医学院.2018
[6].刘嘉晖.~(99)Tc~m标记Z_(HER2:V2)-培美曲塞在人肺腺癌荷瘤裸鼠体内分布及显像的实验研究[D].河北医科大学.2018
[7].梁会杰,刘阁玲.CCNG2基因过表达对甲状腺癌裸鼠移植瘤实验研究[J].现代养生.2016
[8].田磊.基因工程细胞hTNFα/CHO的构建及其细胞微囊抑制荷瘤裸鼠肿瘤生长的实验研究[D].中国人民解放军军事医学科学院.2016
[9].刘浩.PET评价槐耳浸膏治疗乳腺癌荷瘤裸鼠的实验研究[D].浙江大学.2016
[10].明慧.~(131)I标记RGD纳米脂质体的裸鼠荷瘤动物模型实验研究[D].天津医科大学.2016