论文摘要
目的探讨他克莫司对转化生长因子-β1（TGF-β1）诱导后成纤维细胞胶原生成的影响及其机制。方法将人皮肤成纤维细胞分为4组:空白组、模型组、空白他克莫司组和模型他克莫司组。空白组细胞不做任何处理,模型组细胞用10 ng·m L-1TGF-β1处理24 h,空白他克莫司组用200 nmol·L-1他克莫司处理24 h,模型他克莫司组同时加入10 ng·m L-1TGF-β1和200 nmol·L-1他克莫司处理24 h。用比色法测定8种不同浓度(0为空白组,25,50,100,200,400,800,1600 nmol·L-1)他克莫司作用下成纤维细胞乳酸脱氢酶（LDH）释放量。以免疫印迹实验检测自噬相关蛋白、内质网凋亡蛋白、Ⅰ型胶原蛋白（COLⅠ）和转录因子EB（TFEB）的表达。结果 8种不同浓度他克莫司作用后,成纤维细胞LDH释放量分别为（99. 33±5. 52）%,（99. 32±4. 40）%,（99. 32±4. 95）%,（98. 66±4. 45）%,（98. 80±6. 31）%,（98. 51±4. 35）%,（106. 29±6. 03）%和（121. 36±8. 24）%; 800 nmol·L-1以下浓度的他克莫司作用后,成纤维细胞LDH释放率与空白组比较,差异无统计学意义（P> 0. 05）。空白组、模型组和他克莫司模型组的LC3Ⅱ表达比值分别为1. 00±0. 23,3. 41±0. 25和4. 45±0. 44;这3组的溶酶体相关膜蛋白1（LAMP1）表达比值分别为1. 00±0. 25,3. 90±0. 43和2. 51±0. 22;这3组的内质网凋亡蛋白糖调节蛋白78（GRP78）表达比值为1. 00±0. 21,1. 94±0. 28和3. 10±0. 29;这3组的Caspase 3蛋白比值分别为1. 00±0. 22,1. 27±0. 38和3. 16±0. 24;这3组的COLⅠ蛋白表达比值分别为1. 00±0. 29,3. 26±0. 34和2. 09±0. 31;这3组的TFEB蛋白表达比值为1. 00±0. 26,2. 94±0. 44和1. 54±0. 19。模型组与空白组相比,诱导成纤维细胞自噬水平上调和TFEB蛋白表达增加,促进TFEB核易位和胶原沉积,上述蛋白表达差异均有统计学意义（均P <0. 01）。他克莫司降低溶酶体功能,增加内质网应激,造成细胞凋亡,减少TFEB蛋白表达,降低胞质及胞核内TFEB荧光强度,抑制胶原沉积,与模型组相比,上述蛋白表达的差异均有统计学意义（均P <0. 01）。结论他克莫司通过抑制TFEB介导溶酶体降解功能,减少TGF-β1诱导的成纤维细胞表型转化和胶原生成。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 周凌,刘泽明,周伟,陈丹洋,郭亮
关键词: 他克莫司,成纤维细胞,转化生长因子,转录因子
来源: 中国临床药理学杂志 2019年24期
年度: 2019
分类: 医药卫生科技
专业: 药学
单位: 武汉大学中南医院整形美容科
基金: 湖北省自然科学基金面上基金资助项目(2018CKB904)
分类号: R96
DOI: 10.13699/j.cnki.1001-6821.2019.24.006
页码: 3197-3200
总页数: 4
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