地衣芽胞杆菌中过表达丙酮酸羧化酶提高杆菌肽产量

地衣芽胞杆菌中过表达丙酮酸羧化酶提高杆菌肽产量

论文摘要

拟通过过表达丙酮酸羧化酶基因pyc A,获得杆菌肽高产菌株,提高杆菌肽产量.构建pyc A基因过表达工程菌株DW2/p HY-pyc A,以p HY300plk转化菌株DW2/300为对照.经过发酵研究验证,DW2/p HY-pyc A杆菌肽效价为767. 7U/m L,比DW2/300效价提高了14. 5%,另外在发酵过程中DW2/p HY-pyc A的生物量有所提高,且胞内草酰乙酸的含量提高了18. 6%.经过对DW2/p HY-pyc A的基因相对转录水平分析后发现,DW2/p HY-pyc A中TCA循环合成酶基因的转录水平均有所增加,该结果表明在pyc A基因过表达菌株中,TCA循环的代谢较对照菌株有所提高.因此,通过过表达pyc A,可以增强TCA回补反应,进而提高草酰乙酸的含量和强化TCA循环,最终提高了杆菌肽组成氨基酸的供给,可以实现杆菌肽的高产.

论文目录

  • 0 引言
  • 1 材料与方法
  •   1.1 菌株
  •   1.2 主要试剂
  •   1.3 培养基
  •   1.4 丙酮酸羧化酶游离强化表达工程菌的构建
  •   1.5 发酵方法
  •   1.6 生物量检测
  •   1.7 杆菌肽效价测定
  •   1.8 q RT-PCR测定转录水平
  •   1.9 草酰乙酸的检测
  • 2 结果和分析
  •   2.1 丙酮酸羧化酶过表达菌株的构建
  •   2.2 过表达丙酮酸羧化酶基因pycA对生物量和杆菌肽产量的影响
  •   2.3 草酰乙酸的检测
  •   2.4 过表达丙酮酸羧化酶基因pycA工程菌的转录水平分析
  • 3 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 刘钊远,余文莉,王勤,杨勇

    关键词: 杆菌肽,地衣芽胞杆菌,丙酮酸羧化酶

    来源: 湖北大学学报(自然科学版) 2019年01期

    年度: 2019

    分类: 基础科学

    专业: 生物学

    单位: 湖北大学生命科学学院

    基金: 国家自然科学基金(31500074)资助

    分类号: Q936

    页码: 15-21

    总页数: 7

    文件大小: 524K

    下载量: 125

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