导读:本文包含了精原干细胞论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:干细胞,小鼠,受体,多糖,睾丸,枸杞,精子。
精原干细胞论文文献综述
田稼,马珂,裴承斌,颜贝,马良宏[1](2019)在《小鼠精原干细胞体外培养体系建立与功能鉴定》一文中研究指出目的构建小鼠精原干细胞(SSCs)体外培养体系,并对培养的SSCs进行功能鉴定。方法采用两步酶法消化小鼠睾丸组织制备单细胞悬液,CD90、CD49f免疫磁珠分选SSCs,采用Sertoli细胞共培养方法体外培养SSCs,并将培养的SSCs移植到受体小鼠曲细精管,定期观察移植后SSCs在受体小鼠曲细精管增殖分化情况。结果本次研究培养的SSCs在体外大量增殖,SSCs标记物检测显示,CD90、CD49f未分化SSCs标记物表达阳性率均>99%,而CD117分化SSCs标记物表达阳性率<1%,SSCs转染GFP慢病毒后移植到受体小鼠曲细精管内可以广泛定植并增殖分化,移植后12w在受体小鼠曲细精管内可见GFP~+精子细胞。结论本研究中建立的小鼠SSCs体外培养体系,不仅能够促进SSCs大量增殖,同时保持了其未分化SSCs干细胞特性。(本文来源于《中国性科学》期刊2019年11期)
田贝贝,康恺,傅诗洁,赵一,效梅[2](2019)在《热应激对小鼠睾丸组织和精原干细胞中Sirt1、PLZF和Oct4基因表达的影响》一文中研究指出高温应激会损伤哺乳动物生殖系统,造成生殖器官组织形态和基因表达的改变,导致精子发生异常。成年动物睾丸中精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)具有不断增殖和自我更新的能力,是精子发生的基础,而PLZF(Promyelocytic Leukemia Zinc Finger)和Oct4(octamer-binding transcription factor)证实均是维持精原干细胞自我更新和增殖的重要基因。在精原干细胞中过表达Sirt1(Sirtuin type 1)基因能上调PLZF和Oct4的表达。此试验以雄性小鼠为研究对象,利用组织切片免疫染色、精原干细胞体外培养、细胞免疫荧光染色和荧光定量PCR等技术,检测热应激处理的活体小鼠睾丸组织和体外培养SSCs中的Sirt1、PLZF和Oct4基因表达变化。结果发现,所有热应激组样品中Sirt1、PLZF和Oct4基因的核酸、蛋白水平表达量均下调,小鼠睾丸组织切片中热应激组的Sirt1、PLZF和Oct4基因在曲细精管基底膜附近细胞群(含精原干细胞)中的特异性染色点减少,定量PCR检测证实该叁个基因的相对表达量在热应激组中均显着下调(P<0.01);体外培养SSCs中热应激组的Sirt1、PLZF和Oct4基因染色阳性细胞数目减少,定量PCR检测证实该叁个基因的相对表达量在热应激组细胞中均显着下调(P<0.01)。以上结果为进一步研究Sirt1在精原干细胞热应激过程中的功能奠定基础。(本文来源于《家畜生态学报》期刊2019年10期)
马珂,田稼,裴承斌,张绍华,赵宝运[3](2019)在《高温热应激构建小鼠精原干细胞移植受体模型》一文中研究指出目的:探讨高温热应激方法构建小鼠精原干细胞(SSCs)移植受体的可行性。方法:将4周龄的C57BL/6雄鼠和B6(Cg)-Tyrc-2J/J毛色基因纯合突变雄鼠置于恒温箱内,43℃热应激处理1 h,通过HE染色、免疫组化染色和TUNEL凋亡检测,寻找最佳移植时间;随后将SSCs移植入小鼠生精小管,定期观察移植后受体小鼠睾丸内SSCs增殖、分化及形成精子的情况,并将受体小鼠与正常同周龄雌鼠交配,观察其后代表观遗传学特征。结果:高温热应激3~5 d后受体小鼠睾丸生精小管内生精细胞层数减少,排列紊乱、疏松且大量缺失,间质细胞数量明显减少,生精细胞凋亡明显,自噬水平升高,12 d左右基本恢复。在分离纯化后的SSCs移植8周后,受体小鼠睾丸生精小管内分化形成生精细胞及具有遗传功能的精子,经过自然交配产生正常的后代。结论:高温热应激方法可快速、高效构建小鼠精原干细胞移植受体模型。(本文来源于《中华男科学杂志》期刊2019年09期)
赵鑫,杨化强[4](2019)在《大动物精原干细胞研究进展》一文中研究指出精原干细胞是存在于雄性动物睾丸内曲细精管基底膜上的生殖系干细胞。精原干细胞一方面通过自我更新来维持其在整个生命周期中自身群体的数量稳定,另一方面可以在精子发生过程中不断地分化成为各个阶段的生殖细胞并最终形成精子,从而将亲代携带的遗传信息传递给子代。目前在体外条件下可以进行精原干细胞的长期培养,并将其诱导分化为各级生精细胞。虽然对啮齿类动物精原干细胞的研究较为成熟,但是对大动物精原干细胞的研究进展较为缓慢。大动物精原干细胞的研究对了解人类相关生理机制和疾病至关重要,并且猪、牛和羊等农业动物的精原干细胞的研究为优良种畜扩繁和制备具有重要经济价值的基因修饰家畜提供新的手段。本文在介绍精原干细胞的特征基础上,重点综述了大动物精原干细胞的研究进展,探讨了目前研究中面临的主要问题和其未来应用前景,以期为动物新型替代繁殖技术、转基因动物制备、治疗雄性不育以及服务于再生医学提供新思路、新方法。(本文来源于《遗传》期刊2019年08期)
任玉芹,周勤,孙朝徽,宋立民,于清海[5](2019)在《红鳍东方鲀精原干细胞鉴定、分离及纯化》一文中研究指出为获得高比例精原干细胞,开展了不同月龄红鳍东方鲀精原干细胞分离纯化研究。采用组合酶消化法制备不同月龄的精巢单细胞悬液,通过形态学观察和生殖细胞特异基因vasa免疫荧光鉴别精原干细胞,Percoll不连续梯度(10%、30%和50%)纯化精原干细胞。结果显示:14月龄雄鱼精巢生殖细胞主要为A型精原细胞,精原干细胞占比极显着性地高于22月龄(P<0.05)。纯化后精原干细胞主要分布在10%—30%Percoll梯度带中, 14月龄雄鱼生殖细胞主要分布在此层,且纯化后精原干细胞占比远高于纯化前以及22月龄纯化前后。结果表明, 14月龄更适用组合酶消化分离,并通过Percoll梯度离心法获得高比例的红鳍东方鲀精原干细胞。(本文来源于《水生生物学报》期刊2019年04期)
张晓娜[6](2019)在《小鼠精原干细胞分离、纯化与去分化研究》一文中研究指出精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)是哺乳动物体内唯一可以将遗传信息传递给下一代、功能单一的干细胞,体外分离培养SSCs为探索其生物学特性及其增殖、分化与去分化机制奠定了基础。SSCs在特定的体外培养条件下,即使无外源基因操作也可以重编程形成多能干细胞。多能干细胞不仅具有自我复制的能力,而且具有形成多种组织和细胞的能力,具有很大的潜在应用前景。诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)虽然在体内外可分化形成叁胚层,但由于外源基因的插入使其应用受到制约。因此,SSCs更适用于人类临床及动物分子育种应用。本研究分为两部分,第一部分实验以小鼠作为动物模型,分离、纯化并体外培养小鼠精原干细胞(mouse spermatogonial stem cells,m SSCs)。采用机械分离法、两步酶消化法结合连续差速贴壁法成功分离、纯化得到来源于Oct4/GFP×CD1杂交品系F1代小鼠睾丸的mSSCs,并对体外培养的mSSCs进行鉴定分析。当细胞稳定生长时,通过观察细胞形态、碱性磷酸酶染色、免疫荧光染色、RT-PCR和RT-qPCR检测结果初步鉴定体外分离和培养的细胞满足mSSCs的标准,为第二部分实验提供实验材料。第二部分实验主要集中于用小分子化合物诱导mSSCs去分化形成多能干细胞。获得的细胞克隆能稳定生长时,在基因表达水平进行鉴定分析,比如Oct4、Sox2、Nanog和Rex1。细胞形态、GFP表达、碱性磷酸酶染色、免疫荧光染色、RT-PCR和RT-qPCR检测结果初步鉴定,mSSCs可以通过小分子化合物诱导液向多能性方向转化,并形成具有多能干细胞特性的细胞。本研究既丰富了制备多能干细胞的方法,也为今后深入研究mSSCs重编程为多能干细胞的机制提供了基础实验材料,同时也为研究男性不育症提供了新的途径。(本文来源于《内蒙古大学》期刊2019-06-03)
张奎原,南涛,张虎,孙泽坤,杨薛枫[7](2019)在《奥美拉唑对小鼠精原干细胞生长与增殖分化的影响》一文中研究指出目的探讨抑酸药物(奥美拉唑)对小鼠精原干细胞(SSCs)生长与增值分化的影响。方法以5~7日龄昆明小白鼠为材料,体外分离、培养小鼠睾丸支持细胞及精原干细胞,以支持细胞为饲养层,培养小鼠SSCs。研究分实验组和空白对照组,在共培养8 h后,实验组添加奥美拉唑(质子泵抑制剂) 1μmol/L,对照组不添加任何物质。在培养24、72、120、192、240 h分别用显微镜直视下观察两组SSCs在不同时间点SSCs生长形态及数目;在培养24、72、120、192、240 h后采用MTT法分别检测两组小鼠SScs生长与增值情况;培养240 h后运用PCR技术检测两组SSCS DNA含量。结果小鼠SSCs培养6~8 h开始贴壁生长,两组细胞呈透亮、圆形,体积中等,共培养240 h时,对照组细胞形成数百个细胞团,实验组细胞则数目相对较少。培养24、72、120、192、240 h时,实验组小鼠SSCs吸光度(OD)值均低于对照组;实验组内不同时间点OD值比较,差异有统计学意义(P <0. 05); PCR结果:对照组基因DNA量明显高于实验组(P <0. 05)。结论抑酸药物对小鼠SSCs生长与增值分化有明显的抑制作用,抑酸药物可能会影响男性的生殖能力。(本文来源于《实用医院临床杂志》期刊2019年03期)
代贵超[8](2019)在《枸杞多糖对山羊精原干细胞凋亡抑制及冷冻保存效果的影响》一文中研究指出精原干细胞(SSCs)是唯一能将遗传物质传递给后代的雄性生殖干细胞,目前已被应用于雄性生殖系统疾病治疗和基因编辑动物生产等领域。但是,由于SSCs数量稀少,仅占睾丸细胞的0.02%~0.03%,严重制约了其应用。因此,需要在体外进行SSCs培养促进其增殖,以获取足够数量的细胞进行相关研究。目前,关于SSCs体外培养的研究多集中在啮齿类动物及灵长类动物上。早在2005年,小鼠SSCs便可在体外长期培养并被定向诱导分化为精子,且移植到生殖缺陷小鼠睾丸内后可繁衍出后代。相较于啮齿类动物,山羊等大型家畜SSCs体外培养技术起步晚,技术尚不成熟,需要进一步研究完善。枸杞多糖(Lyciujm BarbarumPolysaccharides,LBP)是从枸杞中提取出来的一种生物活性物质,具有抗氧化应激、抗肿瘤、调节免疫功能、提高生殖功能等作用,常应用于动物细胞体外培养中。然而,目前LBP的对山羊SSCs的体外培养及冷冻保存的作用效果尚不明确。为了研究LBP对山羊SSCs体外增殖及冷冻保存效果的影响,本研究首先将LBP进行液相色谱分析以研究其复杂的成分组成,然后采用30~45日龄的山羊睾丸(n=6)结合机械分离法、两步酶解法及差速贴壁获取纯度较高的SSCs,使用碱性磷酸酶(AKP)染色法及免疫荧光染色法对山羊SSCs进行鉴定;随后,通过添加不同浓度的LBP体外培养山羊SSCs,利用CCK-8法检测细胞增殖情况,筛选最佳体外添加浓度;然后,分别测试细胞MDA、SOD及T-AOC的含量,使用western blotting检测各试验组中的BCL-2、BAX蛋白的相对表达量,再运用real time PCR技术检测各试验组中Bcl-2和Bax、Bad基因的相对表达量;最后,添加不同浓度的LBP将SSCs进行冷冻保存,解冻后使用台盼蓝染色法测试不同试验组细胞活率,以及不同试验组的MDA、SOD及T-AOC含量,最后使用real time PCR技术检测试验组中Bcl-2和Bax基因的相对表达量。本研究主要获得以下结果:1.将分离纯化后的SSCs使用偶氮偶联法碱性磷酸酶染色法及免疫荧光染色法进行染色,细胞呈AKP阳性,且细胞大量表达SSCs特异性标记分子CD9和GFRA1,证明经过差速贴壁及传代后可获取较高纯度的SSCs。2.经液相色谱仪分析后可知,LBP主要由甘露糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖、岩藻糖等单糖组成。与对照组相比,培养液中添加20μg/mL或40μg/mL的LBP均可以显着促进山羊SSCs增殖,培养6 d后其克隆数及细胞增殖数均显着得到提高(P<0.05),其中40μg/mL LBP添加组的效果最佳,其克隆数为57±6.73个/cm~3。培养3 d后,40μg/mL LBP添加组MDA含量显着低于其他组(P<0.05),而SOD及T-AOC含量高于其他组。培养9 d后,20μg/mL和40μg/mL LBP添加组MDA含量显着低于其他组(P<0.05),分别为1.84±0.08、1.68±0.13μmol/mL,但是SOD及T-AOC含量显着高于其他组(P<0.05)。3.对纯化后山羊SSCs冷冻保存,与其他试验组相比,解冻后4 mg/mL LBP添加组的细胞活率显着增高(P<0.05),达到了46.35%。与对照组相比,5个试验组的MDA含量均有所降低,其中4 mg/mL LBP添加组MDA含量显着低于其他试验组(P<0.05);与对照组相比,1、2、4、8 mg/mL LBP添加组的SOD及T-AOC含量均有所增加,其中4 mg/mL LBP添加组的SOD及T-AOC含量显着高于其他处理组(P<0.05)。4.Western blotting结果显示,山羊SSCs体外培养6 d后,与对照组对比,5个试验组的BCL-2蛋白的表达量均获得不同程度的升高,而BAX蛋白的表达量均出现不同程度的下降,其中40μg/mL LBP添加组的变化最大,其相对表达量为0.34,160μg/mL LBP添加组的处理组变化最小,其相对表达量为0.54。5.real time PCR结果表明,山羊SSCs体外培养6 d后,与对照组相比,5个试验组的抗凋亡基因Bcl-2表达量均有所上调。其中,40μg/mL LBP试验组的相对表达量为2.44,显着高于其他组(P<0.05)。与对照组相比,5个试验组的凋亡相关基因Bax和Bad表达量均有所降低,其中40μg/mL LBP添加组的相对表达量分别为0.28、0.36,显着低于其他试验组(P<0.05)。解冻后,与对照组相比,5个试验组的抗凋亡基因Bcl-2表达量均上调,其中4 mg/mL LBP组表达量显着高于其他处理组(P<0.05);与对照组相比,5个试验组的凋亡相关基因Bax表达量均有所降低,其中4mg/mL LBP添加组的相对表达量为0.46,显着低于其他处理组(P<0.05)。综上所述,细胞培养基础液中添加40μg/mL的LBP可获取最大的细胞克隆数及增殖数目,最有利于抑制山羊SSCs的凋亡;细胞冷冻基础液中添加4 mg/mL LBP解冻后可获取较高的细胞活率,有利于SSCs的冷冻保存。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2019-05-01)
李恬娇[9](2019)在《纳米材料G5-cRGD负载siRNA转染精原干细胞技术体系的建立》一文中研究指出精原干细胞是精子发生的基础,位于睾丸曲细精管的基底膜,通过自我更新和分化源源不断地产生精子,以维持整个雄性生命过程中的生育能力。精原干细胞在遗传资源的保存、不孕不育和遗传疾病治疗等方面具有广阔的应用前景。但是脂质体或电转等方法转染精原干细胞的效率都低,限制了精原干细胞的研究与应用。聚酰胺-胺树状大分子(PAMAM)作为一种纳米材料,具有独特的叁维结构,它的表面电荷和高密度的表面基团适合配体附着并具有促进靶向递送的作用。鉴于此,本研究以小鼠未分化A型精原细胞来源的C18-4细胞和原代精原干细胞作为研究对象,选择第五代PAMAM(G5)树状大分子,通过酰胺反应修饰cRGD多肽,合成PAMAM-cRGD(G5-cRGD)树状大分子,分析G5-cRGD树状大分子的物理化学特性、细胞毒性、内涵体逃逸能力和基因沉默效率,探究G5-cRGD是否能作为有效的基因递送载体负载siRNA转染精原干细胞,为精原干细胞后续的研究和临床应用奠定基础和提供有效的手段。主要研究结果如下:1、G5-cRGD能完全结合并负载siRNA。首先,通过红外光谱检测到G5-cRGD成功合成。其次,通过透射电镜观察到G5呈不规则分布,当负载siRNA后能自动包装成球形颗粒,平均粒径在70 nm,G5-cRGD-siRNA平均粒径在80 nm。凝胶阻滞分析发现,随着N/P比率的增加siRNA条带逐渐减弱。在N/P 10条件消失,表明G5和G5-cRGD能完全结合并负载siRNA。2、与Lipo2000对比,G5-cRGD具有降低细胞毒性的作用。CCK-8检测表明G5-cRGD-siRNA复合物在N/P 10条件下细胞活力高于90%,而脂质体Lipo2000转染细胞活力只有60%,因此G5-cRGD对细胞的毒性低。3、G5-cRGD能有效负载siRNA转染精原干细胞系C18-4细胞,而且溶酶体逃逸能力强。利用激光共聚焦观察和流式分析,表明G5和G5-cRGD能有效负载siRNA转染C18-4细胞。通过FAM标记siRNA(绿色荧光)和溶酶体红色荧光探针定位,发现G5-cRGD-siRNA复合物在24 h后开始部分逃逸溶酶体,在36 h出现大量释放。表明G5-cRGD能有效促进siRNA从溶酶体中的释放。4、G5-cRGD主要通过能量依赖的内吞途径进入细胞。经过NaN_3和低温条件处理,发现G5-cRGD主要通过能量依赖的内吞途径进入细胞,但也存在被动运输机制。5、与传统转染试剂Lipo2000相比,G5-cRGD能显着提高小鼠和猪原代精原干细胞中siRNA的递送效率分别达到35%和51%。G5-cRGD负载Cdk1+Cdk2 siRNA,干扰组中Cdk1和Cdk2基因的表达均低于对照组,细胞克隆数量相比对照组显着下调,而且生殖细胞中EdU阳性细胞仅为31%,Mock和NC对照组分别为58%和51%,表明能有效沉默靶基因的表达并明显抑制克隆的形成数目和EdU阳性细胞的数量。综上所述,本试验成功建立了纳米材料G5-cRGD高效转染原代精原干细胞的技术体系。该体系的建立将为精原干细胞的生物学研究、转基因动物制备、遗传资源保存和临床不孕不育的治疗等提供帮助。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2019-05-01)
郭柯君[10](2019)在《自噬在六价铬致大鼠睾丸及精原干细胞损伤中作用的研究》一文中研究指出六价铬的应用广、危害大、涉及人群多且接触途径广泛,为研究其对大鼠睾丸及精原干细胞的损伤机制,我们通过体内实验结合体外实验建立六价铬暴露模型,探讨自噬在铬毒性中的作用,为进一步完善铬毒作用机制以及临床上铬中毒的治疗提供新的毒理学实验依据。目的:建立六价铬致大鼠睾丸和精原干细胞损伤的模型,探讨自噬在睾丸和精原干细胞损伤中的作用机制。方法:体内实验:32只雄性Wistar大鼠随机分为四组:对照组和低、中、高剂量重铬酸钾暴露组(0、0.4、0.6和0.8 mg/kg·bw重铬酸钾)。腹腔注射重铬酸钾,每周染毒5天,连续染毒5周,对照组给予等容积生理盐水。观察各组大鼠的一般情况。5周后,处死大鼠,HE染色观察组织病理学改变,火焰原子吸收光法检测睾丸组织铬含量,免疫组化法检测LC3B、LAMP1和LAMP2蛋白表达;Western blotting法(WB法)检测自噬相关蛋白MFN-2、PINKI、p-parkin、Beclin1和LC3B表达情况,免疫荧光化学法检测各组精原干细胞标志物CHD1阳性表达率。体外实验:分离大鼠的精原干细胞,流式细胞仪检测表面标志CDH1与核内标志OCT4的表达,诱导其分化生成精子,CCK8法检测六价铬的细胞毒性。以0.5、1.0和5.0 mmol/L的重铬酸钾浓度暴露处理24h,对照组给予等体积PBS。电镜下检测各组自噬水平,流式细胞仪检测各组线粒体数量变化,双免疫荧光法标检测MFN-2与LC3B蛋白表达,WB法检测各组MFN-2、PINK1、p-parkin、Beclin1和和LC3B蛋白表达。3-MA抑制细胞自噬后检测精原干细胞LDH释放值变化。结果:体内实验:对照组大鼠一般状态正常,而暴露组状态不佳。中剂量组大鼠睾丸脏器系数较对照组显着降低(P<0.05),高剂量组睾丸脏器系数较对照组、低剂量组、中剂量组都显着降低(P<0.05);原子吸收结果显示暴露组睾丸铬含量显着高于对照组,且随着铬暴露水平的升高,各组间差异有统计学意义(P<0.05);HE结果显示随着六价铬暴露的剂量增加,低剂量组睾丸组织生精小管内出现生精细胞层数和成熟精子减少的现象。中剂量组还出现了管周膜增厚、基底膜破碎、小管外间质组织出现充血等现象。高剂量组可见生精结构完全破坏,细胞或完全缺无或形成多核巨细胞现象。免疫组化与WB结果表明铬暴露组睾丸中自噬相关蛋白PINKI、p-parkin、Beclin1、LC3B、LAMP1和LAMP2的表达水平较对照组显着升高(P<0.05)。而各暴露组MFN-2的表达水平较对照组显着降低(P<0.05)。随着六价铬暴露剂量升高,精原干细胞标志物CDH1阳性率越来越低(P<0.05)。体外实验:细胞鉴定结果多数细胞CDH1和OCT4阳性,诱导可分化为精子。电镜结果显示暴露组自噬泡数量较对照组显着增多(P<0.05)。暴露组线粒体数量较对照组显着降低(P<0.05)。免疫荧光双染结果显示,暴露组MFN-2较对照组显着降低(P<0.05),LC3B表达阳性率较对照组显着升高(P<0.05)。精原干细胞各组WB结果与体内试验结果一致。LDH试验显示3-MA抑制剂作用后细胞毒性降低(P<0.05)。结论:体内实验:六价铬能够造成大鼠睾丸组织损伤,在本实验的剂量范围内,随着暴露剂量的增加自噬水平逐渐增高;线粒体自噬相关蛋白的表达随暴露剂量增高而逐渐增高。体外实验:六价铬能对大鼠精原干细胞造成损伤,在本实验的剂量范围内,随着暴露剂量的增加,自噬水平逐渐增高;线粒体自噬相关蛋白的表达随暴露剂量增高而逐渐增高。抑制自噬后,六价铬对精原干细胞的毒性降低。(本文来源于《吉林大学》期刊2019-05-01)
精原干细胞论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
高温应激会损伤哺乳动物生殖系统,造成生殖器官组织形态和基因表达的改变,导致精子发生异常。成年动物睾丸中精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)具有不断增殖和自我更新的能力,是精子发生的基础,而PLZF(Promyelocytic Leukemia Zinc Finger)和Oct4(octamer-binding transcription factor)证实均是维持精原干细胞自我更新和增殖的重要基因。在精原干细胞中过表达Sirt1(Sirtuin type 1)基因能上调PLZF和Oct4的表达。此试验以雄性小鼠为研究对象,利用组织切片免疫染色、精原干细胞体外培养、细胞免疫荧光染色和荧光定量PCR等技术,检测热应激处理的活体小鼠睾丸组织和体外培养SSCs中的Sirt1、PLZF和Oct4基因表达变化。结果发现,所有热应激组样品中Sirt1、PLZF和Oct4基因的核酸、蛋白水平表达量均下调,小鼠睾丸组织切片中热应激组的Sirt1、PLZF和Oct4基因在曲细精管基底膜附近细胞群(含精原干细胞)中的特异性染色点减少,定量PCR检测证实该叁个基因的相对表达量在热应激组中均显着下调(P<0.01);体外培养SSCs中热应激组的Sirt1、PLZF和Oct4基因染色阳性细胞数目减少,定量PCR检测证实该叁个基因的相对表达量在热应激组细胞中均显着下调(P<0.01)。以上结果为进一步研究Sirt1在精原干细胞热应激过程中的功能奠定基础。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
精原干细胞论文参考文献
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