工业蛋白水解酶快速检测方法的建立与初步应用

工业蛋白水解酶快速检测方法的建立与初步应用

论文摘要

蛋白水解酶是一类重要的工业酶制剂,快速检测蛋白水解酶活力对新蛋白酶的发现、生产与应用极为重要。基于荧光共振能量转移原理,用氟硼荧荧光素标记大豆分离蛋白,以此为底物建立了一种快速检测蛋白水解酶活力的新方法。运用此方法检测5种工业蛋白酶,酶活在0. 025~0. 4 U/m L与荧光值呈现良好的线性关系,检测限范围为1. 1×10-4~1. 4×10-4U/m L,定量限范围为3. 7×10-4~4. 5×10-4U/m L,相比国标福林法灵敏度提高20 000倍以上。该方法灵敏度高、操作简便,在蛋白水解酶快速、微量检测及新型蛋白水解酶开发中具有应用潜力。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料与试剂
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 荧光素分子标记大豆分离蛋白
  •     1.2.2 均相法检测蛋白水解酶活力
  •     1.2.3 均相法的线性检测范围
  •     1.2.4 均相法的检测限(DL)和定量限(QL)
  •     1.2.5 均相法的检测稳定性
  •     1.2.6 均相法筛选新型蛋白水解酶
  • 2 结果与分析
  •   2.1 均相法的线性范围
  •   2.2 均相法的检测限(DL)和定量限(QL)
  •   2.3 均相法的稳定性
  •   2.4 均相法用于蛋白水解酶的筛选
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 宋鹏,程磊,田康明,王正祥

    关键词: 蛋白水解酶,酶活检测,大豆分离蛋白,氟硼荧染料,荧光标记

    来源: 食品与发酵工业 2019年17期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学

    专业: 生物学,化学

    单位: 天津科技大学生物工程学院工业发酵微生物教育部重点实验室,天津科技大学化工与材料学院

    基金: 政府间国际合作重点项目(2018YFE0100400),天津市高等学校创新团队建设规划(TD12-5002)

    分类号: Q55;O652

    DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.021134

    页码: 216-220

    总页数: 5

    文件大小: 492K

    下载量: 135

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