导读:本文包含了钩状纤维论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:食管下括约肌,G蛋白亚型,抗原抗体反应,蛋白印迹法
钩状纤维论文文献综述
张鑫[1]（2010）在《人食管下括约肌的套索纤维和钩状纤维与食管环形肌、胃底环形肌的G蛋白表达规律》一文中研究指出目的:人食管下括约肌(LES)是位于食管胃连接部特殊增厚的环形肌,其宽度约2-3cm。Liebermann-Meffert等首次提出人LES由位于胃小弯侧呈半环形的钩状纤维(clasp fibres)和位于大弯侧呈斜行分布的套索纤维(sling fibres)共同构成,这两束肌纤维与膈脚一起在食管胃结合部形成高压带,维持LES的关闭状态,使LES形成一种类似单向阀门的结构。正常状态下,由于LES的持续性收缩使胃内容物不能反流入食管,另一方面,由于LES的适时舒张允许了食物继续下行入胃,或呕吐和打嗝,使胃内的液体或气体反流如食管并经口腔排出。LES的收缩和舒张功能调节机制非常复杂,包括了神经系统、体液因素及自身肌源性等多种因素。G蛋白是细胞跨膜信号转导系统的重要组成部分,绝大多数肽类激素都是通过G蛋白传导通路发挥作用的。在神经递质物质中,除了几种氨基酸递质外,其余的神经递质物质,都主要是以在突触后细胞中产生第二信使类物质来完成跨膜信号转导的。有些被激活的G蛋白也可以直接调控一些通道的功能状态,改变膜的反应。不同的外界信号通过膜受体在膜内生成第二信使来进行跨膜信号转导的,都需要通过结构类似的各种G蛋白的介导。胃动素和胃泌素激活大鼠胃窦平滑肌细胞膜的Gi-3蛋白,继而引起平滑肌细胞的收缩。促胰液素引起的大鼠胃平滑肌细胞的舒张由Gs蛋白介导。但目前国内外对人LES受体类型及其分型以及调节机制的研究,主要局限于胆碱能受体,对于G蛋白的研究则相对甚少。现有的对人食管下括约肌(LES)的研究也主要是针对动物(大鼠等),与人有着种属,生理学的差异,对于人LES的G蛋白的表达规律及调节机制的相关研究则未见报告。本实验采用蛋白印迹法(Western-blot)研究人LES的G蛋白的Gi-3、Go、Gq11、Gs亚型在套索纤维、钩状纤维、食管环行肌和胃底环行肌中的表达规律,为进一步研究人LES调节机制奠定基础,为食管运动功能障碍性疾病的临床治疗提供理论依据。方法:1选取2008年12月到2009年10月在我院因高位食管中段癌行食管大部切除术患者30例。手术室采集新鲜食管胃连接部手术标本,锐性剥去胃贲门部及食管下段的粘膜层及粘膜下层后,制备套索纤维(S)、钩状纤维(C)、食管体部环行肌(E)和胃底环行肌(G)的肌条;2按照100ul TBS /10mg标本的比例加入TBS, 4℃条件下用组织匀浆器加入TBS液匀浆,匀浆液(4℃,1000×g)离心10分钟。弃上清后,以美国PIERCE公司的膜蛋白提取试剂盒制备膜受体蛋白,BCA法定量,调整蛋白至相同浓度后,应用电泳仪电泳,分离出与4种G蛋白亚型的分子量大小相应的蛋白后转膜,最后应用G蛋白亚型抗体行Western blot检测蛋白的表达,并分析IOD值。结果:Western blot四种G蛋白亚型有其相应蛋白条带的表达,分别是Gq /11、Gi-3、Go、Gs,分子量分别为41kDa、45kDa、40kDa、48kDa。相同肌条不同亚型蛋白表达的IOD值在clasp fibers (C)中两两比较,Gi-3较Go、Gq11、Gs的表达少。相同亚型在各肌条间没有蛋白表达的差异。结论:1.四种G蛋白亚型在钩状纤维(C)、套索纤维(S)、食管环形肌(E)、胃底环形肌(G)的肌条中均有表达。2.每一种肌束中的四种亚型的表达水平有差异。在钩状纤维(C)中Gi-3较Go、Gq11、Gs的表达少。在套索纤维(S)、食管环形肌(E)、胃底环形肌(G)中四种亚型的表达量无统计学差异。3.相同亚型在各肌条间蛋白的表达无差异。(本文来源于《河北医科大学》期刊2010-03-01）
高杨[2]（2010）在《人食管下括约肌套索纤维和钩状纤维中肝磷酯对细胞内钙离子浓度的影响以及1，4，5-叁磷酸肌醇受体的表达》一文中研究指出目的:人食管下括约肌(LES)是食管胃接合部(esophagogastric junction, EGJ)特殊增厚的一簇肌肉组织。20世纪70年代,Liebermann-Meffert等提出LES由套索纤维(sling fibers)和钩状纤维(clasp fibers)共同构成。这两束肌纤维与膈脚协同作用以维持食管下括约肌的正常关闭状态,并在食管胃接合部形成食管下括约肌高压带。正常状态下,此高压带可防止胃内容物反流入食管,并且在适当的时候降低压力以允许食管内食团下行入胃,或使胃内液体或气体排出。食管下括约肌功能的维持主要依赖神经体液因素以及食管下括约肌自身肌源因素等共同调节,以保障吞咽舒张的同时起到抗反流的作用。钙离子(Ca2+)对食管下括约肌的收缩功能也起到很关键的作用。根据我们先前的体外实验证明,在相同乙酰胆碱(Ach)浓度(10-8 mol/L)作用时套索纤维对Ach的敏感性更高;在Ach作用、引起细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)升高的变化时,钩状纤维[Ca2+]i的变化主要是因为L-Ca通道引起的Ca2+内流引起,而套索纤维[Ca2+]i的变化主要是因为细胞内Ca2+的释放引起。叁磷酸肌醇(IP3)作为细胞信号转导过程中重要的第二信使可与叁磷酸肌醇受体(IP3R)特异性结合,进而引发细胞内存储的钙离子释放,导致细胞内游离的钙离子浓度升高。目前公认的存在3种IP3R亚型,即IP3R 1、IP3R 2、IP3R 3。动物及人类部分细胞研究结果表明,IP3R的3种亚型即便是在同一生命体中,因组织和细胞类型的不同而分布不同且功能存在差异。目前针对1,4,5-叁磷酸肌醇受体(1,4,5- IP3R)不同亚型(IP3R 1、IP3R 2、IP3R 3)对食管下括约肌功能研究的中外文献并无记载。本实验采用激光共聚焦显微镜(LSCM)成像和蛋白印迹(Western-blot)两种方法,探讨IP3R的3种亚型在人食管下括约肌中的表达情况,并以食管环行肌(E)和胃底环行肌(G)与套索纤维(S)、钩状纤维(C)中受体蛋白的表达规律进行对比,为进一步研究叁磷酸肌醇受体在人食管下括约肌收缩调节机制中的作用奠定基础,更为完善地阐述人食管下括约肌收缩功能的调节机制。方法:1选取河北医科大学第四医院2009年3月到2010年2月因中高位食管癌行食管大部切除术患者共31例。手术室采集新鲜胃食管连接部标本,锐性剥去胃贲门部及食管下段的粘膜层及粘膜下层后,制备套索纤维(S)、钩状纤维(C)、食管体部环行肌(E)和胃底环行肌(G)的肌条。2将取得的套索纤维(S)和钩状纤维(C)标本以酶解的方法制备成单细胞悬液,以Fluo-3/AM负载稀释后各平均分成两份等量的细胞悬液平铺在共聚焦专用小平皿的中央玻片上,实验组标本中加入一定量的皂角苷(saponin)溶液、肝磷酯(heparin)溶液,对照组则为相同剂量的无钙缓冲液、heparin溶液,共聚焦显微镜扫描两组标本后分别加入一定量的Ach溶液,5s后再次扫描并记录同一单细胞内钙离子荧光强度。3以膜蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒提取受体蛋白,BCA法蛋白定量,配平蛋白至相同浓度与体积后,应用电泳仪电泳,分离出3种IP3R受体亚型分子量大小相应的蛋白后转膜,最后应用IP3R受体亚型抗体行暗室发光与曝光检测目的蛋白的表达,并分析其条带灰度值(IOD)。结果:1激光共聚焦显微镜成像实验组细胞荧光强度在加入Ach后增高均不明显(S 8.29±5.03,C 12.98±6.24),而对照组在加入Ach后钙离子荧光强度明显增高(S 37.50±15.03,C 28.49±6.57);在加入Ach前后,套索纤维和钩状纤维两组细胞的实验组与对照组比较均有显着差异,存在统计学意义(tS= 11.944,tC=4.84,p= 0.00)。2 Western blot存在至少2种IP3R受体亚型有其相应蛋白条带的表达:一种是IP3R 1,可显影于膜蛋白与胞浆蛋白,在C、S、E、G四个部位的灰度值分别为9118.11±4733.73,8665.15±3197.56,8597.43±3624.52,9013.00±5058.29;另一种极有可能是IP3R 3,主要显影于胞浆蛋白,在C、S、E、G四个部位的灰度值分别为20686.58±9478.28,20016.14±7764.18,11200.29±10381.24,11817.99±10498.55;钩状纤维(C)和套索纤维(S)中两种受体亚型在表达量有统计学差异(FC=16.543,FS=29.628,p=0.00),食管平滑肌(E)和胃底平滑肌(G)的表达量无统计学差异(FE=1.139,p=0.309;FG=1.105,p=0.336)。结论:1 IP3R的特异性拮抗剂肝磷酯(heparin)可降低乙酰胆碱(Ach)触发的收缩时LES套索纤维和钩状纤维细胞内钙离子浓度,也从侧面证明了人LES单细胞内IP3R的存在且其功能为影响细胞内钙离子浓度;2钩状纤维和套索纤维中至少存在2种IP3R受体亚型:一种是IP3R 1,存在于细胞膜与胞浆,表达量较低;另一种极有可能是IP3R 3,主要存在于胞浆,且表达量较高;两种受体亚型在钩状纤维和套索纤维的表达有区别,钩状纤维均高于套索纤维。(本文来源于《河北医科大学》期刊2010-03-01）
高立平,刘俊峰,温士旺,田子强,季保庆[3]（2006）在《胆囊收缩素受体对人食管下括约肌套索纤维和钩状纤维的调节机制》一文中研究指出目的探讨人食管下括约肌的套索纤维和钩状纤维对CCK-8和胃泌素-17的反应特点,以及胆囊收缩素受体对两者的调节作用。方法运用离体组织张力测量技术,得出套素纤维和钩状纤维对CCK-8和胃泌素-17的最大收缩效应值(Emax),以及特异性胆囊收缩素受体拮抗剂对 CCK-8的pKB值。结果套索纤维对CCK-8和胃泌素-17产生了较强的浓度依赖性收缩反应 [Emax值:(5．18±0．50)mN／mm2和(4．91±0．95)mN／mm2],而钩状纤维的收缩强度[Emax值: (0．73±0．23)mN／mm2和(0．72±0．14)mN／mm2]显着低于套索纤维(P<0．001;P<0．01)。 CR1409和CR2945对CCK-8引发的套索纤维收缩均产生了浓度依赖性抑制作用,前者的pKB值 (7．51±0．11)大于后者(7．15±0．11)(P<0．05)。结论套索纤维对CCK-8和胃泌素-17刺激的收缩强度显着大于钩状纤维,CCKA受体在其中发挥着更为重要的作用。(本文来源于《中华实验外科杂志》期刊2006年04期）
钩状纤维论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:人食管下括约肌(LES)是食管胃接合部(esophagogastric junction, EGJ)特殊增厚的一簇肌肉组织。20世纪70年代,Liebermann-Meffert等提出LES由套索纤维(sling fibers)和钩状纤维(clasp fibers)共同构成。这两束肌纤维与膈脚协同作用以维持食管下括约肌的正常关闭状态,并在食管胃接合部形成食管下括约肌高压带。正常状态下,此高压带可防止胃内容物反流入食管,并且在适当的时候降低压力以允许食管内食团下行入胃,或使胃内液体或气体排出。食管下括约肌功能的维持主要依赖神经体液因素以及食管下括约肌自身肌源因素等共同调节,以保障吞咽舒张的同时起到抗反流的作用。钙离子(Ca2+)对食管下括约肌的收缩功能也起到很关键的作用。根据我们先前的体外实验证明,在相同乙酰胆碱(Ach)浓度(10-8 mol/L)作用时套索纤维对Ach的敏感性更高;在Ach作用、引起细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)升高的变化时,钩状纤维[Ca2+]i的变化主要是因为L-Ca通道引起的Ca2+内流引起,而套索纤维[Ca2+]i的变化主要是因为细胞内Ca2+的释放引起。叁磷酸肌醇(IP3)作为细胞信号转导过程中重要的第二信使可与叁磷酸肌醇受体(IP3R)特异性结合,进而引发细胞内存储的钙离子释放,导致细胞内游离的钙离子浓度升高。目前公认的存在3种IP3R亚型,即IP3R 1、IP3R 2、IP3R 3。动物及人类部分细胞研究结果表明,IP3R的3种亚型即便是在同一生命体中,因组织和细胞类型的不同而分布不同且功能存在差异。目前针对1,4,5-叁磷酸肌醇受体(1,4,5- IP3R)不同亚型(IP3R 1、IP3R 2、IP3R 3)对食管下括约肌功能研究的中外文献并无记载。本实验采用激光共聚焦显微镜(LSCM)成像和蛋白印迹(Western-blot)两种方法,探讨IP3R的3种亚型在人食管下括约肌中的表达情况,并以食管环行肌(E)和胃底环行肌(G)与套索纤维(S)、钩状纤维(C)中受体蛋白的表达规律进行对比,为进一步研究叁磷酸肌醇受体在人食管下括约肌收缩调节机制中的作用奠定基础,更为完善地阐述人食管下括约肌收缩功能的调节机制。方法:1选取河北医科大学第四医院2009年3月到2010年2月因中高位食管癌行食管大部切除术患者共31例。手术室采集新鲜胃食管连接部标本,锐性剥去胃贲门部及食管下段的粘膜层及粘膜下层后,制备套索纤维(S)、钩状纤维(C)、食管体部环行肌(E)和胃底环行肌(G)的肌条。2将取得的套索纤维(S)和钩状纤维(C)标本以酶解的方法制备成单细胞悬液,以Fluo-3/AM负载稀释后各平均分成两份等量的细胞悬液平铺在共聚焦专用小平皿的中央玻片上,实验组标本中加入一定量的皂角苷(saponin)溶液、肝磷酯(heparin)溶液,对照组则为相同剂量的无钙缓冲液、heparin溶液,共聚焦显微镜扫描两组标本后分别加入一定量的Ach溶液,5s后再次扫描并记录同一单细胞内钙离子荧光强度。3以膜蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒提取受体蛋白,BCA法蛋白定量,配平蛋白至相同浓度与体积后,应用电泳仪电泳,分离出3种IP3R受体亚型分子量大小相应的蛋白后转膜,最后应用IP3R受体亚型抗体行暗室发光与曝光检测目的蛋白的表达,并分析其条带灰度值(IOD)。结果:1激光共聚焦显微镜成像实验组细胞荧光强度在加入Ach后增高均不明显(S 8.29±5.03,C 12.98±6.24),而对照组在加入Ach后钙离子荧光强度明显增高(S 37.50±15.03,C 28.49±6.57);在加入Ach前后,套索纤维和钩状纤维两组细胞的实验组与对照组比较均有显着差异,存在统计学意义(tS= 11.944,tC=4.84,p= 0.00)。2 Western blot存在至少2种IP3R受体亚型有其相应蛋白条带的表达:一种是IP3R 1,可显影于膜蛋白与胞浆蛋白,在C、S、E、G四个部位的灰度值分别为9118.11±4733.73,8665.15±3197.56,8597.43±3624.52,9013.00±5058.29;另一种极有可能是IP3R 3,主要显影于胞浆蛋白,在C、S、E、G四个部位的灰度值分别为20686.58±9478.28,20016.14±7764.18,11200.29±10381.24,11817.99±10498.55;钩状纤维(C)和套索纤维(S)中两种受体亚型在表达量有统计学差异(FC=16.543,FS=29.628,p=0.00),食管平滑肌(E)和胃底平滑肌(G)的表达量无统计学差异(FE=1.139,p=0.309;FG=1.105,p=0.336)。结论:1 IP3R的特异性拮抗剂肝磷酯(heparin)可降低乙酰胆碱(Ach)触发的收缩时LES套索纤维和钩状纤维细胞内钙离子浓度,也从侧面证明了人LES单细胞内IP3R的存在且其功能为影响细胞内钙离子浓度;2钩状纤维和套索纤维中至少存在2种IP3R受体亚型:一种是IP3R 1,存在于细胞膜与胞浆,表达量较低;另一种极有可能是IP3R 3,主要存在于胞浆,且表达量较高;两种受体亚型在钩状纤维和套索纤维的表达有区别,钩状纤维均高于套索纤维。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
钩状纤维论文参考文献
[1].张鑫.人食管下括约肌的套索纤维和钩状纤维与食管环形肌、胃底环形肌的G蛋白表达规律[D].河北医科大学.2010
[2].高杨.人食管下括约肌套索纤维和钩状纤维中肝磷酯对细胞内钙离子浓度的影响以及1，4，5-叁磷酸肌醇受体的表达[D].河北医科大学.2010
[3].高立平,刘俊峰,温士旺,田子强,季保庆.胆囊收缩素受体对人食管下括约肌套索纤维和钩状纤维的调节机制[J].中华实验外科杂志.2006