论文摘要
目的探讨微RNA-29b（miR-29b）在心肌缺血/再灌注（Ischemia/Reperfusion,I/R）损伤过程中是否发挥保护作用并探讨其可能的调控机制。方法通过100μmol/L叔丁基过氧化氢（TBHP）诱导H9C2心肌细胞损伤构建I/R细胞模型;分别设立正常对照组,TBHP处理组,NC miRNA处理组,miR-29b类似物（mimic）处理组。通过实时荧光定量多聚核苷酸链式反应（qPCR）检测各组心肌细胞内miR-29b表达量;人胆囊收缩素/缩胆囊素八肽（CCK-8）检测各组心肌细胞的存活率;蛋白质印迹法（Western Blot）检测心肌细胞中凋亡蛋白和蛋白激酶B（Akt）蛋白磷酸化水平的改变。另一方面,将30只C57/B6小鼠（6～7周龄）逐个编号,通过随机数字表法抽样,随机分为三组,设立I/R组、NC miRNA处理组和miR-29b激动剂（agomir）处理组,其中miR-29b agomir组小鼠预先给予miR-29b agomir治疗。结扎冠状动脉左前降支30 min,然后再灌注4 h建立心肌缺血再灌注动物模型。通过埃文斯蓝（Evans）和2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）双重染色评估三组小鼠心肌梗死面积;qPCR检测各组小鼠心肌组织内miR-29b表达量;蛋白质印迹法检测心肌组织内凋亡蛋白改变。结果细胞层面:与TBHP处理组相比（65±3）%,上调miR-29b表达可增加心肌细胞的存活率（85±3）%,下调心肌细胞凋亡蛋白表达（0.86±0.07）。进一步的蛋白质印迹法实验结果表明:与TBHP处理组（0.81±0.05）相比,上调miR-29b能够抑制Akt蛋白磷酸化（0.41±0.02）。动物层面:miR-29b agomir处理组小鼠心肌梗死面积（24±3）%与I/R组（62±2）%相比明显减少,且心肌组织凋亡蛋白表达明显减少（0.32±0.04）。结论上调miR-29b表达可以减少缺血再灌注损伤引起的心肌细胞凋亡。miR-29b可能是通过调控靶基因Akt磷酸化水平,下调心肌细胞凋亡水平,从而保护心脏。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 高英英
关键词: 再灌注损伤,心肌缺血,蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶,细胞凋亡,小鼠,近交系,信号通路
来源: 安徽医药 2019年12期
年度: 2019
分类: 医药卫生科技
专业: 心血管系统疾病
单位: 青海省心脑血管病专科医院心律失常一科
分类号: R54
页码: 2463-2467+2546
总页数: 6
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标签：再灌注损伤论文; 心肌缺血论文; 蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶论文; 细胞凋亡论文; 小鼠论文; 近交系论文; 信号通路论文;