导读:本文包含了脑区特异性表达论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:狂犬病,糖蛋白,蛋白表达,单克隆抗体
脑区特异性表达论文文献综述
汪孟航[1]（2017）在《狂犬病病毒G蛋白的克隆表达及其V区特异性单克隆抗体的制备与鉴定》一文中研究指出狂犬病(Rabies)是由狂犬病病毒(Rabies virus,RV)感染引起的致死性神经紊乱传染病。RV基因组为单股负链RNA,其具有五种结构蛋白,分别是N蛋白,P蛋白,M蛋白,G蛋白和L蛋白。在五种结构蛋白中,G蛋白在病毒结构蛋白中具有重要地位,它存在于病毒表面,既是病毒的主要保护性抗原,又在病毒侵染宿主造成神经系统疾病中具有重要作用,与病毒感染性直接相关。本研究根据RV弱毒型LBNSE株G基因全序列,成功构建了原核表达载体p ET-30a-G,用于完整表达RV G蛋白。重组表达质粒p ET-30a-G转化入大肠杆菌表达株BL 21(DE3)中,利用IPTG诱导,并采用SDS-PAGE和Western blot两种方法对其表达性进行分析,结果一致性的在蛋白分子量67 KDa附近出现了蛋白大量表达的条带,表明构建的p ET-30a-G重组质粒正确表达G蛋白,大约为67 KD a,并且具有相应的蛋白反应原性,可用于后续研究提供研究基础。同时,本研究进一步对RV弱毒型LBNSE株与野生型IMDRV-13株的G蛋白进行真核表达,并成功构建了两种不同真核表达载体p CAGGS-G/p CAGGS-13G。利用免疫荧光与RT-PCR的方法鉴定重组质粒的表达情况,结果免疫荧光出现了特异性的荧光信号,RT-PCR鉴定出现了特异性的条带,表明构建的两种真核重组表达质粒具有正确表达G蛋白的能力。该研究成果可用于后续研究中鉴定Mc Ab的识别位点提供研究基础,并将为进一步揭示RV G蛋白生物学功能提供研究基础。为制备RV G蛋白特异性单克隆抗体(Mc Ab)及鉴定其识别范围,本研究采用人工合成多肽“PPDQLVNLHDFRSDEIEHLVVEE”与KLH的偶联物免疫小鼠,经筛选制备出一株阳性杂交瘤细胞,记作4D3,其亚类鉴定为Ig G 2b/κ链。利用构建好的表达载体p CAGGS-G/p CAGGS-13G鉴定Mc Ab的结合范围。免疫荧光与Western blot分析显示:该株Mc Ab与真核表达的人工减毒株LBNSE G蛋白可发生特异反应,而与强毒株IMDRV-13 G蛋白不反应。将免疫用多肽序列、毒株LBNSE相应序列和强毒株IMDRV-13相应序列相互比较,G蛋白的第264位氨基酸的改变直接影响该株Mc Ab的结合,由于261位至264位氨基酸构成G蛋白V区线性表位,可推测该株Mc Ab可识别G蛋白V区线性表位。本试验结果可为进一步研究G蛋白的结构、功能和毒株的初步筛查提供参考,为控制和消灭狂犬病做出相应贡献。本实验室也设计了其他多肽序列的组合,正在进行单抗的制备,以期获得全覆盖的抗体组合,为狂犬病毒的基础研究和检测技术研究提供可靠的工具抗体。(本文来源于《中国农业科学院》期刊2017-04-01）
周震,王凯,刘爽,宋宛珊,马妍[2]（2014）在《化痰通络方对急性脑梗死大鼠rt-PA溶栓后不同脑区星形胶质细胞特异性蛋白表达的影响》一文中研究指出目的:观察化痰通络方对急性脑梗死大鼠重组组织纤溶酶原激活剂(rt-PA)溶栓后不同脑组织中星形胶质细胞相关特异性蛋白水通道蛋白4(AQP-4)及血清中S100β蛋白表达的影响。方法:将240只健康SD大鼠随机分为6组:假手术组、模型组、rt-PA组、化痰通络方联合rt-PA组(中药低、中、高剂量组,剂量分别为3.6,7.2,14.4 g·kg-1),采用自身栓子法制备大鼠大脑中动脉栓塞模型(MCAO),rt-PA组与化痰通络方联合rt-PA组于血栓注入后3 h一次性予以5.67 mg·kg-1rt-PA溶栓治疗,后者联合给予低、中、高剂量化痰通络方中药灌胃治疗,6 h组于造模成功后给予中药1次;24 h组于造摸成功后及处死前2 h各给中药1次,共2次;72 h组于造模成功后开始给药,每日给中药2次,持续3 d,共6次;7 d组于造模成功后开始给药,每日给中药2次,持续7 d,共14次。分别于4个时相应用Western blot法观察不同时相大鼠皮质及海马AQP-4蛋白的表达,ELISA法检测血清中S100β蛋白的含量。结果:各实验组不同脑组织AQP-4相对丰度值及血清S100β含量自6 h起逐渐升高,24 h最高,随后逐渐降低,7 d时接近6 h水平;同一时相与假手术组比较,各实验组AQP-4及S100β蛋白均显著升高,说明造模成功。与模型组相比,中药中、高剂量组AQP-4蛋白于24 h或72 h或7 d时分别出现显着下降(P<0.05),研究结果并无明显集中现象,但整体趋势表明中药中、高剂量组能明显减少AQP-4的表达;rt-PA组、中药低、中、高剂量组S100β虽未出现明显差异,但均有不同程度降低,且以中药组下降趋势明显。结论:①溶栓治疗后,血脑屏障结构及功能损害于24 h时最为严重;②化痰通络方联合rt-PA溶栓可降低不同脑组织中AQP-4表达及血清中S100β含量进而防治急性脑梗死溶栓后出血转化的发生与发展。(本文来源于《中国实验方剂学杂志》期刊2014年09期）
李林林[3]（2013）在《XFM及其特异性颉颃剂对大鼠脑区NMDAR1、BDZR表达的影响》一文中研究指出小型猪是建立疾病模型的较为理想的实验动物，为方便其更好地在科研工作和临床实践中应用，便要求为小型猪提供安全优良的麻醉及催醒。小型猪专用复合麻醉剂XFM及XFM特异性颉颃剂已经研制成功，二者作用机理的研究也已取得了很多进展。本试验旨在研究XFM及XFM特异性颉颃剂对大鼠各脑区N-甲基-D-天冬氨酸Ⅰ型受体（NMDAR1）及苯二氮卓受体（BDZR）表达的影响，从而探讨XFM及XFM特异性颉颃剂分别产生麻醉和催醒作用的可能机理。本试验选择Wistar鼠为实验动物，通过腹腔注射给药，采用免疫组织化学方法对NMDAR1及BDZR的表达进行定位和初步定量，探讨XFM及XFM特异性颉颃剂可能的作用机制，实验结果如下。1．腹腔注射XFM麻醉后，与空白对照组相比，麻醉组大鼠大脑皮层、海马、丘脑、小脑NMDAR1的阳性表达量均显着下降；随麻醉时间的推移，海马NMDAR1阳性表达量显着下降而大脑皮层、小脑、丘脑NMDAR1的阳性表达量显着上升；麻醉过程中，脑干NMDAR1的阳性表达量无显着变化。2．腹腔注射XFM麻醉后，与空白对照组相比，麻醉组大鼠大脑皮层、海马、丘脑BDZR的阳性表达量均显着上升；随麻醉时间的推移，大脑皮层、海马、丘脑BDZR的阳性表达量显着下降；麻醉过程中，小脑和脑干BDZR的阳性表达量无显着变化。3．腹腔注射XFM特异性颉颃剂催醒后，与空白对照组相比，催醒组大鼠大脑皮层、海马、丘脑NMDAR1的蛋白表达量显着降低而小脑NMDAR1的蛋白表达量显着升高；与麻醉组相比，催醒组大鼠大脑皮层、海马、丘脑、小脑NMDAR1的蛋白表达量显着升高。与空白对照组及麻醉组相比，催醒组脑干NMDAR1的阳性表达量无显着变化。4．腹腔注射XFM特异性颉颃剂催醒后，与空白对照组相比，催醒组大鼠大脑皮层、海马、丘脑BDZR蛋白表达量无显着变化；与麻醉组相比，催醒组大鼠大脑皮层、海马、丘脑BDZR蛋白表达量显着降低。与空白对照组及麻醉组相比，催醒组小脑和脑干BDZR的阳性表达量无显着变化。实验结果表明：（1）XFM对大脑皮层、海马、丘脑、小脑NMDAR1阳性表达量以及对大脑皮层、海马、丘脑BDZR阳性表达量的影响可能是其产生全麻作用的重要机制之一。XFM的全麻作用可能与降低大脑皮层、海马、丘脑、小脑内NMDAR1阳性表达量，同时升高大脑皮层、海马、丘脑内BDZR阳性表达量有关。（2）XFM特异性颉颃剂对大脑皮层、海马、丘脑、小脑NMDAR1阳性表达量以及大脑皮层、海马、丘脑BDZR阳性表达量的影响可能是其产生催醒作用的重要机制之一。XFM特异性颉颃剂的催醒作用可能与升高大脑皮层、海马、丘脑、小脑内NMDAR1阳性表达量，同时降低大脑皮层、海马、丘脑内BDZR阳性表达量有关。(本文来源于《东北农业大学》期刊2013-06-01）
王菲菲,赵益明,江淼,姚拾秀,李雪美[4]（2011）在《抗VWF-A3区特异性单抗SZ-123单链抗体的构建和表达》一文中研究指出目的以能与vWF-A3区特异结合的单克隆抗体SZ-123为模板,构建其单链抗体,为深入研究vWF-A3结构与功能的关系提供有力的工具。方法通过逆转录及多聚酶链反应,扩增并克隆单抗SZ-123的可变区基因VH、VL,经测序后加入连接肽,构建成SZ-123单链抗体(SZ-123 ScFV),并在大肠杆菌中进行表达。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和Western blot方法验证SZ-123 ScFV的免疫原性。结果 VH、VL可变区基因符合小鼠抗体可变区特征,SZ-123 ScFV基因拼接正确。表达产物除少量为分泌型外,主要以包涵体形式存在,表达量占菌体蛋白的20%。经过变性和复性后,获得具有生物活性的高纯度单链抗体片段。结论成功表达了SZ-123单链抗体,该小分子抗体具有特异结合vWF-A3区的能力。(本文来源于《苏州大学学报(医学版)》期刊2011年06期）
王菲菲,赵益明,江淼,阮长耿[5]（2011）在《抗vWF-A3区特异性单抗SZ-123单链抗体的构建和表达》一文中研究指出本室之前报道了一株特异性针对vWF-A3区的单克隆抗体SZ-123,该单抗不仅能抑制vWF与胶原的结合,还能抑制vWF与血小板的结合(血小板膜糖蛋白GPIb结合于vWF-A1区),这一结果提示vWF-A3区胶原结合部位可能动态调节vWF-A1区的功能。之前的研究已经排除了SZ-123与VWF-A1区的作用,有假设提出是由于SZ-123分子量较大的缘故单抗在与VWF-A3作用的同时影响了的VWF-A1区的空间构像,从而发挥作用。因此,通过基因工程手段制备分子量较小的单链抗体,有利于从蛋白质空间结构上解释SZ-123的作用机制,(本文来源于《中华医学会血液学分会第十叁届全国血栓与止血学术会议暨“血栓栓塞性疾病（血栓与止血）基础与临床研究进展”论文摘要汇编及学习班讲义》期刊2011-08-11）
章蓉[6]（2006）在《脑区特异性表达rtTA转基因鼠的构建及初步应用》一文中研究指出调控转基因在发育的特定阶段和特定组织中进行表达可以更加精确的研究某一基因产物的功能,同时这种可调控性既可以避免传统不可调控转基因在胚胎发育中早期表达的毒性作用或致死作用而阻碍对表型的分析,又可以避免基因过度表达而造成难于分析的复杂的多表型。四环素调控系统由于可以严密高效的调控转基因的表达,而从众多的调控系统中脱颖而出,被广泛应用于各个生物学领域,并已成功应用于人工调控转基因小鼠中外源基因的表达。本研究即是应用四环素调控系统中的Tet-on系统,将其反式激活子rtTA用分子生物学方法克隆到仅在前脑特异性表达的钙调蛋白依赖性蛋白激酶(CaM kinase IIalpha)α亚基启动子序列之后,构建p279-rtTA重组质粒。通过对FVB小鼠受精胚胎的雄原核显微注射,获得阳性转基因小鼠,以此构建脑区特异性表达rtTA的工具小鼠模型。此小鼠模型建立之后,与本室已构建的pTRE-SV40Tag转基因小鼠,即Tet-on系统中反应组分转基因小鼠杂交,得到双阳性转基因小鼠经强力霉素诱导检测SV40Tag在前脑表达情况,由此来验证该模型工具鼠的诱导效率。实验中注射移植后出生原代小鼠179只,经PCR和Southern检测得到p279-rtTA阳性小鼠3只(1♂2♀)。F1代阳性小鼠脑组织中检测到rtTA的表达,其它脏器中未检测到。通过饮水添加Dox(2mg/ml)及5%蔗糖进行诱导的杂交双阳性小鼠脑及各脏器组织中未检测到SV40Tag的表达。实验结果显示,此四环素调控组分的转基因工具鼠的构建是成功的,它可以为将来细致研究其他脑瘤相关基因的功能及基因治疗的研究提供便利。(本文来源于《扬州大学》期刊2006-05-01）
刘志英,魏红山,董庆鸣,刘顺爱,郭晶晶[7]（2006）在《X／C区特异性siRNA对HBV抗原体外表达的影响》一文中研究指出目的:观察非P区HBV DNA特异性干扰RNA(siRNA)对HBV抗原表达的影响。方法:设计合成针对 HepG 2．2．15细胞系中的HBV基因X、C区序列的特异性寡核苷酸片断,插入含有RNA聚合酶Ⅲ启动子(RNA polⅢ)的PGE-1短发夹RNA(shRNA)真核表达载体中,构建成功pshHBV-X和pshHBV-C表达质粒,用其转染HepG2．2．15细胞,观察转染后24、48、72 h对细胞上清中的HBsAg和HBeAg的表达的影响。结果:无(本文来源于《第五届全国肝脏疾病临床暨中华肝脏病杂志成立十周年学术会议论文汇编》期刊2006-05-01）
陈琅,邹漳钰,陈新,林立芳,沈晓丽[8]（2005）在《戊四氮致癎大鼠不同脑区神经元特异性烯醇酶的表达及意义》一文中研究指出目的研究神经元特异性烯醇酶(NSE)的改变.探讨戊四氮(PTZ)致癎大鼠癫癎(EP)后脑组织的损坏情况。方法SD大鼠50只,随机分为对照组(A组,n=10)及实验组(n=40)。A组注射生理盐水,实验组腹腔注射PTZ50mg/(kg·次)。根据EP发作分级,0-1级7只,为B组,立即取脑;2级以上33只,于EP发作后0h(C组,n=10)、6h(D组,n=11)、24h(E组,n=10)、72h(F组.n=2)取脑。取躯干血后分别取海马、中脑、纹状体和额叶皮质。采用酶标法测血清和各脑区NSE值;以S-P免疫组织化学染色法染色,观察各组大鼠海马NSE表达。结果EP后各脑区和血清NSE均明显高于对照组;既使无EP大发作.但有兴奋症状的大鼠上述区域和血清NSE亦高于对照组。动态观察EP后不同时间段,发现中脑NSE在EP后6h达到高值.余脑区EP后即达高值,后出现下降,提示额叶、海马和纹状体神经损伤在前,而中脑神经损伤在后。免疫组织化学染色显示EP大发作后海马NSE表达明显增加,EP后72h与对照组相似。结论EP发生后NSE明显升高,尤其是海马区,表明EP可造成大脑神经细胞的损坏。(本文来源于《实用儿科临床杂志》期刊2005年10期）
脑区特异性表达论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:观察化痰通络方对急性脑梗死大鼠重组组织纤溶酶原激活剂(rt-PA)溶栓后不同脑组织中星形胶质细胞相关特异性蛋白水通道蛋白4(AQP-4)及血清中S100β蛋白表达的影响。方法:将240只健康SD大鼠随机分为6组:假手术组、模型组、rt-PA组、化痰通络方联合rt-PA组(中药低、中、高剂量组,剂量分别为3.6,7.2,14.4 g·kg-1),采用自身栓子法制备大鼠大脑中动脉栓塞模型(MCAO),rt-PA组与化痰通络方联合rt-PA组于血栓注入后3 h一次性予以5.67 mg·kg-1rt-PA溶栓治疗,后者联合给予低、中、高剂量化痰通络方中药灌胃治疗,6 h组于造模成功后给予中药1次;24 h组于造摸成功后及处死前2 h各给中药1次,共2次;72 h组于造模成功后开始给药,每日给中药2次,持续3 d,共6次;7 d组于造模成功后开始给药,每日给中药2次,持续7 d,共14次。分别于4个时相应用Western blot法观察不同时相大鼠皮质及海马AQP-4蛋白的表达,ELISA法检测血清中S100β蛋白的含量。结果:各实验组不同脑组织AQP-4相对丰度值及血清S100β含量自6 h起逐渐升高,24 h最高,随后逐渐降低,7 d时接近6 h水平;同一时相与假手术组比较,各实验组AQP-4及S100β蛋白均显著升高,说明造模成功。与模型组相比,中药中、高剂量组AQP-4蛋白于24 h或72 h或7 d时分别出现显着下降(P<0.05),研究结果并无明显集中现象,但整体趋势表明中药中、高剂量组能明显减少AQP-4的表达;rt-PA组、中药低、中、高剂量组S100β虽未出现明显差异,但均有不同程度降低,且以中药组下降趋势明显。结论:①溶栓治疗后,血脑屏障结构及功能损害于24 h时最为严重;②化痰通络方联合rt-PA溶栓可降低不同脑组织中AQP-4表达及血清中S100β含量进而防治急性脑梗死溶栓后出血转化的发生与发展。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
脑区特异性表达论文参考文献
[1].汪孟航.狂犬病病毒G蛋白的克隆表达及其V区特异性单克隆抗体的制备与鉴定[D].中国农业科学院.2017
[2].周震,王凯,刘爽,宋宛珊,马妍.化痰通络方对急性脑梗死大鼠rt-PA溶栓后不同脑区星形胶质细胞特异性蛋白表达的影响[J].中国实验方剂学杂志.2014
[3].李林林.XFM及其特异性颉颃剂对大鼠脑区NMDAR1、BDZR表达的影响[D].东北农业大学.2013
[4].王菲菲,赵益明,江淼,姚拾秀,李雪美.抗VWF-A3区特异性单抗SZ-123单链抗体的构建和表达[J].苏州大学学报(医学版).2011
[5].王菲菲,赵益明,江淼,阮长耿.抗vWF-A3区特异性单抗SZ-123单链抗体的构建和表达[C].中华医学会血液学分会第十叁届全国血栓与止血学术会议暨“血栓栓塞性疾病（血栓与止血）基础与临床研究进展”论文摘要汇编及学习班讲义.2011
[6].章蓉.脑区特异性表达rtTA转基因鼠的构建及初步应用[D].扬州大学.2006
[7].刘志英,魏红山,董庆鸣,刘顺爱,郭晶晶.X／C区特异性siRNA对HBV抗原体外表达的影响[C].第五届全国肝脏疾病临床暨中华肝脏病杂志成立十周年学术会议论文汇编.2006
[8].陈琅,邹漳钰,陈新,林立芳,沈晓丽.戊四氮致癎大鼠不同脑区神经元特异性烯醇酶的表达及意义[J].实用儿科临床杂志.2005