人胎盘来源的造血干细胞和间充质干细胞的分离及鉴定

人胎盘来源的造血干细胞和间充质干细胞的分离及鉴定

论文摘要

目的建立人胎盘来源的造血干细胞(placenta hematopoietic stem cells,hP-HSCs)和间充质干细胞(placentaderived mesenchymal stem cells,hP-MSCs)的分离方法,并进行鉴定和组分分析。方法选取10份新生健康婴儿胎盘组织,采用机械破碎法联合磁珠分选法分离h P-HSCs,胎盘绒毛膜组织块贴壁法分离hP-MSCs,利用形态学观察、集落培养、流式细胞术等进行鉴定。结果 hP-HSCs:分离后有核细胞数(total nucleated cell number,TNC)为(11. 82±2. 46)×108个,TNC回收率≥80%;细胞活性为(99. 7±0. 3)%;细胞表面抗体CD34+CD45dim表达率为(8. 69±0. 36)%,CD34+总数为(108. 0±6. 48)×106个;集落形成总数为(1. 88±1. 07)×106。hP-MSCs:冻存细胞总数为(40. 78±9. 35)×107个;细胞活性为(99. 0±1. 5)%;细胞表面抗体CD34+CD45+表达率为(0. 1±0. 1)%,CD44+CD105+为(99. 6±0. 2)%,CD14+CD19+为(0. 1±0. 1)%,CD90+CD73+为(98. 9±0. 2)%;且具有良好成脂、成骨分化潜能。结论成功建立了hP-HSCs和hP-MSCs体外分离培养方法,为胎盘的临床应用奠定了基础,并提供了细胞种子资源。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 胎盘组织
  •   1.2 主要试剂及仪器
  •   1.3 h P-HSCs的分离
  •     1.3.1 机械破碎法
  •     1.3.2 磁珠分选
  •   1.4 h P-MSCs的分离制备
  •   1.5 h P-HSCs的集落培养
  •   1.6 h P-MSCs的传代培养
  •   1.7 细胞表面抗体的检测
  •     1.7.1 分选后的CD34+细胞的流式检测
  •     1.7.2 hP-MSCs的流式检测
  •   1.8 h P-MSCs成脂、成骨诱导分化
  • 2 结果
  •   2.1 h P-HSCs的分离
  •   2.2 h P-MSCs的分离
  •   2.3 h P-HSCs的集落培养
  •   2.4 磁珠分选后CD34+细胞和h P-MSCs的流式细胞术检测结果
  •   2.5 h P-MSCs的成脂、成骨诱导分化
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 李欣,赵中利,罗晓彤,李珈莹,曹阳,于永生

    关键词: 胎盘,造血干细胞,间充质干细胞,组织块法,磁珠分选

    来源: 中国生物制品学杂志 2019年01期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学,基础医学

    单位: 吉林省农业科学院畜牧科学分院

    分类号: R329.2

    DOI: 10.13200/j.cnki.cjb.002450

    页码: 95-99+105

    总页数: 6

    文件大小: 401K

    下载量: 413

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