小清蛋白论文-邵虎明,肖有明,谢彦海,华希玮,陈红兵

小清蛋白论文-邵虎明,肖有明,谢彦海,华希玮,陈红兵

导读:本文包含了小清蛋白论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:小清蛋白,抗原性,多克隆抗体,免疫交叉反应

小清蛋白论文文献综述

邵虎明,肖有明,谢彦海,华希玮,陈红兵[1](2019)在《鲤鱼小清蛋白多克隆抗体的制备及免疫交叉反应的研究》一文中研究指出小清蛋白是鱼类的主要过敏原,对小清蛋白的抗原性研究将有助于进一步深入理解淡水鱼过敏原在致敏过程中的免疫学意义。以鲤鱼为原材料,首先纯化出鲤鱼小清蛋白,再制备兔抗鲤鱼小清蛋白多克隆抗体,采用间接ELISA法测定抗体效价和抑制性ELISA法测定其特异性,然后采用免疫印迹法及抑制性ELISA法研究鲤鱼与青鱼、草鱼、鲢鱼之间的免疫交叉反应。结果表明,实验兔对鲤鱼类小清蛋白发生了高强度的免疫应答,应答多克隆抗体效价可高达720000,并且4种鱼类小清蛋白在12 ku处发生了强烈的免疫交叉反应。(本文来源于《食品科技》期刊2019年07期)

徐漫,李玥豪,包承仪,李英,张励才[2](2019)在《小清蛋白阳性神经元参与疼痛调控及其机制》一文中研究指出小清蛋白(parvalbumin, PV)阳性神经元是γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid, GABA)能抑制性中间神经元亚群中的一种,其广泛分布于脊椎动物的外周和中枢神经系统中。以往研究证实PV阳性神经元与精神分裂、癫痫、抑郁、吗啡依赖与戒断、共济失调等密切相关,新近研究表明,外周及中枢神经系统中的PV阳性神经元在疼痛的发生发展及调节过程中均发挥着不可忽视的作用,对PV阳性神经元的活性加以调控有望成为临床疼痛治疗的一个新思路。本文就PV阳性神经元的生物学特性、在外周和中枢神经系统水平参与疼痛调控的研究证据及其参与疼痛调控的可能机制作一综述,以期为关注它的研究者提供参考。(本文来源于《中国疼痛医学杂志》期刊2019年06期)

王佳,李姣,王誉颖,李佳乾,马云飞[3](2019)在《益母草碱对脑缺血大鼠海马小清蛋白表达的影响》一文中研究指出目的:研究脑缺血对大鼠海马部位小清蛋白(PV)表达的影响和益母草碱(Leo)的干预效果。方法:选取30只SD雄性大鼠随机分为假手术组、脑缺血模型组、Leo低、中、高剂量组,通过结扎双侧颈总动脉(30min)建立急性脑缺血模型,腹腔注射不同剂量Leo,1次/d,术前连续给药3 d。采用旷场试验和免疫组织化学染色方法,探究脑缺血及Leo预处理干预对大鼠的行为学变化以及大鼠脑内海马区PV表达的影响。结果:与假手术组比较,缺血组大鼠旷场试验分数显着降低(P <0. 05)、海马各区的PV阳性细胞数显着减少(P <0. 01),Leo组大鼠旷场试验分数升高,其中高剂量组最明显(P <0. 05); PV阳性细胞数增加,其中高剂量组最明显(P <0. 01)。结论:短暂性脑缺血会影响大鼠的行为学并导致海马PV阳性神经元数量急剧减少,Leo对缺血大鼠的行为有积极作用,并有效改善缺血大鼠海马PV阳性神经元的损伤。(本文来源于《神经解剖学杂志》期刊2019年03期)

范艳乐,陈炯,黄映雪,李国红,马菊红[4](2019)在《成年摇晃小鼠海马组织中小清蛋白的表达》一文中研究指出为探讨小清蛋白(PV)在成年摇晃小鼠海马中的表达情况,用免疫荧光组织化学法对野生型小鼠(R~(+/+))、杂合子摇晃小鼠(R~(+/-))、纯合子摇晃小鼠(R~(-/-))海马CA1区、CA3区、齿状回中PV的分布和表达进行研究。结果表明,PV在摇晃小鼠海马CA1区、CA3区和齿状回中均有分布,主要表达于CA1区和CA3区的锥体细胞层及齿状回的颗粒细胞层。与野生型相比,杂合子摇晃小鼠CA1区PV阳性细胞数显着降低(P<0.01),而纯合子摇晃小鼠增加;CA3区和齿状回中的PV阳性细胞数均降低,但纯合子摇晃小鼠高于杂合子摇晃小鼠。提示摇晃蛋白(Reelin)影响PV的表达,且PV的表达异常可能与摇晃小鼠的表现型有关。(本文来源于《动物医学进展》期刊2019年05期)

李梦银[5](2019)在《鱼类主要过敏原小清蛋白金磁免疫层析试纸条的研制》一文中研究指出鱼类是人类重要的食物来源,不仅味道鲜美而且营养丰富。新鲜鱼肉中富含15%~20%的全价蛋白,1%~10%的脂肪,并富含重要的不饱和脂肪酸。我国是水产养殖大国,占世界养殖水产品产量的70%以上,淡水渔业总面积达1760万公顷占国土面积的1.8%。鱼类及其制品含有丰富的营养,同时也是FAO及WHO认定的导致人类过敏的八大类食物之一。其中鱼肉中的小清蛋白(parvalbumin,PV)被视为主要的过敏原,因此开展针对鱼类及其制品中小清蛋白强特异性、高灵敏度的检测具有重要的理论和现实意义。本文研究主要包括小清蛋白单克隆抗体的制备及鉴定、金磁复合纳米微粒的制备以及小清蛋白金磁免疫层析检测方法的建立。具体研究内容如下:1.小清蛋白单克隆抗体的制备以高纯度的PV免疫7只BALB/c小鼠,利用间接ELISA方法测小鼠抗血清效价,获取效价最高的小鼠。取免疫小鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,获得杂交瘤细胞。间接ELISA方法筛选阳性孔,有限稀释法进行3次亚克隆得到分泌同质的杂交瘤细胞株。采用小鼠体内诱生腹水法大量制备单抗。采用辛酸-硫酸铵沉淀法纯化单抗腹水,SDS-PAGE凝胶电泳鉴定单克隆抗体纯度,并采用Western-blotting、考马斯亮蓝染色法分别检测单抗特异性及抗体浓度,结果显示PV单克隆抗体具备良好的特异性,最后通过商业化试剂盒检测PV单抗亚类为IgG1型。2.小清蛋白金磁免疫层析试纸条的定性检测采用一锅法制备氨基化的磁性微粒Fe_3O_4-PEI,之后在其表面包覆两层Au颗粒,制备金磁(Fe_3O_4/Au)复合微粒,金磁复合微粒形貌呈圆形,粒径均一,粒径约80nm。金磁复合微粒与小清蛋白单克隆抗体进行偶联,制备金磁免疫探针,并优化了金磁探针的偶联的最佳pH值、抗体用量、反应时间、缓冲液体系等条件。按照试纸条组装方式组装得到小清蛋白金磁探针免疫层析试纸条,并探究样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜的材料选择、处理液最佳配方及最佳处理条件、T/C线最佳划线浓度等试纸条组装条件优化。并进行标准品的检测,结果表明所制备的金磁免疫层析试纸条具有良好的定性功能,可视化检测最低检测浓度为4ng/ml,检测特异性及检测稳定性良好。3.小清蛋白金磁免疫层析试纸条定量检测通过建立T/C比值的定量方法提高金磁金免疫层析试纸条的检测灵敏度;同时结合现实工作的实际情况,从操作简便性、前处理的时间消耗以及回收率等角度比较了7种鱼肉样品前处理方法优缺点。在此基础上建立了金磁免疫层析试纸条T/C比值法定量分析鱼肉中小清蛋白的快速检测方法。(本文来源于《上海师范大学》期刊2019-03-01)

葛敏敏,王建华,林洪[6](2019)在《液相色谱串联质谱检测牙鲆鱼中的小清蛋白过敏原》一文中研究指出以合成肽段ALTDAETK为定量特征肽段,SDFIEEDELK及LFLQNFAFSASAR为定性肽段,建立牙鲆中小清蛋白高效液相色谱-串联质谱的检测方法。同时对蛋白提取液、碘代乙酰胺浓度、酶/蛋白质比例、酶解时间在内的前处理条件和肽段质谱参数条件进行了优化。结果显示,ALTDAETK肽段在0. 005~10 mg/L线性关系良好(R2> 0. 999),小清蛋白定量限2. 74 mg/kg;以大菱鲆为空白基质,重组小清蛋白的平均回收率为95%~102%,相对标准偏差(RSD)小于7%,重复性好。该文首次实现了用HPLC-MS/MS方法精确定量检测牙鲆中主要过敏原PV。(本文来源于《食品与发酵工业》期刊2019年08期)

孙礼瑞,罗晨,李振兴[7](2018)在《高效液相色谱串联质谱技术检测食品中鱼类小清蛋白》一文中研究指出目的:建立一种简单、灵敏、准确的高效液相色谱串联质谱方法,对鱼类过敏原小清蛋白进行定量检测。方法:小清蛋白经Tris溶液提取,加热处理去除杂蛋白,胰蛋白酶酶解,以合成特征肽段为标准品,高效液相色谱串联质谱检测。结果:该方法根据ICH(Q2[R1])规定的方法学参数进行验证,小清蛋白在0.10~1 179.36 nmol/L浓度范围内,色谱峰面积与浓度呈线性相关(r>0.999);β-小清蛋白在牙鲆肉中定量限为0.10μg/g;相对标准偏差均低于18.35%。结论:该方法前处理简单、灵敏、准确,完全能够满足鱼肉中小清蛋白的定量检测要求,并能成功应用于混合食品基质中鱼肉小清蛋白的检测。(本文来源于《中国食品科学技术学会第十五届年会论文摘要集》期刊2018-11-07)

罗晨,孙礼瑞,李振兴[8](2018)在《脂质对大菱鲆小清蛋白过敏原模拟消化的影响》一文中研究指出目的:探究脂质对大菱鲆主要过敏原小清蛋白在模拟胃肠液作用下结构和IgG/IgE结合能力的影响。方法:采用正十六烷为模拟脂质,通过电泳和酶解效率研究小清蛋白在乳化状态下模拟胃肠液消化的特性,利用免疫印迹、间接ELISA等分析消化产物IgG/IgE结合能力的影响。结果:小清蛋白模拟胃消化5 min时大亚基被明显消化,同时6.5 ku有新消化片段生成,消化15,180 min时,小亚基、大亚基分别被消化完全,同时免疫印迹显示失去IgG/IgE结合能力;乳化小清蛋白模拟胃消化180 min时未被明显消化,免疫印迹显示小清蛋白大小亚基仍具有强IgG/IgE结合能力。小清蛋白、乳化小清蛋白模拟肠消化对比无明显差异,消化15 min时大亚基被明显消化,同时6.5,3.3 ku有新消化片段生成,消化180 min时,小亚基仍未被明显消化,免疫印迹显示其仍具有强IgG结合能力。模拟胃消化180 min和模拟肠消化180 min后,模拟脂质降低胃、肠对小清蛋白酶解效率50.03%,9.97%。模拟胃消化180 min,模拟肠消化180 min分别降低小清蛋白IgG结合活性19.80%,22.83%。模拟消化过程中,分别在模拟胃消化60 min和模拟肠消化90 min,模拟脂质最大可提高小清蛋白消化产物IgG结合能力4.20%,10.66%。讨论:胃肠消化可降低但不可消除小清蛋白IgG/IgE结合活性。脂质可显着降低胃、肠消化小清蛋白酶解效率,提高消化产物IgG/IgE结合活性,进而产生更高过敏风险。(本文来源于《中国食品科学技术学会第十五届年会论文摘要集》期刊2018-11-07)

孙礼瑞,林洪,李振兴,赵金霞,林航[9](2019)在《牙鲆(Paralichthys olivaceus)中不同亚型小清蛋白的提纯与鉴定》一文中研究指出以牙鲆(Paralichthys olivaceus)为研究对象,以Tris、甘氨酸和二硫苏糖醇的混合溶液为提取液,加入不同量的硫酸铵分级纯化小清蛋白,应用免疫印迹法、酶联免疫法及质谱法进行鉴定。最终提纯得到3种不同分子质量的蛋白(PVⅠ、PVⅡ和PVⅢ),所得蛋白纯度大于90%,血清学实验证明其与小清蛋白特异性IgG及IgE抗体均有结合能力,质谱鉴定得到PVII和PVIII分子质量分别为12 151 Da和11 645 Da,pI值分别为5.14和4.69。该方法满足牙鲆小清蛋白提取纯化要求,得到的3种蛋白是牙鲆小清蛋白的不同亚型,且均具有过敏原性。(本文来源于《食品科学》期刊2019年12期)

耿飞,陈远寿,罗芸,田丹,卢癸凤[10](2018)在《内侧前额叶的小清蛋白神经元调控抑郁样行为》一文中研究指出目的探讨前额叶小清蛋白神经元对抑郁样行为的影响。方法应用病毒注射,在小鼠内侧前额叶小清蛋白神经元上表达光敏感通道(ChR2)。免疫荧光和离体脑片电生理实验检测病毒的表达和光敏感通道在小清蛋白神经元的特异性表达。在体调控内侧额叶的小清蛋白神经元后,通过悬尾实验和糖水偏好实验来检测抑郁样的行为。旷场试验用来检测小鼠的运动能力。结果病毒可以在内侧前额叶小清蛋白神经元上特异性地表达。离体激活表达光敏感通道的神经元可以诱导出电流及电位。在体特异性地激活内侧前额叶小清蛋白神经元可快速诱导小鼠抗抑郁样的行为。小鼠悬尾实验中挣扎的时间增加(F=12.98,P=0.002 6),糖水偏好增加(F=5.35,P=0.039),而小鼠的运动能力并没有变化(F=1.67,P=0.33)。结论前额叶小清蛋白神经元发挥着抗抑郁样的效应,加深了对抑郁样行为的细胞机制的认识,有助于理解情感紊乱的病理学机制,并为功能性干预提供一个可能的新靶点。(本文来源于《实用医学杂志》期刊2018年16期)

小清蛋白论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

小清蛋白(parvalbumin, PV)阳性神经元是γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid, GABA)能抑制性中间神经元亚群中的一种,其广泛分布于脊椎动物的外周和中枢神经系统中。以往研究证实PV阳性神经元与精神分裂、癫痫、抑郁、吗啡依赖与戒断、共济失调等密切相关,新近研究表明,外周及中枢神经系统中的PV阳性神经元在疼痛的发生发展及调节过程中均发挥着不可忽视的作用,对PV阳性神经元的活性加以调控有望成为临床疼痛治疗的一个新思路。本文就PV阳性神经元的生物学特性、在外周和中枢神经系统水平参与疼痛调控的研究证据及其参与疼痛调控的可能机制作一综述,以期为关注它的研究者提供参考。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

小清蛋白论文参考文献

[1].邵虎明,肖有明,谢彦海,华希玮,陈红兵.鲤鱼小清蛋白多克隆抗体的制备及免疫交叉反应的研究[J].食品科技.2019

[2].徐漫,李玥豪,包承仪,李英,张励才.小清蛋白阳性神经元参与疼痛调控及其机制[J].中国疼痛医学杂志.2019

[3].王佳,李姣,王誉颖,李佳乾,马云飞.益母草碱对脑缺血大鼠海马小清蛋白表达的影响[J].神经解剖学杂志.2019

[4].范艳乐,陈炯,黄映雪,李国红,马菊红.成年摇晃小鼠海马组织中小清蛋白的表达[J].动物医学进展.2019

[5].李梦银.鱼类主要过敏原小清蛋白金磁免疫层析试纸条的研制[D].上海师范大学.2019

[6].葛敏敏,王建华,林洪.液相色谱串联质谱检测牙鲆鱼中的小清蛋白过敏原[J].食品与发酵工业.2019

[7].孙礼瑞,罗晨,李振兴.高效液相色谱串联质谱技术检测食品中鱼类小清蛋白[C].中国食品科学技术学会第十五届年会论文摘要集.2018

[8].罗晨,孙礼瑞,李振兴.脂质对大菱鲆小清蛋白过敏原模拟消化的影响[C].中国食品科学技术学会第十五届年会论文摘要集.2018

[9].孙礼瑞,林洪,李振兴,赵金霞,林航.牙鲆(Paralichthysolivaceus)中不同亚型小清蛋白的提纯与鉴定[J].食品科学.2019

[10].耿飞,陈远寿,罗芸,田丹,卢癸凤.内侧前额叶的小清蛋白神经元调控抑郁样行为[J].实用医学杂志.2018

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