李林鹏王凯（河南省许昌市人民医院普外科461000）
【中图分类号】R575【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2011）24-0045-02
【摘要】本文通过研究水飞蓟宾-磷脂酰胆碱复合物（SPC）对D-半乳糖胺（D-galN）和脂多糖(LPS)与卡介苗(BCG)诱导的小鼠肝损伤实验的影响，得出结论：SPC对D-galN和LPS+BCG诱导的肝损伤具有明显的保护作用。
【关键词】水飞蓟宾-磷脂酰胆碱复合物D-半乳糖胺脂多糖卡介苗肝损伤
本实验主要探索SPC对D-半乳糖胺所致小鼠肝损伤和脂多糖与卡介苗诱导的小鼠免疫性肝损伤的影响进行实验研究。
1材料与方法
1.1材料健康昆明种小白鼠，体重（22±2）g，雄性，100只，水飞蓟宾-磷脂酰胆碱复合物（SPC），由本研究者自行制备(含SPC98.5%)；联苯双酯滴丸；氨基半乳糖胺（D-galN）；卡介苗(BCG)；脂多糖(LPS)。美国DATEBEHRINGRXL全自动生化分析仪；TGL-16G离心机，上海安亭科学仪器厂。
1.2方法
1.2.1动物分组将100只小鼠随机分成10组，每组10只，分别用于SPC对D-galN诱导的肝损伤影响实验和BCG+LPS诱导的小鼠免疫性肝损伤的影响实验。
1.2.2SPC对D-galN所致肝损伤的影响实验取随机分组的5组小白鼠：即正常对照组、D-galN损伤组、助溶剂对照组、阳性药物对照组和SPC组。SPC组小鼠ivgtt200mg/kgSPC,阳性药物组ivgtt联苯双酯200mg/kg，正常对照组和D-galN损伤组ivgtt同剂量生理盐水；助溶剂对照组igivgtt同剂量1%羧甲基纤维素钠，连续7d；7ｄ后除正常对照组外，各组小鼠均ip75%D-galN溶液750mg/kg，24h后摘眼球取血，5000r/min离心8min，分离血清测血清ALT、AST，同时颈椎脱臼处死小鼠取肝脏，加9倍生理盐水制备匀浆，离心后取上清液测TG，并对肝组织常规取材，10%福尔马林液固定，HE染色，光镜观察。
1.2.3SPC对BCG+LPS诱导的免疫性肝损伤的影响实验取随机分组的5组小白鼠，即正常对照组、BCG+LPS肝损伤组、助溶剂对照组、阳性药物组和SPC组。给药前，除正常对照组外，每鼠均尾静脉iv0.25%BCG25mg，7d后：SPC组小鼠ig200mg/kgSPC,阳性药物组ig联苯双酯200mg/kg；正常对照组和BCG+LPS组ig同剂量生理盐水；助溶剂对照组ig同体积1%羧甲基纤维素钠。连续给药7d后（即注射BCG后14d），除正常对照组外，每鼠再尾静脉ivLPS25ug，6h后摘眼球取血，5000r/min离心8min，分离血清后测ALT、AST，同时颈椎脱臼处死小鼠取肝脏，加9倍生理盐水制备匀浆，离心后取上清液测TG，肝大叶用福尔马林固定，制备组织切片，HE染色，光镜观察。
1.3统计学处理采用SPSS11.5统计学软件进行分析，实验数据以x±s表示，采用单因素方差分析，组间比较采用t检验，以P<0.05为有统计学意义。
2结果
2.1SPC对D-galN诱导的小鼠肝损伤的影响D-galN致小鼠肝损伤后，小鼠血清中ALT、AST活性和肝组织中TG含量明显高于正常对照组水平。而SPC不同程度地使升高的血清AST、ALT酶活性和肝组织TG含量显著降低。阳性对照药联苯双酯亦可明显降低血清AST、ALT酶活性和肝脏TG含量。助溶剂对照组对D-galN肝损伤无抵抗作用。
2.2SPC对BCG+LPS诱导的小鼠肝损伤的影响实验BCG联合LPS诱发小鼠肝损伤6h后，小鼠血清ALT、AST活性和肝脏TG含量显著高于正常对照组，而SPC使升高的血清AST、ALT和肝脏TG明显降低，阳性对照药联苯双酯亦能显著拮抗免疫性肝损伤所致的血清AST、ALT和肝脏TG的升高。
2.3病理学检查病理学观察显示：正常对照组大鼠肝细胞索呈放射状排列，肝小叶结构清晰，汇管区无炎细胞浸润。D-galN诱导的小鼠肝损伤、BCG+LPS诱导的小鼠肝损伤模型组小鼠均可见肝素排列紊乱，小叶轮廓不清；有明显的肝细胞坏死，坏死灶大小、数目不等，严重的呈片状坏死，坏死区域大部分为增生的纤维组织代替；肝细胞变性明显，可见肝细胞浊肿、气球样变等；汇管区可见大量以淋巴细胞为主的炎细胞浸润。SPC可不同程度减轻2种肝损伤程度，主要表现为肝索呈索状排列，小叶轮廓变清晰，坏死灶数目和坏死面积都减少，炎细胞浸润减少。
3讨论
本文选择了2种不同机制引起的实验性动物肝损伤模型研究SPC的保肝作用。其中D-galN肝损伤模型的组织学病理改变与人类病毒性肝炎的病理改变较为接近；BCG+LPS诱导的肝损伤机制类似人类病毒性肝炎的免疫性肝损伤。此2种模型均可造成实验动物血清AST、ALT和肝脏TG的升高及肝脏组织结构的病理改变，且可逆性和重复性较好，因此本实验用此2种肝损伤动物模型，以血清AST、ALT和肝脏TG的改变为检测指标，辅以肝脏的病理组织学检查以反映实验动物的肝损伤程度和SPC的保肝作用。
参考文献
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