导读:本文包含了基因截短突变论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:突变,基因,病毒,乙型肝炎,载体,毒蛾,蛋白。
基因截短突变论文文献综述
田丽春,朱情情,刘艾洁,王青青,黄光瑞[1]（2019）在《携带小鼠白介素-4截短型突变体基因的5型腺相关病毒载体的构建及外源蛋白的体外表达》一文中研究指出目的:制备携带碳端结构域缺失的小鼠白介素-4(Interleukin-4,IL-4)基因突变体的5型重组腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus, r AAV)并在细胞水平检测其介导的外源蛋白表达情况。方法:通过分子克隆技术构建携带小鼠IL-4碳端22个氨基酸缺失的突变体的表达质粒pSNAV-mIL-4ΔC22,叁质粒共转染法制备重组的5型AAV病毒,体外感染人支气管上皮样细胞系16HBE和BEAS-2B,并通过Western blot和ELISA检测外源蛋白表达。结果:DNA测序表明构建的小鼠IL-4碳端第118位氨基酸位点处截短的突变体基因表达序列正确无误,制备的重组病毒载体r AAV5-mIL-4ΔC22滴度约为3×10~(11)vg/m L。r AAV5-GFP感染16HBE和BEAS-2B细胞后36小时开始可见持续稳定的荧光蛋白表达,重组病毒r AAV5-mIL-4ΔC22感染16HBE和BEAS-2B细胞后外源蛋白在培养上清中呈分泌型表达。结论:本研究成功构建了携带小鼠IL-4碳端结构域缺失型突变体的AAV表达质粒并制备了重组病毒r AAV5-mIL-4ΔC22,该病毒可有效转染16HBE和BEAS-2B细胞并介导外源基因分泌表达截短型小鼠IL-4突变体蛋白。(本文来源于《现代生物医学进展》期刊2019年02期）
李静,纳丽莎,刘丽文,左蕾,齐伟[2]（2016）在《叁维斑点追踪技术评价MYBPC3致截短蛋白基因突变所致肥厚型心肌病患者左室收缩功能及不同步性》一文中研究指出目的:应用叁维斑点追踪(3D-STI)技术评价MYBPC3致截短蛋白基因突变所致肥厚型心肌病(HCM)患者左室收缩功能的早期改变及心肌收缩的不同步性。方法利用靶向外显子捕获测序的方法对113例HCM患者的96个与遗传性心肌病相关的基因进行了全部外显子的扩增和高通量测序。对筛查发现的9例携带MYBPC3致截短蛋白基因突变的患者进行研究,同时选取健康人9例作为对照组。运用Tom-Tec software脱机分析软件获取应变参数,旋转、扭转参数及不同步性参数。比较两组上述叁维参数间的差异。同时,根据超声结果将携带MYBPC3致截短蛋白基因突变的患者的左室心肌厚度分为≥15mm节段组和<15mm节段组,比较二组间节段圆周应变、纵向应变、径向应变(CSt、LSt、RSt)的差异。结果:9例患者携带7种MYBPC3基因致截短蛋白突变,4种为缺失突变,3种为无义突变。与对照组比较,MYBPC3致截短蛋白基因突变组左心室质量指数(LVMI),左房容积指数(LVAI)均显着增加,Ea及Aa值显着减小(p<0.05),余超声参数及临床基础资料在两组间无显着统计学差异。3D-STI参数为与对照组比较,MYBPC3致截短蛋白基因突变组整体纵向应变及整体径向应变明显减低,经心动周期RR间期标化后的左心室16节段心内膜圆周、径向及纵向应变达峰时间标准差(TCS-SD%、TLS-SD%、TRS-SD%)及任意两节段环形、纵向、径向应变达峰时间最大差值(TCS-diff%、TLS-diff%、TRS-diff%)均明显延长(p<0.05);与<15mm节段组比较,心肌厚度为耋15mm节段组节段纵向应变(LSt)明显减低(P<0.05)。其余各叁维参数均无统计学差异。结论:3D-STI技术能敏感的发现MYBPC3基因致截短蛋白基因突变所致HCM患者左室收缩功能早期受到损害及心肌收缩存在明显不同步,为临床开展HCM的早期诊断、危险分层及治疗评估提供参考依据。(本文来源于《中国超声医学工程学会第十叁届全国超声心动图学术会议论文汇编》期刊2016-11-18）
糜艳霞[3]（2015）在《舞毒蛾Ⅰ型几丁质酶基因催化区截短和定点突变的研究》一文中研究指出舞毒蛾遍及世界各地,对林业造成了极其严重的威胁。对舞毒蛾的防治可以从多个方向着手,目前大致包括性信息素诱导等生物方向防治,还有人工收集虫卵等人工防治以及最为传统的农药喷洒等的化学治理。在近几年里,利用生物方法对舞毒蛾进行防治越来越受到人们的关注。在舞毒蛾的表皮以及中肠围食膜中都存在大量的几丁质,它是一种由β-1,4糖苷键连接多个N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)形成的线性多糖,在昆虫的生长和发育过程中,几丁质周期性的产生和降解对其生长发育起着关键性的作用。几丁质酶可以降解几丁质,生物防治就是利用这一机制,本课题通过对舞毒蛾几丁质酶基因催化区的截短和定点突变做相关研究,深入分析几丁质酶催化其底物几丁质降解的催化机制,为更加深入的利用其高效的杀虫提供相应的理论方面支持。本研究首先将舞毒蛾I型几丁质酶基因(LdCHT5)利用PCR技术进行催化区截短和定点突变,得到四种催化区截短基因分别为LdCHT5-N20, LdCHT5-N60, LdCHT5-C20, LdCHT5-C60,以及六种催化区定点突变基因,LdCHT5-D143A, LdCHT5-D143E, LdCHT5-D143N, LdCHT5-D145A, LdCHT5-D145E, LdCHT5-D145N。并将这些基因都连接到一个用于真核表达的载体中,再利用Bac to Bac表达系统,获得含各目的基因的相应穿梭载体Bacmid-LdCHT5-N20,Bacmid-LdCHT5-N60,Bacmid-LdCHT5-N20, Bacmid-LdCHT5-N60,Bacmid-LdCHT5-D143A,Bacmid-LdCHT5-D143E,Bacmid-LdCHT5-D143N, Bacmid-LdCHT5-D145A, Bacmid-LdCHT5-D145E, Bacmid-LdCHT5-D145N),利用转染试剂cellfectin reagent将其转染到草地贪夜蛾细胞Sf9中,进而表达目的蛋白。两类蛋白的纯化方式都是通过将粗蛋白过Ni-NTA镍柱做相应的纯化,经除杂纯化以后的各蛋白可以为下一步更深层次的研究相应的酶学性质提供基础。对蛋白酶学活性的研究利用CM-chitin-RBV为底物,研究表明,催化区截短的四种蛋白均没有酶活,不利于后续实验。而定点突变后的催化区相关实验结果显示：在六个突变体中,D143N具有较高的活性,D143E次之,分别保留了野生型酶活的84%,65%。D145E, D145N丧失了一半以上的酶活,而D143A, D145A相对于野生型几丁质酶来说几乎失去90%以上的酶活。(本文来源于《太原理工大学》期刊2015-05-01）
唐红,陈兰兰,陈恩强,刘翠平,白浪[4]（2014）在《乙型肝炎病毒逆转录酶区A181T和M204I基因耐药突变所致其S区包膜蛋白羧基端发生的截短和替换突变株生物学特性研究》一文中研究指出目的乙型肝炎病毒rtA181T/sW172*突变株所致HBsAg截短突变可引起HBsAg分泌受损,同时增加肝细胞内HBV的转录与复制水平。而对于处于同一位点的HBV rtA181T替换突变株及其与截短突变株生物学特性的差异的研究尚不清楚。本研究旨在观察和比较HBV rtA181T/rtM204I突变导致的同一位点,不同形式的HBsAg截短突变和替换突变生物学特性的差异;同时了解HBV rtA181T和rtM204I两(本文来源于《中华医学会第十叁次全国感染病学术会议论文汇编》期刊2014-06-13）
曾敏怡[5]（2014）在《SCN1A基因截短突变患者的临床分析及截短突变诱导的NMD机制研究》一文中研究指出【研究目的】本研究选取Dravet综合征（DS）患者SCN1A基因不同位置的截短突变位点，分析相应患者的临床特点，通过构建相关minigene，进行无意义密码子介导的mRNA降解(NMD)机制研究，以探讨在SCN1A基因上不同位置的截短突变能否激发NMD机制，以及研究NMD与临床表型的关系。【研究方法】通过详细收集携带SCN1A基因截短突变的Dravet综合征（DS）患者的临床资料及突变特点，构建融合表达绿色荧光蛋白（GFP）和SCN1A基因截短突变的minigene。通过鉴定不同细胞系内源性抗性基因Kana基因的表达，从而选取无Kana基因表达的人宫颈癌细胞（Hela细胞）、人类神经母细胞瘤株细胞（SH-SY5Y细胞）、NGF诱导的褐家鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞（NGF诱导的PC12细胞）作为转染对象，通过脂质体法转染技术，将野生型质粒及截短突变质粒分别转染入上述叁种细胞，提取总RNA，经反转录得cDNA，以cDNA为模板，Kana基因及GAPDH基因为内参，进行荧光定量PCR（QPCR）。比较SCN1A基因的野生型及截短突变型质粒在叁种细胞中的mRNA相对表达量，每组实验重复叁次获得均值。相对定量数据处理采用2-△△Ct法，计量资料以均数±标准差(X±S)表示，采用SPSS l7.0软件包进行统计分析，单因素多样本均数比较采用ANOVA分析，P＜0.05为差异具有统计学意义。【结果】1．临床资料分析携带c.4526delA，c.4547C>A，c.5280_5281delTG， c.5621_5622delGG截短突变位点的患者均诊断为SMEI，携带c.5540-5541insCCAG突变位点的患者诊断为SMEB，无肌阵挛发作类型，其中携带c.5540-5541insCCAG，c.5621_5622delGG的患者符合孤独症诊断，c.5540-5541insCCAG患者孤独症儿童行为量表(简称ABC量表)78分，儿童孤独症评定量表（简称CARS量表）36分，c.5621_5622delGG患者ABC量表110分，CARS量表41分。2．PEGFP-C2-SCN1A–minigene野生型及突变型质粒构建和鉴定将表达绿色荧光蛋白及SCN1A基因24至26号外显子的DNA片段（包含25号内含子）连接到PEGFP-C2载体。PEGFP-C2-SCN1A-minigene质粒测序24至26号外显子基因编码区未发现突变，得到野生型minigene，并构建c.4526delA， c.4547C>A， c.5280_5281delTG， c.5540-5541insCCAG，c.5621_5622delGG突变型minigene。3.四种细胞系内源性Kana基因表达鉴定HEK293细胞有内源性Kana基因表达，而NGF诱导的PC12细胞,Hela细胞,SH-SY5Y细胞均无内源Kana基因表达。4.荧光定量PCR以Kana基因作为内参基因，Hela细胞中野生型与突变型c.4526delA，c.4547C>A， c.5280_5281delTG， c.5540-5541insCCAG， c.5621_5622delGGSCN1A基因mRNA相对表达量分别为1.034±0.337，0.843±0.059（p>0.05），0.898±0.063（p>0.05），1.001±0.184（p>0.05），0.804±0.149（p>0.05），0.784±0.041（p>0.05）；SH-SY5Y细胞中野生型与突变型c.4526delA，c.4547C>A，c.5280_5281delTG，c.5540-5541insCCAG，c.5621_5622delGG SCN1A基因mRNA相对表达量分别为1.001±0.073，1.046±0.045（p>0.05），1.078±0.01（p>0.05），1.057±0.037（p>0.05），1.051±0.029（p>0.05），1.204±0.088（p>0.05）；NGF诱导的PC12细胞中野生型与突变型c.4526delA，c.4547C>A，c.5280_5281delTG，c.5540-5541insCCAG， c.5621_5622delGG SCN1A基因mRNA相对表达量分别1.01±0.174，0.67±0.118（p<0.05），0.665±0.067（p<0.05），0.684±0.102（p<0.05），0.934±0.046（p>0.05），0.634±0.084（p<0.05）；以GAPDH基因为内参基因，NGF诱导的PC12细胞中野生型与突变型c.4547C>A，c.5280_5281delTG，c.5540-5541insCCAG， c.5621_5622delGG SCN1A基因mRNA相对表达量分别1.014±0.173，0.079±0.02（p<0.05），0.3±0.072（p<0.05），0.299±0.075（p<0.05），0.232±0.034（p<0.05）。【结论】1.携带SCN1A基因不同位置的截短突变患者临床症状不完全相同；2.SCN1A基因截短突变所诱发的NMD机制在不同细胞系中表现不同；3.在NGF诱导的PC12细胞中不同位置的截短突变所诱发的mRNA降解量不同，推测可能存在更复杂的机制影响SCN1A基因的表达。(本文来源于《广州医科大学》期刊2014-05-01）
张景盼[6]（2013）在《酸性α-淀粉酶基因的截短突变及性质研究》一文中研究指出酸性a-淀粉酶是目前应用和研究都很多一种酶,酸性α-淀粉酶在酸性条件下能够水解淀粉,因此在发酵、饲料、食品和生物制药等各个领域都广泛的应用。本实验室前期首先筛选得到一株酸性α-淀粉酶高产菌株B-5,其分泌的淀粉酶的最适温度为70℃,最适pH为5.0。然后克隆出酸性α-淀粉酶基因并在大肠杆菌BL21(DE3)成功表达,经分离纯化得到了AMY蛋白,其最适温度为70℃,最适pH为5.0-6.2。根据已报道的α-淀粉酶基因及对本实验中重组的a-淀粉酶基因测序分析发现,本实验中的α-淀粉酶基因包含A,B,C,D,E五个结构域,而多数α-淀粉酶只有A,B,C叁个结构域,本实验通过截短突变的方法得到突变体amy-△DE和突变体amy-△E,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中表达。经IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳表明,截短酶AMY-△DE蛋白的相对分子量为45kDa,截短酶AMY-△E蛋白的相对分子量为55 kDa.。经分离纯化得到了截短酶AMY-△DE蛋白,其最适温度为70℃,最适pH为5.0～6.2,经分离纯化得到了截短酶AMY-△E蛋白,其最适温度为70℃,最适pH为5.0～6.2。以可溶性淀粉为底物测定截短酶AMY-△DE和截短酶AMY-△E的动力学性质,Km分别为2.422mg/mL; 2.581mg/mL; Vmax分别为107.08uM/min/mg; 115.04uM/min/mg。对生淀粉的吸附性性方面AMY要比AMY-△DE和AMY-△E局,AMY-△DE和AMY-△E的吸附能力非常低,吸附性几乎没有。(本文来源于《河南农业大学》期刊2013-05-01）
丁海,李彤,庄辉[7]（2012）在《乙型肝炎病毒逆转录酶区基因耐药突变所致其表面蛋白羧基端截短性变异研究进展》一文中研究指出乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染引起的慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)仍是我国严重的公共卫生问题。近年来,核苷(酸)类似物[nucleos(t)ide analogues,NA]抗病毒治疗使HBV感染控制取得重大进展。然而,随着NA抗病毒药地广泛使用,耐药问题日趋严重,而且某些耐药突变可同时导致HBV表面蛋白(surface protein,S蛋白)发生结构上的巨大改(本文来源于《中国病毒病杂志》期刊2012年02期）
宋庆贺,陈苏民,陈南春,代忠明,侯立朝[8]（2006）在《全长人lrp基因及其截短和定点突变体真核表达载体的构建》一文中研究指出为了对脂多糖应答基因(lrp)的功能进行深入的研究,实验用PCR及双PCR法扩增出lrp基因的截短体(lrpΔC)和突变体(lrpm)序列,测序正确后将正常lrp基因及其截短体和突变体序列均连入真核表达载体pcDNA3.1(+),构建重组质粒pcDNA3.1(+)-lrp、pcDNA3.1(+)-lrpΔC和pcDNA3.1(+)-lrpm。DNA测序结果显示,PCR反应成功得到了lrp基因的截短体和突变体序列;重组质粒酶切鉴定结果显示:人lrp基因及其截短体、突变体成功连入了真核表达载体pcDNA3.1(+)。(本文来源于《科学技术与工程》期刊2006年14期）
邸雅南,胡大荣,胡学玲,吴忆贫[9]（2005）在《HBVC基因截短型突变体抗HBV作用研究》一文中研究指出目的探讨C基因截短型HBV突变体对HBV复制的影响。方法构建C基因截短的HBV表达载体pHBV-ΔC,瞬时转染HepG2细胞,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)Western blot检测S蛋白的表达;酶联免疫吸附实验(ELISA)定量分析S蛋白的表达量。pHBV-ΔC与adwR9共转染HepG2细胞,以pcDNA3与adwR9共转染为对照,荧光定量PCR检测培养上清液及胞内病毒量。结果HBV C基因截短对S蛋白的表达量没有影响,pHBV-ΔC与adwR9共转染组上清液和细胞内病毒量较对照组降低。结论C基因截短型HBV突变体可导致HBV复制下降。(本文来源于《中华传染病杂志》期刊2005年05期）
刘晓蓉,单祥年,FriedlW,UhlhaasS,李金田[10]（2005）在《应用蛋白截短技术检测APC基因胚系突变》一文中研究指出建立蛋白截短检测技术,分析家族性腺瘤样息肉病(FAP)发病相关基因APC基因的胚系突变,研究基因突变型与FAP疾病表型的关系。经临床诊断的22例FAP患者及43例散发性大肠癌患者,分别取外周静脉血和正常结肠粘膜组织,常规提取基因组DNA。应用蛋白截短检测技术,分段分析APC基因巨大的第15外显子,对检出截短蛋白的样本进行测序,以确定突变位点及突变性质。22例FAP患者中,5例患者存在APC基因第15外显子的胚系突变,均为碱基缺失造成的移码突变,导致截短蛋白的产生;43例散发性大肠癌患者中未检测到APC基因第15外显子的胚系突变。蛋白截短检测技术是一种高效的基因突变分析技术,适用于大片段基因(如APC基因第15外显子)截短型突变的检测,可作为FAP症状出现前的常规基因诊断技术的一项有效补充。(本文来源于《遗传学报》期刊2005年09期）
基因截短突变论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:应用叁维斑点追踪(3D-STI)技术评价MYBPC3致截短蛋白基因突变所致肥厚型心肌病(HCM)患者左室收缩功能的早期改变及心肌收缩的不同步性。方法利用靶向外显子捕获测序的方法对113例HCM患者的96个与遗传性心肌病相关的基因进行了全部外显子的扩增和高通量测序。对筛查发现的9例携带MYBPC3致截短蛋白基因突变的患者进行研究,同时选取健康人9例作为对照组。运用Tom-Tec software脱机分析软件获取应变参数,旋转、扭转参数及不同步性参数。比较两组上述叁维参数间的差异。同时,根据超声结果将携带MYBPC3致截短蛋白基因突变的患者的左室心肌厚度分为≥15mm节段组和<15mm节段组,比较二组间节段圆周应变、纵向应变、径向应变(CSt、LSt、RSt)的差异。结果:9例患者携带7种MYBPC3基因致截短蛋白突变,4种为缺失突变,3种为无义突变。与对照组比较,MYBPC3致截短蛋白基因突变组左心室质量指数(LVMI),左房容积指数(LVAI)均显着增加,Ea及Aa值显着减小(p<0.05),余超声参数及临床基础资料在两组间无显着统计学差异。3D-STI参数为与对照组比较,MYBPC3致截短蛋白基因突变组整体纵向应变及整体径向应变明显减低,经心动周期RR间期标化后的左心室16节段心内膜圆周、径向及纵向应变达峰时间标准差(TCS-SD%、TLS-SD%、TRS-SD%)及任意两节段环形、纵向、径向应变达峰时间最大差值(TCS-diff%、TLS-diff%、TRS-diff%)均明显延长(p<0.05);与<15mm节段组比较,心肌厚度为耋15mm节段组节段纵向应变(LSt)明显减低(P<0.05)。其余各叁维参数均无统计学差异。结论:3D-STI技术能敏感的发现MYBPC3基因致截短蛋白基因突变所致HCM患者左室收缩功能早期受到损害及心肌收缩存在明显不同步,为临床开展HCM的早期诊断、危险分层及治疗评估提供参考依据。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
基因截短突变论文参考文献
[1].田丽春,朱情情,刘艾洁,王青青,黄光瑞.携带小鼠白介素-4截短型突变体基因的5型腺相关病毒载体的构建及外源蛋白的体外表达[J].现代生物医学进展.2019
[2].李静,纳丽莎,刘丽文,左蕾,齐伟.叁维斑点追踪技术评价MYBPC3致截短蛋白基因突变所致肥厚型心肌病患者左室收缩功能及不同步性[C].中国超声医学工程学会第十叁届全国超声心动图学术会议论文汇编.2016
[3].糜艳霞.舞毒蛾Ⅰ型几丁质酶基因催化区截短和定点突变的研究[D].太原理工大学.2015
[4].唐红,陈兰兰,陈恩强,刘翠平,白浪.乙型肝炎病毒逆转录酶区A181T和M204I基因耐药突变所致其S区包膜蛋白羧基端发生的截短和替换突变株生物学特性研究[C].中华医学会第十叁次全国感染病学术会议论文汇编.2014
[5].曾敏怡.SCN1A基因截短突变患者的临床分析及截短突变诱导的NMD机制研究[D].广州医科大学.2014
[6].张景盼.酸性α-淀粉酶基因的截短突变及性质研究[D].河南农业大学.2013
[7].丁海,李彤,庄辉.乙型肝炎病毒逆转录酶区基因耐药突变所致其表面蛋白羧基端截短性变异研究进展[J].中国病毒病杂志.2012
[8].宋庆贺,陈苏民,陈南春,代忠明,侯立朝.全长人lrp基因及其截短和定点突变体真核表达载体的构建[J].科学技术与工程.2006
[9].邸雅南,胡大荣,胡学玲,吴忆贫.HBVC基因截短型突变体抗HBV作用研究[J].中华传染病杂志.2005
[10].刘晓蓉,单祥年,FriedlW,UhlhaasS,李金田.应用蛋白截短技术检测APC基因胚系突变[J].遗传学报.2005
论文知识图
