SOX-9通过调控ADAMTS保护椎间盘

SOX-9通过调控ADAMTS保护椎间盘

论文摘要

目的 探讨转录因子SOX-9和含Ⅰ型血小板反应蛋白的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS)对椎间盘退行性变的影响及二者之间的关系,为进一步理解椎间盘退行性变发生机制提供实验依据。方法收集不同退行性变等级的椎间盘组织,通过实时荧光定量PCR、免疫组织化学染色和蛋白质印迹分析等方法检测椎间盘组织中SOX-9、DAMTS-4、ADAMTS-5的表达。原代培养正常椎间盘中的髓核细胞,通过转染小干扰RNA(siRNA)干扰SOX-9、ADAMTS-4、ADAMTS-5的表达,采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹分析检测细胞外基质成分——Ⅱ型胶原(COL2A1)、蛋白聚糖(ACAN)、软骨寡聚物基质蛋白(COMP)的表达变化,通过荧光素酶实验评估SOX-9对ADAMTS-4、ADAMTS-5启动子活性的影响。结果与正常椎间盘组织相比,发生退行性变椎间盘组织中SOX-9表达降低,而ADAMTS-4、ADAMTS-5表达升高。单纯干扰髓核细胞中SOX-9的表达,COL2A1、ACAN及COMP表达均下调,ADAMTS-4、ADAMTS-5表达上调;同时干扰SOX-9、ADAMTS-4及ADAMTS-5表达后,COL2A1、ACAN及COMP表达较单纯干扰SOX-9表达明显升高。荧光素酶实验结果显示SOX-9可显著下调ADAMTS-4、ADAMTS-5启动子活性,提示二者具有直接调控关系。结论SOX-9通过直接调控ADAMTS-4、ADAMTS-5表达进而影响髓核细胞外基质成分的表达,最终发挥保护椎间盘的作用。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 试剂和仪器
  •   1.2 临床标本采集和处理
  •   1.3 人髓核细胞分离和培养
  •   1.4 小干扰RNA(siRNA)转染和腺病毒感染
  •   1.5 蛋白质印迹分析
  •   1.6 实时荧光定量PCR
  •   1.7 统计学处理
  • 2 结 果
  •   2.1 椎间盘组织病理学观察
  •   2.2 椎间盘组织中ADAMTS的表达
  •   2.3 椎间盘组织中SOX-9和细胞外基质成分的表达
  •   2.4 SOX-9对人髓核细胞ADAMTSs、COL2A1、ACAN和COMP表达的影响
  •   2.5 SOX-9通过ADAMTS调节细胞外基质成分的表达
  • 3 讨 论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 徐敏铭,温子欢,官伟,王绪君,黄常盛

    关键词: 转录因子,蛋白质类,基因表达调控,椎间盘退行性变

    来源: 脊柱外科杂志 2019年06期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 外科学

    单位: 上饶惠阳医院骨科,上饶市立医院骨科,上饶清水医院骨科

    分类号: R681.5

    页码: 425-430

    总页数: 6

    文件大小: 1840K

    下载量: 51

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