磁性纳米颗粒固定化乙醇脱氢酶的研究

论文摘要

本研究采用3-丙氨基三乙氧基硅烷（APTES）和戊二醛修饰包裹有SiO2磁性Fe3O4纳米颗粒表面,将其作为固定化载体固定化乙醇脱氢酶,研究固定化条件对固定化效率的影响,并对固定化酶性质进行分析。研究发现,当Fe3O4@SiO2纳米颗粒修饰上氨基和醛基后依然具有良好的水分散性和胶体稳定性,适合作为固定化载体。通过单因素优化,发现当最适给酶量为11. 3U/100 mg,搅拌转速为150 r/min,固定化p H和固定化温度分别控制在6. 5和5℃～15℃,固定化时长为45 min时,具有较好的固定化效果,固定化率可达到60. 2%。在此条件下制备得到的固定化酶与游离酶相比,固定化酶具有良好的耐高温和耐碱性。所得固定化乙醇脱氢酶在连续使用8次后,固定化率仍保留在57%左右,表明该固定化酶具有较好的操作稳定性,可为连续生产NADH提供技术依据。

论文目录

1 实验部分

1.1 试剂

1.2 试验方法

1.2.1 Si O2包被磁性四氧化三铁纳米颗粒的氨基化修饰

1.2.2 Fe3O4@SiO2-NH3纳米颗粒的醛基化修饰

1.2.3 纳米颗粒固定化乙醇脱氢酶的制备

1.2.4 纳米颗粒固定化乙醇脱氢酶条件的研究

1.2.5 固定化酶热稳定性和耐酸碱性研究

1.2.6 固定化酶操作稳定性研究

1.2.7 固定化乙醇脱氢酶酶活力的测定

2 结果与讨论

2.1 磁性四氧化三铁纳米颗粒表面修饰

2.1.1 SiO2包被磁性四氧化三铁纳米颗粒结构分析

2.1.2 氨基化和醛基化修饰Fe3O4@Si O2结果分析

2.2 磁性纳米颗粒固定化乙醇脱氢酶条件的优化

2.2.1 给酶量对固定化效果的影响

2.2.2 固定化pH对固定化效果的影响

2.2.3 固定化时间对固定化率的影响

2.2.4 固定化温度对固定化率的影响

2.2.5 固定化转速对固定化率的影响

2.3 固定化酶性能的研究

2.3.1 固定化酶热稳定性分析

2.3.2 固定化酶耐酸碱性分析

2.3.3 固定化酶的操作稳定性分析

3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 余带兵,李红梅,高露姣,孙十凡,周福欢

关键词: 磁性纳米颗粒,表面修饰,乙醇脱氢酶,固定化

来源: 工业微生物 2019年01期

年度: 2019

分类: 基础科学

专业: 生物学

单位: 上海理工大学医疗器械与食品学院,东海水产研究所

分类号: Q814.2

页码: 26-32

总页数: 7

文件大小: 212K

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标签：磁性纳米颗粒论文; 表面修饰论文; 乙醇脱氢酶论文; 固定化论文;

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