细胞转导论文_葛志华,崔宙开,杨宁,李俊玫,王春艳

导读:本文包含了细胞转导论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:衰老,何首乌,干细胞,细胞,颌下腺,蛋白,基因治疗。

细胞转导论文文献综述

葛志华,崔宙开,杨宁,李俊玫,王春艳[1](2015)在《何首乌饮对衰老大鼠下颌下腺p16/Rb细胞转导通路相关蛋白的影响》一文中研究指出目的观察何首乌饮对衰老大鼠下颌下腺p16/Rb细胞信号转导通路相关蛋白的影响。方法选用8周龄SD雌性大鼠50只,随机分为何首乌饮干预预防和治疗性实验两大部分,分为五组,每组5只,用D-半乳糖制造衰老大鼠模型,Western印迹法检测p16、非磷酸化Rb蛋白含量。结果预防各组间p16和非磷酸化Rb蛋白表达均以模型组最高,正常组最低,各预防组处于中间水平,其中以预防中剂量组(Pm)最低(P<0.01)。治疗各组间p16和非磷酸化Rb蛋白表达均以自然恢复组(S-R)最高,阴性对照组最低,各治疗组中以治疗中剂量组(Tm)最低(P<0.01)。结论何首乌饮延缓下颌下腺细胞衰老的作用可能与激活Rb/p16通路有关。(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2015年05期)

于海涛,陈科达,倪崖,阎辉[2](2011)在《TAT细胞穿透肽融合小鼠SurvivinT34A重组蛋白的原核表达纯化及其细胞转导效能研究》一文中研究指出为研究细胞穿透肽TAT融合小鼠存活素T34A(survivinT34A)重组蛋白(TAT-msvT34A)转导细胞的效能,该实验将表达TAT-msvT34A的原核表达载体pTAT-msvT34A转化大肠杆菌表达株E.coli BL21(DE3),异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,表达的融合蛋白主要以包涵体形式存在。通过亲和层析、离子交换柱层析、分子筛等步骤纯化,得到TAT-msvT34A融合蛋白的纯度可达98%。纯化的融合蛋白用异硫氰酸荧光素(FITC)标记(FITC-TAT-msvT34A)后,分别转导HepG2、TC-1、B16及HEK293细胞株,流式细胞仪检测显示,较低浓度的重组蛋白即对HepG2、TC-1、B16及HEK293等细胞株具有较高的转导效能,在100 nmol/L时的转导效率均可达到60%以上,作为对照,FITC标记的牛血清白蛋白(FITC-BSA)在100 nmol/L时对上述细胞株的转导效率极低,结果具有显着性差异(P<0.01)。荧光显微镜观察可见,50 nmol/L和100 nmol/L的TAT-msvT34A融合蛋白对HepG2细胞的转导效率均可达50%,而对照FITC-BSA对HepG2细胞几乎无转导。表达纯化的TAT-msvT34A融合蛋白对HepG2、TC-1、B16及HEK293等细胞株均有较高的转导效能,可以用于后续抗肿瘤研究。(本文来源于《中国细胞生物学学报》期刊2011年07期)

邢柳[3](2010)在《小鼠精原干细胞转导与移植的初步研究》一文中研究指出目的:通过比较脂质体转染法与慢病毒介导法转导小鼠精原干细胞,确立适宜小鼠精原干细胞的体外转基因操作方法,获得GFP-阳性精原干细胞后通过睾丸输出小管显微注射法进行小鼠精原干细胞移植,以期观察GFP阳性小鼠精原干细胞在受体小鼠睾丸中的存活情况。方法:利用本所已建立的ICR品系新生小鼠精原干细胞系,比较了脂质体介导法和慢病毒介导法转染精原干细胞的效率。确立了适宜的方法,即通过脂质体介导,载体质粒与慢病毒包装质粒pCMV、pMD. G共转染293FT细胞,制备慢病毒(Lentivirus-GFP),检测病毒滴度。通过慢病毒将带有绿色荧光蛋白(GFP)标记的病毒表达载体转导入小鼠精原干细胞内,使其发出绿色荧光。收集GFP阳性精原干细胞后进行体外培养与扩增,于移植前消化成单细胞悬液,经睾丸输出小管显微注射技术,对白消安腹腔注射处理的不育小鼠行同种异体移植,观察GFP阳性精原干细胞在受体小鼠睾丸内的存活情况。结果:慢病毒可有效转导小鼠精原干细胞,较普通脂质体转染法获得更多GFP阳性细胞。移植术后30天荧光解剖显微镜下可见睾丸组织有散在光点,但未见曲细精管发出明显绿色荧光,睾丸组织冰冻切片内可见少量绿色荧光蛋白表达阳性的精原干细胞沿着曲细精管基底膜生长增殖。结论:1、证实了慢病毒介导法是一种适宜小鼠精原干细胞的转导方法。2、建立了白消安腹腔注射法不育受体小鼠模型。3、成功运用输出小管显微注射技术完成精原干细胞移植。4、初步探讨了ICR品系新生小鼠精原干细胞移植术后细胞存活情况。(本文来源于《中南大学》期刊2010-05-01)

刘维潮,王静,王双辉,吴立杰,王小杰[4](2009)在《何首乌饮对衰老大鼠脑组织Rb细胞转导通路相关蛋白表达的影响》一文中研究指出人体的衰老表现为各脏腑功能的衰退,尤其脑功能的衰退。细胞衰老是老年病发病的共同基础,细胞衰老过程是借助于信号转导通路阻滞实现的[1,2]。生长停滞是细胞衰老的突出表现,其中Rb/p16信号通路起着重要作用,(本文来源于《承德医学院学报》期刊2009年04期)

牛嗣云,庞晓静,高福禄,周晓春,颜勇[5](2009)在《松花粉对衰老大鼠睾丸p53/Rb细胞转导通路相关基因和蛋白表达的影响》一文中研究指出目的通过检测p53、Rb、p16、p19、p21在D-半乳糖所致衰老大鼠睾丸组织的表达,探讨松花粉对睾丸组织p53/Rb细胞传导通路的影响。方法采用RT-PCR检测p53、Rb基因在睾丸的表达;Western印迹检测大鼠睾丸磷酸化Rb(p-Rb)、p16、p19、p21蛋白表达。结果模型组睾丸组织p53、Rb基因和p16、p19、p21蛋白的表达明显高于正常组(P<0.01);p-Rb蛋白表达显着低于正常组(P<0.01)。而松花粉能降低p53、Rb基因和p16、p19、p21蛋白的表达提高p-Rb的表达,且明显好于阳性对照组(P<0.05)。结论松花粉通过调节睾丸组织p53/Rb细胞传导通路相关蛋白及基因的表达,起到延缓睾丸组织衰老的作用。(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2009年14期)

李丹,乔群,王晓军,钱建平[6](2009)在《腺病毒与慢病毒载体对人脂肪间充质干细胞转导效率及基因表达的差异》一文中研究指出目的:比较重组腺病毒、慢病毒载体介导增强型绿色荧光蛋白对体外培养的人脂肪来源干细胞(hADSCs)的转导效率和外源基因表达差异。方法:原代分离培养hADSCs并鉴定,应用Ad5F35-EGFP及LV-EGFP以MOI=0、25、50、100、200、400、800感染hADSCs,在1、3、7、14、21天应用荧光显微镜、流式细胞仪观察检测表达EGFP细胞阳性率。MTT法检测转导对hADSCs增殖的影响。VonKossa染色、油红O染色检测体外诱导转导EGFP的hADSCs向成骨及成脂方向分化能力。结果:hADSCs细胞表面标记CD31、CD34、CD45、CD106和HLA-DR阴性,CD29、CD44、CD49d、CD105、CD166阳性。荧光显微镜观察Ad5F35-EGFP感染hADSCs后(1~7天)可见EGFP高表达,此后逐渐减弱;LV-EGFP感染hADSCs后21天,仍可见EGFP高表达。流式细胞仪检测Ad5F35-EGFP、LV-EGFP对hADSCs转导效率与MOI值呈正相关。MTT显示Ad5F35-EGFP在高MOI值(800)检测A值与对照组相比差异显着(P<0.01)。转导EGFP的hADSCs经体外诱导14天可向成骨、成脂方向分化。结论:与腺病毒相比,慢病毒能够更为安全、有效地感染体外培养hADSCs,并长期表达外源基因,是研究基因修饰hADSCs的理想载体。(本文来源于《中国美容医学》期刊2009年03期)

牛嗣云,陈龙,高福禄,陈志宏,王小杰[7](2008)在《p53/Rb细胞转导通路相关基因和蛋白在衰老大鼠睾丸组织的表达》一文中研究指出目的通过检测p53、Rb、p16、p19、p21在衰老大鼠睾丸组织的表达,探讨p53/Rb细胞转导通路相关基因和蛋白在睾丸组织衰老中的意义。方法选用8周龄雄性SD大鼠30只,体重180~220g,随机分为正常对照组和模型组,每组15只。模型组大鼠采用D-半乳糖连续腹腔注射建立亚急性衰老大鼠模型。采用RT-PCR方法检测p53、Rb基因在大鼠睾丸组织的表达;Western blotting法检测大鼠睾丸磷酸化Rb、p16、p19、p21蛋白的表达。结果模型组睾丸组织p53、Rb基因表达明显高于正常对照组(P<0.01);模型组睾丸组织与正常组比较:p16、p19、p21蛋白的表达明显升高,而磷酸Rb蛋白表达显着下降(P<0.01)。结论Rb/p53细胞转导通路相关基因及蛋白在衰老大鼠睾丸组织发生明显改变,Rb/p53细胞转导通路阻滞可能在睾丸组织的衰老过程中起着一定作用。(本文来源于《解剖学报》期刊2008年06期)

杨勤,罗新华,程明亮,张权[8](2008)在《人肝纤维化组织中TGF-B/Smads家族细胞转导信号通路的研究》一文中研究指出目的:研究慢性乙型肝炎肝纤维化组织中TGFβ1、Smad2、Smad4、Smad7的表达,探讨Smads在肝纤维化发生发展过程中的作用机制。方法:32例慢性乙型肝炎患者肝穿刺标本,经病理分级,应用实时荧光定量PCR方法检测肝纤维化组织中TGFβ1、Smad2、4、7mRNA的表达及变化规律。结果:随着肝纤维化程度加重,TGFβ1、Smad2、Smad4 mRNA的表达逐渐增加,在S_4期增加最明显(P<0.01);Smad7 mRNA在肝纤维化初期表达增加,随着肝纤维化程度加重,表达呈下降趋势,各期之间表达有差异性(P<0.05)。结论:TGF-β1、Smads分子均参与了肝纤维化的发生发展,不同类型的Smads分子承担的作用各异。(本文来源于《中国病理生理学会受体和信号转导专业委员会暨消化专业委员会联合学术会议论文汇编》期刊2008-11-01)

罗新华,程明亮,杨勤,张权[9](2008)在《人肝纤维化组织中TGF-β/Smads家族细胞转导信号通路的研究》一文中研究指出目的研究慢性乙型肝炎肝纤维化组织中转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad2、Smad4、Smad7的表达,探讨Smads在肝纤维化发生、发展过程中的作用机制。方法对32例慢性乙型肝炎患者肝穿刺标本进行病理分期,应用实时荧光定量PCR方法检测肝纤维化组织中TGF-β1、Smad2、Smad4、Smad7 mRNA表达及变化规律。结果随着肝纤维化程度加重,TGF-β1、Smad2、Smad4 mRNA的表达逐渐增加,在S4期增加最明显(P<0.01)。Smad7 mRNA在肝纤维化初期表达增加,随着肝纤维化程度加重,表达呈下降趋势,各期之间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论TGF-β1和Smads分子均参与肝纤维化的发生、发展,不同类型的Smads分子作用各异。(本文来源于《肝脏》期刊2008年02期)

孙丽敏[10](2007)在《基于细胞穿膜肽TAT-Rhox5融合蛋白的原核表达、纯化及其细胞转导研究》一文中研究指出目的:穿膜肽是指具有细胞膜穿透功能、长度多数小于20个的氨基酸序列,可以穿过细胞膜进入细胞质甚至细胞核,而细胞膜却完好无损。这些天然的或人工合成的多肽具有水溶性、低裂解性并通过非吞噬作用进入各种细胞膜。其中发现较早,研究最多的是来源于人免疫缺陷病毒(HIV)-Ⅰ的反式转录活化因子(Trans—activating transcriptional activator,TAT)。TAT或TAT来源的多种多肽不仅能运输小分子物质,还能运输大分子量的药物和纳米颗粒性物质至多种哺乳动物的活细胞中。Rhox基因家族是一簇新发现的同源异型框基因簇,其定位于X染色体上,特异性的在雌雄鼠的生殖组织中表达,可能在胚胎发育、生殖组织的发育、精子的生成和成熟中发挥重要作用。本实验室利用GAL4酵母双杂交系统对小鼠7天胚胎cDNA文库进行筛选,获到了几个与mPem蛋白相作用的分子,其中包括Cdc37和Mdfic。本课题拟构建,表达和纯化TAT-Rhox5融合蛋白,并将纯化所得蛋白质传导进入细胞,研究穿膜肽TAT是否可以协助Rhox5蛋白进入细胞和其在细胞内的定位,以及其在细胞内的功能发挥情况。从而为穿膜肽TAT的应用研究提供实验依据,同时,为Rhox5蛋白的功能研究奠定基础。方法:将TAT序列按照通读框插入重组质粒pET22b(+)-Rhox5中,构建pET22b(+)-TAT-Rhox5表达质粒。转化E.coli表达菌株Rosseta~(TM)2(DE3),IPTG诱导表达TAT-Rhox5-6His融合蛋白,Western blotting检测目的蛋白,表逹并纯化TAT-Rhox5融合蛋白,转导TAT-Rhox5融合蛋白进入细胞并检测其转导进入细胞的最佳浓度,再以免疫荧光法检测其在细胞内的定位。结果:成功构建pET22b(+)-TAT-Rhox5原核表达质粒;实现了TAT-Rhox5-6His蛋白在大肠杆菌中的高效表达;并能纯化出高纯度的TAT-Rhox5融合蛋白,证实穿膜肽TAT可以协助Rhox5蛋白进入细胞,并最终运送到核内,而TAT-Rhox5融合蛋合进入细胞的最佳浓度为3μM,当转导时间增加,融合蛋白进入细胞核的量亦相对增加。结论:成功纯化出高纯度的TAT-Rhox5融合蛋白,证实穿膜肽TAT可以协助Rhox5蛋白进入细胞,并最终运送到核内,为Rhox5蛋白的功能研究奠定基础。(本文来源于《暨南大学》期刊2007-06-10)

细胞转导论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

为研究细胞穿透肽TAT融合小鼠存活素T34A(survivinT34A)重组蛋白(TAT-msvT34A)转导细胞的效能,该实验将表达TAT-msvT34A的原核表达载体pTAT-msvT34A转化大肠杆菌表达株E.coli BL21(DE3),异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,表达的融合蛋白主要以包涵体形式存在。通过亲和层析、离子交换柱层析、分子筛等步骤纯化,得到TAT-msvT34A融合蛋白的纯度可达98%。纯化的融合蛋白用异硫氰酸荧光素(FITC)标记(FITC-TAT-msvT34A)后,分别转导HepG2、TC-1、B16及HEK293细胞株,流式细胞仪检测显示,较低浓度的重组蛋白即对HepG2、TC-1、B16及HEK293等细胞株具有较高的转导效能,在100 nmol/L时的转导效率均可达到60%以上,作为对照,FITC标记的牛血清白蛋白(FITC-BSA)在100 nmol/L时对上述细胞株的转导效率极低,结果具有显着性差异(P<0.01)。荧光显微镜观察可见,50 nmol/L和100 nmol/L的TAT-msvT34A融合蛋白对HepG2细胞的转导效率均可达50%,而对照FITC-BSA对HepG2细胞几乎无转导。表达纯化的TAT-msvT34A融合蛋白对HepG2、TC-1、B16及HEK293等细胞株均有较高的转导效能,可以用于后续抗肿瘤研究。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

细胞转导论文参考文献

[1].葛志华,崔宙开,杨宁,李俊玫,王春艳.何首乌饮对衰老大鼠下颌下腺p16/Rb细胞转导通路相关蛋白的影响[J].中国老年学杂志.2015

[2].于海涛,陈科达,倪崖,阎辉.TAT细胞穿透肽融合小鼠SurvivinT34A重组蛋白的原核表达纯化及其细胞转导效能研究[J].中国细胞生物学学报.2011

[3].邢柳.小鼠精原干细胞转导与移植的初步研究[D].中南大学.2010

[4].刘维潮,王静,王双辉,吴立杰,王小杰.何首乌饮对衰老大鼠脑组织Rb细胞转导通路相关蛋白表达的影响[J].承德医学院学报.2009

[5].牛嗣云,庞晓静,高福禄,周晓春,颜勇.松花粉对衰老大鼠睾丸p53/Rb细胞转导通路相关基因和蛋白表达的影响[J].中国老年学杂志.2009

[6].李丹,乔群,王晓军,钱建平.腺病毒与慢病毒载体对人脂肪间充质干细胞转导效率及基因表达的差异[J].中国美容医学.2009

[7].牛嗣云,陈龙,高福禄,陈志宏,王小杰.p53/Rb细胞转导通路相关基因和蛋白在衰老大鼠睾丸组织的表达[J].解剖学报.2008

[8].杨勤,罗新华,程明亮,张权.人肝纤维化组织中TGF-B/Smads家族细胞转导信号通路的研究[C].中国病理生理学会受体和信号转导专业委员会暨消化专业委员会联合学术会议论文汇编.2008

[9].罗新华,程明亮,杨勤,张权.人肝纤维化组织中TGF-β/Smads家族细胞转导信号通路的研究[J].肝脏.2008

[10].孙丽敏.基于细胞穿膜肽TAT-Rhox5融合蛋白的原核表达、纯化及其细胞转导研究[D].暨南大学.2007

论文知识图

予Sorafenib及K252a处理72h后细胞...予Sorafenib及K252a处理72h后细胞...@Ce6:CTAB纳米颗粒与HO-8910PM共...介导的人树突细胞IL-10和IL-12p40基...绝经前叁阴性乳腺癌患者差异蛋白功能...细胞和材料表面的相互作用(引自文献...

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