导读:本文包含了高甜度基因论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:基因,高效,工程技术,蛋白,血红蛋白,酵母,突变。
高甜度基因论文文献综述
李敏[1]（2003）在《高甜度monellin基因和透明颤菌血红蛋白基因在毕赤酵母中的表达》一文中研究指出monellin是一种高甜度、低热量、口味纯正、安全无毒的蛋白甜味剂，应用前景十分广阔。但其天然植物来源非常有限，现有的基因工程菌又存在产量低，胞内表达提取困难的问题，从而限制了monellin的规模生产和广泛应用。 本研究拟以拥有自主知识产权的高甜度monellin基因，利用毕赤酵母表达系统，构建高效表达、有效分泌高甜度monellin的重组毕赤酵母生物反应器。以期解决目前monellin基因工程菌存在的单产低、从胞内提取困难的两大难题。同时探讨vgb基因在毕赤酵母中的功能，并应用于高甜度monellin重组酵母，解决毕赤酵母高密度发酵中存在的供氧不足的问题，进一步提高高甜度monellin的产量。 首先，采用毕赤酵母偏爱密码子，人工合成了高甜度monellin基因，并构建了重组分泌型酵母表达载体pPIC9M，通过电击转化获得了可高效分泌表达有甜味活性高甜度monellin的重组毕赤酵母GS115/pPIC9M。高甜度monellin的摇瓶表达量约0.25g/L。目前涉及monellin分泌表达的研究报道中，表达产物没有甜味活性。 同时，采用毕赤酵母偏爱密码子，人工合成了透明颤菌血红蛋白基因(vgb)；并构建了vgb基因的酵母胞内表达载体pPIC3.5KV，通过电击转化获得了能在胞内表达有生物活性VHb的重组毕赤酵母GS115/pPIC3.5KV。这种新型重组菌在贫氧条件下，与现有的毕赤酵母宿主菌相比具有明显的生长优势，更适于高密度发酵和用作表达外源蛋白的宿主。目前尚未见vgb基因在毕赤酵母中表达的研究报道。 进一步通过电击转化将vgb基因整合到重组酵母GS115/pPIC9M的基因组中，获得了由高甜度monellin和vgb两个基因同时整合的重组酵母GS115/pPIC9M/pPIC3.5KV。经甲醇诱导，高甜度monellin基因和vgb基因分别以分泌和胞内的形式得到表达，且表达产物均有生物活性。VHb在胞内的成功表达，使重组毕赤酵母高甜度monellin的分泌表达量提高了20%，达0.3g/L。目前尚未见将rgb基因用于提高毕赤酵母中外源蛋白表达的研究报道。 以重组酵母GS115/pPIC9M/pPIC3.5KV为出发菌株，通过摇瓶水平发酵条件优化，使高甜度monellin的分泌表达量进一步由0.3g/L提高到了0.5g/L。 以摇瓶发酵条件为依据，在30L发酵罐上采取分批补料的方式实现了重组酵母GS115/pPIC9M/pPIC3.5KV的高密度发酵，高甜度monellin分泌表达量达2g/L。比目前报道的在毕赤酵母中以胞内形式表达的monellin最高表达量1.8g/L还高，而且表达的高甜度monellin分泌到胞外，无需破碎细胞提取。解决了目前甜蛋白基因工程研 中国农业科学院博士学位论文究中存在的单产低、胞内提取困难的两大难题。 综上所述，本研究成功构建了可高效表达、有效分泌高甜度monellin的重组毕赤酵母工程菌，探索了一种利用…基因解抉毕赤酵母高密度发酵中氧气供求矛盾。提高毕赤酵母中外源蛋白产量的新方法，提供了一条产量高、分离纯化简便，可低成本大规模生产高甜度monellin的新途径。为实现高甜度monellin的产业化和 vgb基因在毕赤酵母高密度发酵中的广泛应用奠定了基础。(本文来源于《中国农业科学院》期刊2003-06-01）
[2]（2001）在《利用基因工程技术高效表达高甜度蛋白》一文中研究指出甜蛋白来源于西非热带植物的果实 ,正常结果所需生态环境非常苛刻 ,很难在其它地区引种成功 ,从天然植物来源中提取甜蛋白难以形成规模。因此 ,自80年代末以来 ,国际上开始了采用基因工程技术人工合成甜蛋白的研究工作。现已合成多种甜蛋白 ,其中ｔｈａｕｍａｔ(本文来源于《食品与发酵工业》期刊2001年01期）
[3]（2001）在《利用基因工程技术高效表达高甜度蛋白》一文中研究指出甜蛋白来源于西非热带植物的果实 ,正常结果所需生态环境非常苛刻 ,很难在其它地区引种成功 ,从天然植物来源中提取甜蛋白难以形成规模。因此 ,自 80年代以来 ,国际上开始了采用基因工程技术人工合成甜蛋白的研究工作。现已合成多种甜蛋白 ,其中ｔｈａｕｍａｔ(本文来源于《中国粮油学报》期刊2001年01期）
马民[4]（2001）在《基因技术高甜度蛋白通过鉴定》一文中研究指出本报讯（记者马民）由中国农业科学院生物技术中心部郭叁雄研究员主持的“利用基因工程技术高效表达高甜度蛋白”项目，近日通过专家鉴定。 该项成果首次在国际上采用细(本文来源于《中国食品质量报》期刊2001-01-09）
郭叁堆,李敏,崔洪志[5]（1999）在《高甜度monellin基因的获得及其在大肠杆菌中的高效表达》一文中研究指出天然ｍｏｎｅｌｌｉｎ是来源于西非植物Ｄｉｏｓｃｏｒｅｏ－ｐｈｙｌｌｕｍ Ｃｕｍｍｉｎｓｉｉ的果实的一种蛋白质甜味剂，具有蔗糖等其他甜味剂无法比拟的优点：（１）ｍｏｎｅｌｌｉｎ是蛋白质，富含人体需要的各种氨基酸，营养价值高。（２）ｍｏｎｅｌｌｉｎ为非糖蛋白(本文来源于《云南大学学报(自然科学版)》期刊1999年S3期）
高甜度基因论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
甜蛋白来源于西非热带植物的果实 ,正常结果所需生态环境非常苛刻 ,很难在其它地区引种成功 ,从天然植物来源中提取甜蛋白难以形成规模。因此 ,自80年代末以来 ,国际上开始了采用基因工程技术人工合成甜蛋白的研究工作。现已合成多种甜蛋白 ,其中ｔｈａｕｍａｔ
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
高甜度基因论文参考文献
[1].李敏.高甜度monellin基因和透明颤菌血红蛋白基因在毕赤酵母中的表达[D].中国农业科学院.2003
[2]..利用基因工程技术高效表达高甜度蛋白[J].食品与发酵工业.2001
[3]..利用基因工程技术高效表达高甜度蛋白[J].中国粮油学报.2001
[4].马民.基因技术高甜度蛋白通过鉴定[N].中国食品质量报.2001
[5].郭叁堆,李敏,崔洪志.高甜度monellin基因的获得及其在大肠杆菌中的高效表达[J].云南大学学报(自然科学版).1999
论文知识图
