导读:本文包含了软骨细胞培养论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:软骨,细胞,多肽,交联,体外,强度,骨关节炎。
软骨细胞培养论文文献综述
黄永明,黄启明,刘焱杰,王竣,曹振武[1]（2020）在《TDP43慢病毒载体转染人脐带间充质干细胞与软骨细胞共培养后的增殖与凋亡》一文中研究指出背景:在缺血缺氧条件下TDP43可能为MAPK信号通路关键的负调控因子,但其在骨性关节炎中对JNK及p38 MAPK信号通路的作用并不清楚。目的:研究野生型TDP43介导骨性关节炎中软骨细胞病变的靶基因RACK1表达,分析其发挥应激作用的效应。方法:以TDP43慢病毒载体转染人脐带间充质干细胞,分析其体外分化为软骨细胞的能力。将TDP43慢病毒转染脐带间充质干细胞、空载体慢病毒转染脐带间充质干细胞、未转染脐带间充质干细胞分别与人软骨细胞共培养12d,倒置显微镜下观察软骨细胞形态变化;共培养第0,3,6,9,12天,分析软骨细胞增殖水平;共培养第3天,流式细胞仪检测软骨细胞凋亡率;共培养第3天,q RT-PCR检测软骨细胞内TDP43、RACK1、p38、JNK、AP-1和cl-xl的基因表达。结果与结论:①TDP43慢病毒载体转染后,人脐带间充质干细胞可分化为软骨细胞;②与TDP43慢病毒转染脐带间充质干细胞共培养的软骨细胞形态发生显着改变,细胞变得粗大,并出现多个分枝情况;与空载体慢病毒转染脐带间充质干细胞、未转染脐带间充质干细胞共培养的软骨细胞形态未出现变化,呈梭形贴壁生长;③软骨细胞与TDP43慢病毒转染脐带间充质干细胞共培养后,促使软骨细胞凋亡而抑制了细胞增殖(P <0.05);④软骨细胞与TDP43慢病毒转染脐带间充质干细胞共培养后,TDP43、RACK1、JNK、AP-1和Bcl-xl基因表达高于与未转染脐带间充质干细胞、空载体慢病毒转染脐带间充质干细胞共培养的软骨细胞(P<0.05);⑤结果表明,软骨细胞高表达TDP43可激活RACK1的表达,进而调控软细胞增殖和凋亡。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2020年07期）
文静,徐志民,齐德胜,王佳玉,于双江[2]（2019）在《PLG-g-TA/RGD酶催化交联水凝胶用于透明软骨细胞黏附和叁维细胞培养》一文中研究指出制备了一种基于聚谷氨酸-g-酪胺/cRGDfk(PLG-g-TA/RGD)的新型酶催化交联水凝胶,用于兔透明软骨细胞黏附和叁维细胞的培养. PLG-g-TA/RGD聚合物材料在辣根过氧化物酶(HRP)和过氧化氢(H_2O_2)存在下,能够通过酪氨基团的自交联快速形成水凝胶.环状多肽(cRGDfk)的引入能够显着提高材料的溶液-凝胶转变速率和凝胶强度.透明软骨细胞在水凝胶表面黏附3 d后,在PLG-g-TA/RGD水凝胶表面有更多的细胞黏附;将透明软骨细胞包裹在水凝胶内培养1, 4, 7 d后,细胞在PLG-g-TA/RGD水凝胶内增殖效率明显高于对照组PLG-g-TA水凝胶.细胞实验结果表明,该水凝胶材料具有良好的生物相容性. cRGDfk的引入,促进了透明软骨细胞的黏附和增殖,显示了PLG-g-TA/RGD水凝胶材料在叁维细胞培养方面的应用潜力.(本文来源于《高等学校化学学报》期刊2019年09期）
张枫,张燕,赵玉蒙,胡锦涛,殷红[3]（2019）在《不同硒浓度培养的一株链格孢霉产物对兔软骨细胞的影响》一文中研究指出本实验研究了加硒培养的一株链格孢霉(Alternaria alternate)菌株的产物对兔软骨细胞毒损作用的影响。采用合成培养液,添加不同浓度硒元素后进行摇瓶培养链格孢霉菌株;发酵产物用75%乙醇提取后减压浓缩;将不同硒处理的发酵产物提取物加入兔软骨细胞培养体系,采用四氮唑蓝(MTT)法测定软骨细胞的生长速率,甲苯胺蓝染色法检测其蛋白聚糖的表达,免疫组化法检测Ⅱ型胶原表达量,半定量RT-PCR法检测细胞蛋白聚糖和Ⅱ型胶原mRNA的表达。结果显示,在实验所设浓度范围内,加硒对该链格孢霉菌株的生长有一定影响,但不显着。加不同浓度硒培养所得发酵产物提取物对兔软骨细胞生长速率的影响各异,多表现为抑制作用。菌株发酵产物的提取物对Ⅱ型胶原和蛋白聚糖mRNA的表达量有些微促进作用,尤其是加一定浓度硒的处理;但对这两种蛋白的表达都有抑制作用,不过和未加硒的处理相比,加一定浓度硒培养所得提取物的抑制效果有所减轻。本研究结果表明,硒对该链格孢霉菌株的生长有一定影响;加不同浓度硒培养的菌株提取物对兔软骨细胞损伤有关的指标影响不同;说明环境硒水平—真菌产物毒性—软骨细胞损伤之间可能存在一定关系,值得进一步研究。(本文来源于《基因组学与应用生物学》期刊2019年08期）
杜国庆,桑晓文,王楠,石瑛,熊轶喆[4]（2019）在《大鼠半月板纤维软骨细胞的体外培养和生物学特征鉴定》一文中研究指出目的:体外分离、培养和鉴定大鼠半月板纤维软骨细胞,为研究大鼠半月板纤维软骨细胞的损伤修复提供简单、可行的细胞培养方法。方法:机械分离大鼠膝关节内外侧半月板,0.1%Ⅱ型胶原酶消化配合机械吹打,10%FBS的培养基行原代和传代培养,倒置显微镜动态观察不同时间点半月板纤维软骨细胞的形态及生长情况,鉴定采用甲苯胺蓝染色法和Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色法。CCK-8法检测大鼠纤维软骨细胞增殖。结果:在不同时间点,细胞表现出不同的生理形态,由多角形或短梭形变为梭形,最终呈现出叁角形或椭圆形,并随着时间延长,细胞增殖能力逐渐增加。细胞培养48 h和72 h的OD值分别明显高于培养24 h的OD值(P<0.05),差异具有统计学意义。细胞培养48 h和72 h的OD值相比较,72 h的OD值虽有增加,但并无统计学差异(P>0.05)。经甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原免疫荧光染色为阳性。结论:该方法培养的细胞形态稳定,增殖能力强,具有体内纤维软骨细胞的生物学基本特性,可为后续实验提供简单、可靠的原代大鼠半月板纤维软骨细胞培养方法。(本文来源于《现代生物医学进展》期刊2019年15期）
魏钰,魏民[5]（2019）在《人骨关节炎软骨细胞的体外分离与培养》一文中研究指出背景:大量针对骨关节炎细胞水平的研究仍集中在动物模型关节软骨细胞的体外培养。动物模型引发的退变效应与人骨关节炎的发生并不完全一致。如何利用人骨关节炎软骨组织构建体外细胞模型并研究其特征性蛋白变化趋势,是模拟体内骨关节炎软骨退变过程的关键。目的:探讨人骨关节炎软骨细胞的体外分离、培养方法,观察原代至第3代人骨关节软骨细胞的形态学特性和相关蛋白表达变化。方法:取6例因重度骨关节炎行关节置换术患者的废弃软骨组织(获得中国人民解放军总医院医学伦理委员会批准,伦理批号为S2017-23-7),男2例,女4例;年龄62-72岁,平均(68.3±3.39)岁,采用一步酶消化法(Ⅱ型胶原酶)分离培养人骨关节炎软骨细胞,并进行传代培养,从而构建体外人骨关节炎软骨细胞培养体系。倒置相差显微镜观察各代细胞形态;苏木精-伊红染色、甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原免疫荧光染色方法进行细胞鉴定。采用Western blot法检测各代软骨细胞于70%融合率时Col2a、Aggrecan与MMP-13的表达。结果与结论:经过Ⅱ型胶原酶消化后,培养1周左右可见组织块周围爬出散在的细胞,3周左右可传代进行下一步研究;形态学、苏木精-伊红染色、甲苯胺蓝染色与Ⅱ型胶原免疫荧光染色证明培养出的细胞为人软骨细胞。第3代软骨细胞Col2a、Aggrecan的相对表达量与原代比较有明显降低(P<0.01),且随着培养代数增加表达逐渐降低;MMP-13随着培养代数的增加表达逐渐增强(P <0.01)。结果表明,Ⅱ型胶原酶一步消化法可成功从标本中分离出骨关节炎软骨细胞并传代培养。体外培养的骨关节炎软骨细胞去分化特性随着传代次数增加而逐渐增强,功能性蛋白表达整体下降。3代以内的软骨细胞符合人骨关节炎时软骨退变的表现,可能是用于实验研究的最佳选择。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2019年25期）
刘小利,袁小燕[6]（2019）在《电场对体外培养软骨细胞的影响》一文中研究指出软骨细胞的增殖和分化对软骨缺损的修复有重要作用,电刺激软骨细胞可影响软骨细胞增殖、分化、迁移等过程。为了明确电刺激对软骨细胞行为的影响,探讨了对外加电场刺激体外培养软骨细胞的作用方式、作用结果以及作用机制。(本文来源于《中国医药指南》期刊2019年16期）
孙恒,马世泽,蒋海越,刘霞,滕利[7]（2019）在《耳郭软骨细胞微载体的体外叁维动态培养》一文中研究指出背景:软骨细胞是软骨组织工程最常用的种子细胞,但是如何在体外扩增的同时又能维持其良好的软骨表型是研究的重点和难点之一。目的:通过微载体动态培养法,明确叁维动态培养对耳郭软骨细胞增殖和分化的影响,为建立规模化扩增方法提供技术参考。方法:应用胰酶、胶原酶消化法分离、培养猪耳软骨细胞,并将获得的软骨细胞分为3组:培养皿单层培养、微载体叁维静止培养和微载体叁维动态培养。应用扫描电镜、荧光倒置显微镜、DIO荧光染色、冰冻切片DAPI染色观察细胞在微球上生长情况,DNA定量检测软骨细胞增殖能力,Real-time PCR检测软骨相关基因表达差异。结果与结论:①第1代软骨细胞可快速贴附于CultispherG多孔微载体表面,微载体动态培养组细胞数量多于微载体静止培养组,而且微载体动态培养组细胞分布更为均匀;②培养皿单层培养时,软骨细胞在4d时进入平台期,微载体动态培养组软骨细胞对数生长期延长为2-10 d,细胞数量在14 d达到高峰,微载体静止培养组细胞增殖速度缓慢;③在长期体外培养中,二维培养和微载体静止培养软骨表型丧失,而微载体叁维动态培养在促进细胞增殖的同时,能够维持软骨表型;④结果表明,微载体联合旋转细胞培养系统叁维动态培养可以作为耳郭软骨细胞规模化扩增的一种方法。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2019年21期）
孙恒,蒋海越,马世泽,刘霞,滕利[8]（2019）在《左旋聚乳酸多孔微球体外动态培养耳郭软骨细胞的研究》一文中研究指出目的明确PLLA(左旋聚乳酸)、Cultispher G两种多孔微球作为耳郭软骨细胞体外培养载体的可行性,为软骨细胞叁维动态培养寻找合适的微球支架。方法分离猪耳郭软骨、培养软骨细胞,将获得的第1代软骨细胞分别接种于PLLA和Cultispher G多孔微球上,并于RCCS叁维培养系统中进行培养。应用电镜和荧光倒置显微镜观察细胞在微球上的生长情况,CCK-8法检测软骨细胞增殖情况,Real-time PCR检测相关基因表达。结果软骨细胞可贴附于两种微球表面,PLLA和Cultispher G两种微球接种率分别为(37.67%±2.33%)和(73.67%±3.53%)。培养21 d后,PLLA多孔微球细胞总数高于Cultispher G多孔微球。Real-time PCR检测发现PLLA多孔微球维持软骨细胞表型能力优于Cutispher G多孔微球。结论与Cultispher G多孔微球相比,PLLA多孔微球更适合软骨细胞体外叁维培养。(本文来源于《组织工程与重建外科杂志》期刊2019年02期）
文静[9]（2019）在《PLG-g-TA/RGD酶催化交联水凝胶用于透明软骨细胞黏附和叁维细胞培养的研究》一文中研究指出水凝胶因具有类似软组织的性质和能够实现细胞的均匀包载而被广泛的认为是叁维细胞培养的理想支架。然而,水凝胶纳米级孔径限制了细胞的黏附和增殖以及新组织的形成,甚至限制了营养物质和细胞代谢废物在凝胶内外的扩散。为了克服这些缺点,有学者利用各种方法在凝胶结构中创造了大孔,其中,通过孔原浸出法引入大孔,可以方便地控制凝胶体中的孔隙度,有利于研究大孔结构对细胞行为和新组织形成的诱导作用。尽管近年来,大孔的水凝胶支架在叁维细胞培养和组织工程方面取得了很大的进展,但其未来的发展仍面临着一些挑战,表现为在凝胶体中形成较大的孔也会导致凝胶结构的渗透性大幅度增加,进而导致营养物质的迅速扩散以及加速了水凝胶的降解速率。为此对人们期望通过设计或引入生物活性因子来促进细胞的增殖及黏附。在本工作中,我们制备了一种基于聚谷氨酸-g-酪胺/cRGDfk(PLG-g-TA/RGD)的新型酶催化交联水凝胶,用于兔透明软骨细胞黏附和叁维细胞培养的研究。成胶实验证明,PLG-g-TA/RGD聚合物材料在辣根过氧化物酶(HRP)和H2O2存在下,能够通过酪氨基团的自交联快速形成水凝胶。而相同条件下,环状多肽(cRGDfk)的引入能够显着提高材料的溶液-凝胶转变速率和凝胶的强度。此外,细胞实验证明,透明软骨细胞在水凝胶表面黏附3天后,相比于PLG-g-TA水凝胶,PLG-g-TA/RGD水凝胶表面观察到更多的细胞黏附;将透明软骨细胞包载于水凝胶内部分别培养1/4/7天后,细胞在PLG-g-TA/RGD水凝胶内增殖效率明显高于PLG-g-TA水凝胶对照组。在以上的实验中,该水凝胶材料展现出良好的生物相容性。综上所述,cRGDfk的引入,促进了透明软骨细胞的黏附效率,提升了PLG-g-TA水凝胶材料在叁维细胞培养方面的应用潜力。(本文来源于《吉林大学》期刊2019-04-01）
刘汨,谢杨丽,黄俊兰,张若彬,孙先定[10]（2019）在《不同声学参数的低强度脉冲超声对软骨细胞活性及培养骨胚生长的影响》一文中研究指出目的探讨低强度脉冲超声(low-intensity pulsed ultrasound, LIPUS)对体外培养软骨细胞活性、增殖、分化和凋亡以及骨组织生长的影响。方法分离新生3～5 d C57BL/6J小鼠的软骨细胞和胚胎期18.5 d小鼠跖骨,分为对照组(未处理组)及3种LIPUS处理组,其声强度和占空比的参数为:LIPUSⅠ,30 mW/cm~2-20%;LIPUSⅡ,30 mW/cm~2-40%;LIPUSⅢ,50 mW/cm~2-20%;其余参数为:中心频率1.5 MHz,脉冲重复频率1 KHz,处理时间20 min/d;分别用CCK-8、EdU掺入及TUNEL检测软骨细胞的活性变化、增殖、凋亡;定量RT-PCR检测蛋白聚糖(Aggrecan,Acan)、Ⅱ型胶原(CollagenⅡ,ColⅡ)、Ⅹ型胶原(CollagenⅩ,ColⅩ)等软骨基质相关基因表达;采集图像后测量跖骨长度,计算跖骨全长增长率、软骨增长率。结果 3种参数的LIPUS处理能促进软骨细胞的活性和增殖,抑制软骨细胞凋亡,其中LIPUSⅡ组效果最明显;定量RT-PCR结果显示:各处理组软骨细胞的Acan、ColⅡ的mRNA表达均较对照组明显增高,ColⅩ表达降低(P<0.05);跖骨长度计算结果显示:LIPUSⅡ、Ⅲ组软骨和全长增长率均显着高于对照组(P<0.01),而LIPUSⅠ组与对照组无明显差异。结论 LIPUS可能通过促进软骨细胞活性、增殖以及细胞外基质合成,抑制细胞凋亡,加快骨组织生长,且效果与超声参数有关;其中声强度30 mW/cm~2、占空比40%的LIPUS作用最明显。(本文来源于《第叁军医大学学报》期刊2019年10期）
软骨细胞培养论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
制备了一种基于聚谷氨酸-g-酪胺/cRGDfk(PLG-g-TA/RGD)的新型酶催化交联水凝胶,用于兔透明软骨细胞黏附和叁维细胞的培养. PLG-g-TA/RGD聚合物材料在辣根过氧化物酶(HRP)和过氧化氢(H_2O_2)存在下,能够通过酪氨基团的自交联快速形成水凝胶.环状多肽(cRGDfk)的引入能够显着提高材料的溶液-凝胶转变速率和凝胶强度.透明软骨细胞在水凝胶表面黏附3 d后,在PLG-g-TA/RGD水凝胶表面有更多的细胞黏附;将透明软骨细胞包裹在水凝胶内培养1, 4, 7 d后,细胞在PLG-g-TA/RGD水凝胶内增殖效率明显高于对照组PLG-g-TA水凝胶.细胞实验结果表明,该水凝胶材料具有良好的生物相容性. cRGDfk的引入,促进了透明软骨细胞的黏附和增殖,显示了PLG-g-TA/RGD水凝胶材料在叁维细胞培养方面的应用潜力.
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
软骨细胞培养论文参考文献
[1].黄永明,黄启明,刘焱杰,王竣,曹振武.TDP43慢病毒载体转染人脐带间充质干细胞与软骨细胞共培养后的增殖与凋亡[J].中国组织工程研究.2020
[2].文静,徐志民,齐德胜,王佳玉,于双江.PLG-g-TA/RGD酶催化交联水凝胶用于透明软骨细胞黏附和叁维细胞培养[J].高等学校化学学报.2019
[3].张枫,张燕,赵玉蒙,胡锦涛,殷红.不同硒浓度培养的一株链格孢霉产物对兔软骨细胞的影响[J].基因组学与应用生物学.2019
[4].杜国庆,桑晓文,王楠,石瑛,熊轶喆.大鼠半月板纤维软骨细胞的体外培养和生物学特征鉴定[J].现代生物医学进展.2019
[5].魏钰,魏民.人骨关节炎软骨细胞的体外分离与培养[J].中国组织工程研究.2019
[6].刘小利,袁小燕.电场对体外培养软骨细胞的影响[J].中国医药指南.2019
[7].孙恒,马世泽,蒋海越,刘霞,滕利.耳郭软骨细胞微载体的体外叁维动态培养[J].中国组织工程研究.2019
[8].孙恒,蒋海越,马世泽,刘霞,滕利.左旋聚乳酸多孔微球体外动态培养耳郭软骨细胞的研究[J].组织工程与重建外科杂志.2019
[9].文静.PLG-g-TA/RGD酶催化交联水凝胶用于透明软骨细胞黏附和叁维细胞培养的研究[D].吉林大学.2019
[10].刘汨,谢杨丽,黄俊兰,张若彬,孙先定.不同声学参数的低强度脉冲超声对软骨细胞活性及培养骨胚生长的影响[J].第叁军医大学学报.2019
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