导读:本文包含了克隆形成率论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:干细胞,细胞,缬氨酸,生殖细胞,角膜,胃癌,生物学。
克隆形成率论文文献综述
马婧[1]（2014）在《猪原始生殖细胞的生物学特性及bFGF对其克隆形成率的影响》一文中研究指出原始生殖细胞(Primordial germ cells,PGCs)经体外培养后可形成胚胎生殖细胞(Embryonic germ cells, EGCs)。胚胎发育初期,单能性的PGCs向生殖嵴迁移的同时大量增殖,进入生殖嵴后,PGCs经历了表观遗传重编程并最终分化为配子；在体外适宜的培养条件下,PGCs向生殖细胞的特化被阻断,重编程为能够自我更新且具多向分化潜能的EGCs。目前,对于该过程机制的研究主要集中在小鼠上,猪上的报道多是关于EGC建系的尝试和PGC特化相关的表观遗传学调控的研究,而对于猪PGCs本身生物学特性、特别是其重编程过程中多能性、生殖系标志基因表达模式的研究鲜有报道。然而,该方面的探索不仅有利于猪EGCs的最终建系,还对猪生殖细胞体内发育机制的阐述具有重要意义。鉴于此,本课题以猪PGC为研究对象,探索了PGCs体外重编程为EGCs过程中的生长行为变化,多能性、生殖系标志基因及信号通路受体的表达模式,以及bFGF在该过程中的作用,从而为探索猪PGCs体外重编程的作用机理和最终获得具有多能性且稳定传代的EGCs提供理论基础。主要研究结果如下：(1)通过组织切片的HE染色观察到在24天的胚胎中,生殖嵴呈狭长状且紧贴在中肾内层；在26天的胚胎中,生殖嵴变厚,呈现微突起,此时生殖嵴开始与中肾分离；在28天的胚胎中,生殖嵴发育成梭形,呈隆起状,此时生殖嵴已经完全脱离中肾形成独立的组织结构,并且开始两性分化；在30天的胚胎中就可以观察到生殖嵴向雌雄个体的生殖腺发育。(2)在无血清的培养液中添加抑制分化的细胞因子培养新鲜分离的PGCs,5天后可形成EGCs样的克隆；在自发分化实验中,克隆可向神经样的细胞、成纤维细胞样的细胞、上皮样的细胞分化,也可在体外形成拟胚体；在多能性基因检测中,免疫荧光结果显示,EGCs样克隆的Oct4、Sox2、Nanog、SSEA-3均呈阳性表达,RT-PCR结果显示,EGCs样克隆的Oct4、Sox2、Nanog、C-myc、Klf4的表达水平显着高于猪胎儿成纤维细胞；在生殖系标志基因检测中,免疫荧光结果显示,Stella在EGCs样克隆中表达,而Blimpl不表达,RT-PCR结果显示,EGCs样克隆中Blimpl的表达显着低于猪胎儿成纤维细胞,而Ifitm3的表达显着高于中猪胎儿成纤维细胞,Stella和Nanosl的表达量在二者中的差异不显着。(3)设定叁组不同的培养液,第一组培养液中不含任何生长因子；第二组培养液中仅含有Lif和SCF细胞因子；第叁组培养液含有Lif、SCF和bFGF叁种细胞因子。以相同密度接种新鲜分离的PGCs于这叁组培养液中,发现在第一组培养液中几乎没有克隆产生；在第二组培养液中有少量的克隆产生；在第叁组培养液,产生的克隆数较多,平均一个生殖嵴的PGCs可形成大约26个的克隆。随后我们对bFGF对PGCs的克隆形成率进行了统计,发现克隆形成率依赖于bFGF浓度及添加时间。在培养液中添加5ng/ml bFGF时,克隆形成数达到最高值：在0d时添加bFGF,PGCs形成的克隆数最多。为了验证bFGF的时间依赖效应,将bFGF在不同时间点撤除,同时加入bFGF的抑制剂,结果发现bFGF还具有抑制PGCs凋亡的作用,随后进行的细胞凋亡检测也验证了此结论。综上所述,本研究初步探索了猪PGCs的生物学特性,并发现bFGF对PGCs体外重编程具有促进作用,同时还具有抑制PGCs在体外培养过程中凋亡的作用,为体外获得真正意义上的ESCs提供了实验及理论基础。(本文来源于《东北农业大学》期刊2014-06-01）
崔馨,贺翔鸽,赵玲,宗兆文[2]（2004）在《EGF与bFGF单独及联合应用对原代培养的兔角膜缘干细胞克隆形成率的影响》一文中研究指出目的 了解单独及联合应用表皮生长因子 (epidermalgrowthfactor ,EGF)和碱性成纤维细胞生长因子 (b fibrob lastgrowthfactor ,bFGF)对原代培养的兔角膜缘干细胞体外增殖的促进作用。方法 进行兔角膜缘干细胞原代培养 ,用克隆形成率和蛋白质免疫印迹方法检测单独及联合应用不同质量浓度EGF与bFGF对干细胞增殖力的影响。结果 角膜缘干细胞在本培养条件下能够正常生长。单独应用时 ,质量浓度为 10ng/ml的EGF和 2 0ng/ml的bFGF对干细胞的促增殖作用最强 (P <0 0 1) ,10ng/ml的EGF与 2 0ng/ml的bFGF联合应用可达到最佳的促干细胞增殖作用。蛋白质免疫印迹检测也得到了相符的结果。结论 体外单独及联合应用EGF与bFGF对原代培养的兔角膜缘干细胞的增殖能力有明显的促进作用 ,为提供大量的角膜缘干细胞以治疗眼表疾病提供了实验基础。(本文来源于《第叁军医大学学报》期刊2004年20期）
黄镇,金国华,张新化,田美玲,秦建兵[3]（2002）在《提高成年大鼠神经干细胞单克隆形成率的方法》一文中研究指出目的 探索提高神经干细胞单克隆形成率的方法并证实所分离培养的神经干细胞仍具有多分化潜能。 方法 对神经干细胞单克隆方法进行改良 ,即在单克隆培养液中加入 1 2原代克隆培养液。将所得到的单细胞克隆球消化、分离、增殖成大量的神经干细胞球 ,用含血清的DMEM分化培养液促其分化。 14d后 ,分别用神经元和胶质细胞的特异性标记物MAP 2标记神经元、GFAP标记星形胶质细胞和CNP标记少突胶质细胞。 结果平均每块含 1 2原代克隆培养液的 96孔培养板中有 2～ 3只孔可形成克隆球 ,而含纯新鲜培养液的培养板中仅 0 5～ 1 0只孔可形成克隆球。这些单细胞克隆球增殖后得到的大量亚细胞系克隆球分化后分别呈MAP 2、GFAP和CNP免疫荧光阳性。 结论 单细胞克隆实验中加入 1 2原代克隆培养液可提高神经干细胞的单克隆形成率 ,单克隆球增殖后得到的大量亚细胞系克隆球亦具有多分化潜能。(本文来源于《解剖学报》期刊2002年06期）
王建六,李文锦,钱和年,傅天云,韦平[4]（1995）在《适时应用饲养细胞提高杂交瘤细胞克隆形成率的探索》一文中研究指出适时应用饲养细胞提高杂交瘤细胞克隆形成率的探索王建六，李文锦，钱和年，傅天云，韦平（北京医科大学人民医院妇癌研究所，北京１０００３４）本文通过改变饲养细胞加人时间及数量，来研究杂交瘤细胞６Ｂｌｌ的克隆化形成率。１材料和方法杂交瘤细胞系６Ｂｌｌ是我室制...(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊1995年02期）
季峰,胡放,黄怀德,杨玉康[5]（1993）在《L-缬氨酸浓度对胃癌细胞生长、克隆形成率及膜通透性的影响》一文中研究指出通过细胞计数、蛋白合成率、克隆形成率及培养基中乳酸脱氢酶(LDH)活力测定,观察L-缬氨酸(L-Val)浓度对培养胃癌细胞(MKN_(45))及对照细胞(纤维母细胞IMR-90)的影响,发现将L-Val减少至标准MEM(Minimum Eagle Medium)L-Val浓度(4.6 mg/100 ml)的1/16或1/8时,胃癌细胞计数、蛋白合成率及克唐形成率显着降低;而培养基中LDH活力显着上升(P<0.05),纤维母细胞则无类似变化。L-Val浓度加倍或剥夺MEM中L-亮氨酸或L-蛋氨酸对这两种细胞这些特性均无影响。上述结果为配制胃癌不平衡氨基酸治疗液提供了基础。(本文来源于《实用肿瘤杂志》期刊1993年04期）
张遵真[6]（1991）在《不同饲养细胞对地鼠胚胎细胞克隆形成率的影响(摘要)》一文中研究指出据报道,不同的饲养层细胞对助长细胞克隆形成率(Colony efficiency,CE)的能力不同,在叙利亚地鼠胚胎(SHE)细胞短期转化试验中,CE的高低直接影响到试验的敏感性。为了寻找能够提高SHE细胞CE的饲养层细胞,本研究试用V_(7?)细胞作饲养层,以提高SHE细胞CE,并与其他常用的饲养层进行了比较。(本文来源于《华西医科大学学报》期刊1991年02期）
克隆形成率论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的 了解单独及联合应用表皮生长因子 (epidermalgrowthfactor ,EGF)和碱性成纤维细胞生长因子 (b fibrob lastgrowthfactor ,bFGF)对原代培养的兔角膜缘干细胞体外增殖的促进作用。方法 进行兔角膜缘干细胞原代培养 ,用克隆形成率和蛋白质免疫印迹方法检测单独及联合应用不同质量浓度EGF与bFGF对干细胞增殖力的影响。结果 角膜缘干细胞在本培养条件下能够正常生长。单独应用时 ,质量浓度为 10ng/ml的EGF和 2 0ng/ml的bFGF对干细胞的促增殖作用最强 (P <0 0 1) ,10ng/ml的EGF与 2 0ng/ml的bFGF联合应用可达到最佳的促干细胞增殖作用。蛋白质免疫印迹检测也得到了相符的结果。结论 体外单独及联合应用EGF与bFGF对原代培养的兔角膜缘干细胞的增殖能力有明显的促进作用 ,为提供大量的角膜缘干细胞以治疗眼表疾病提供了实验基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
克隆形成率论文参考文献
[1].马婧.猪原始生殖细胞的生物学特性及bFGF对其克隆形成率的影响[D].东北农业大学.2014
[2].崔馨,贺翔鸽,赵玲,宗兆文.EGF与bFGF单独及联合应用对原代培养的兔角膜缘干细胞克隆形成率的影响[J].第叁军医大学学报.2004
[3].黄镇,金国华,张新化,田美玲,秦建兵.提高成年大鼠神经干细胞单克隆形成率的方法[J].解剖学报.2002
[4].王建六,李文锦,钱和年,傅天云,韦平.适时应用饲养细胞提高杂交瘤细胞克隆形成率的探索[J].细胞与分子免疫学杂志.1995
[5].季峰,胡放,黄怀德,杨玉康.L-缬氨酸浓度对胃癌细胞生长、克隆形成率及膜通透性的影响[J].实用肿瘤杂志.1993
[6].张遵真.不同饲养细胞对地鼠胚胎细胞克隆形成率的影响(摘要)[J].华西医科大学学报.1991
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