I3C对血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响

杨刚^[1]2004年在《I3C对血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响》文中研究表明目的: 观察不同浓度的吲哚-3-甲醇 (Indole-3-caibinol I3C)对培养的血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖和凋亡的影响，为利用I3C防止PCI术后血管再狭窄（restenosis RS）提供基础实验依据。方法：培养基中加入不同浓度 I3C的VSMCs组为试验组，不加者为对照组。用MTT比色法描述不同浓度I3C作用VSMCs 120小时的生长情况；通过平板克隆实验观察I3C作用3周对细胞增殖的影响；PCNA细胞免疫化学法和TUNEL法分别用于检测I3C作用72小时后对VSMCs增殖和凋亡的影响。实验组与对照组比较用Dunnett t检验（q′检验）， p<0.05 为有显着性差异。结果：1. MTT法测定VSMCs的生长曲线： 各浓度的I3C对细胞的生长都产生了不同程度的抑制效应。加药120小时后，50μM组O.D值较对照组明显降低(0.733±0.029 vs 0.821±0.014 p<0.05)，而且I3C浓度越高，相应O.D值降低越显着（p<0.01）。同时120小时内I3C使VSMCs的生长曲线平坦，其中以400μM组最明显。2．平板克隆实验：I3C作用于VSMCs 3周可明显抑制细胞克隆的形成。25μM组形成克隆比对照组少（25±2，69±1，143±4 vs 35±1，81±1，173±2 p<0.05）；I3C浓度越高，形成的克隆数就越少；3．PCNA阳性率的测定：I3C 作用72小时后，50-400μM 组中VSCMs 的PCNA阳性率与对照组比较出现明显降低：75.3±2.5％，46.5±3.3％，37.6±1.8％，25.2±2.3％ vs 96.8±1.7％， (p<0.05或0.01)。4．TUNEL法发现I3C作用72小时后，50-400μM组VSMCs凋亡率较对照组显着增加(24.7±3.3％，40.5±1.5％，61.6±2.1％，80.5±2.3％ vs 6.5±0.9％， p<0.05或0.01)。5．DMSO对VSMCs的生长动力学无明显影响, 800μM时各试验中细胞36h内全部死亡。结论： 在72小时的观察期内，50-400μM的I3C可显着抑制VSMCs的增殖并诱导其出现明显的凋亡；而更低浓度（25μM）的I3C在较长（3周）的观察期内，可明显减少细胞克隆的形成。当浓度达到800μM时，I3C对细胞有明显的毒性作用。本实验表明一定剂量范围的I3C对VSMCs生长有显着抑制且呈浓度依赖关系，提示I3C是一种潜在的防止RS的药物。

杨刚, 黄晶, 江永红, 苟怀宇, 邓昌明^[2]2004年在《I3C对血管平滑肌细胞生长动力学的影响》文中指出目的观察吲哚-3-甲醇(indole-3-carbinol I3C)对血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖和凋亡的影响,探讨13C防治血管再狭窄(RS)的可行性。方法将VSMCs置于含有10-800μM I3C的培养基中进行培养。分别在加药后12、24、36、48、72、96、120小时用MTT支检测VSMCs的增殖活力;记数VSMCs在I3C作用3周后形成的克隆数;细胞免疫化学法观察I3C作用细胞72小时后细胞增殖核抗原(PCNA)的表达;用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测药物作用72小时后VSMCs的凋亡率。结果加药120小时后50-400μM组MTT A值显着低于对照组(0.783±0.029,0.682±0.035,0.566±0.024,0.363±0.016vs.0.821±0.014,P<0.05或P<0.01),各实验组细胞的生长曲线均有减缓且随I3C浓度的增加,减缓更趋明显,其中以400μM组细胞生长减缓最为显着。药物作用72小时后50μM以上药物组VSMCs中PCNA阳性表达率低于对照组[(75.3±0.6)%,(46.5±0.3)%,(87.6±0.5)%,(25.26±0.3)%vs.(96.8±0.7)%,P<0.05或0.01]。50μM组及更高浓度组于加药72小时后都出现显着的VSMCs凋亡[(34.7±3.3)%,(50.5±3.5)%,(61.6±3.1)%,(80.5±2.3)%vs.(3.5±0.5)%,P<0.05或0.01];细胞克隆实验则显示药物作用3周后,25μM组与对照比较即有显着差异(25,53,109vs.35,79,173,P<0.05)。各实验中当I3C浓度达到800μM时VSMCs在36小时内全部死亡。结论I3C对抑制VSMCs的增殖和诱导细胞的凋亡有显着的作用;在一定范围内,I3C的浓度越高对VSMCS的增殖抑制和凋亡诱导作用就越强;提示浓度合适的I3C可能防止再狭窄的发生。

李莉, 高大中, 江永红, 黄晶, 刘地川^[3]2007年在《吲哚-3-甲醇对大鼠颈总动脉球囊损伤后Bcl-1、NF-κB和Bcl-X/L蛋白表达的影响》文中研究说明目的研究吲哚-3-甲醇(I3C)对球囊损伤术后大鼠颈动脉血管平滑肌细胞(VSMC)Bcl-1、NF-κB和Bcl-X/L蛋白表达的影响,探讨I3C诱导VSMC凋亡的机制。方法建立35只SD大白鼠颈动脉损伤动物模型,分为对照组(n=5):不给药;实验组(n=30):给予I3C(I3C给药量为12.5、25mg/d和50mg/d,给药时间为4d和7d,共6个亚组,n=5)。术后14d取材。免疫组化检测Bcl-1、NF-κB和Bcl-X/L蛋白的表达。结果术后14d,各组Bcl-1、NF-κB和Bcl-X/L蛋白表达减少。与对照组比较,Bcl-1和Bcl-X/L蛋白表达的25mg7d组,50mg4d组和50mg7d组差异有显着性(P<0.05);NF-κB蛋白表达12.5mg4d组和对照组无显着性差异(P>0.05),其余均有统计学意义(P<0.05)。给药时间和剂量增加时,Bcl-1、NF-κB和Bcl-X/L蛋白表达与对照组差异非常显着(P<0.01)。结论I3C诱导血管损伤后VSMC凋亡的机制主要是通过PI3K-PKB/Akt细胞信号传导途径,下调关键性核因子NF-κB和凋亡抑制蛋白Bcl-X/L表达。

参考文献：

[1]. I3C对血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响[D]. 杨刚. 重庆医科大学. 2004

[2]. I3C对血管平滑肌细胞生长动力学的影响[C]. 杨刚, 黄晶, 江永红, 苟怀宇, 邓昌明. 中华医学会心血管病分会第八次全国心血管病学术会议汇编. 2004

[3]. 吲哚-3-甲醇对大鼠颈总动脉球囊损伤后Bcl-1、NF-κB和Bcl-X/L蛋白表达的影响[J]. 李莉, 高大中, 江永红, 黄晶, 刘地川. 第叁军医大学学报. 2007

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