威海市立医院化疗二科
摘要：目的：观察CIK细胞免疫治疗在晚期恶性肿瘤患者中的临床疗效。方法：选取我院收治的晚期恶性肿瘤患者34例，均采取CIK细胞免疫治疗，观察临床疗效。结果：CIK细胞治疗后T细胞亚群均有改变，差异有统计学意义（P＜0.05）。34例临床疗效有效率为79.4%。CIK细胞回输中有4例出现发热，10例患者出现乏力、全身肌肉酸痛等症状，1例出现血压升高。结论：自体的CIK细胞过继性免疫治疗可以改善晚期恶性肿瘤患者的细胞免疫功能，从而提高患者的生活质量。
关键词：CIK细胞免疫治疗；晚期恶性肿瘤；临床疗效
【abstract】objective：toobservetheCIKcellsimmunotherapyclinicalcurativeeffectinpatientswithlatemalignanttumor.Selectionmethods：ourhospitalpatientswithlatemalignanttumor34cases，alladoptimmunotherapyCIKcells，toobservetheclinicalcurativeeffect.Results：thetreatmentofCIKcellsafterTcellsubgrouphasthechange，thedifferencewasstatisticallysignificant（P<0.05）.34casesofclinicalcurativeeffectofeffectiveratewas79.4%.CIKcellsbacktolosein4casesoffever，10patientswithsymptomssuchasfatigue，systemicmusclesoreness，1caseofbloodpressure.Conclusion：autologousofCIKcellsadoptiveimmunotherapycanimprovecellularimmunefunctioninpatientswithlatemalignanttumor，soastoimprovethequalityoflifeofpatients.
【keywords】immunotherapyCIKcells；Latemalignanttumor；Clinicalcurativeeffect
细胞过继性免疫治疗是将具有强大杀瘤活性的免疫细胞在体外扩增后回输给患者的治疗方法，已成为继手术、放疗、化疗后对肿瘤患者进行综合治疗的重要手段[1]。CIK细胞是一类体外增殖能力强、杀瘤活性高、对多重耐药肿瘤细胞敏感的广谱抗瘤免疫活性细胞。它可以在没有损伤机体免疫系统结构和功能的前提下，直接杀伤肿瘤细胞，并可调节和增强机体的免疫功能。特别适合不能耐受手术、化疗、放疗的患者，因而成为肿瘤治疗的重要辅助方法。我科自2009年10月-2010年4月为34例老年晚期癌症患者进行了CIK细胞治疗，现将结果报告如下。
1资料与方法
1.1一般资料
本组34例患者均经病理或细胞学检查确诊为恶性肿瘤。其中肺癌18例，鼻咽癌2例，乳腺癌4例，肠癌4例，宫颈癌4例，前列腺癌2例。按照国际抗癌联盟（UICC）肿瘤分期标准，本组均为III期或IV期病例。男性20例，女性14例。年龄64-82岁，平均69.8岁。在行CIK细胞治疗前有28例进行过化疗，占82.4%，有6例进行过放疗，占17.6%。放化疗与CIK细胞治疗间隔在2周以上。
1.2方法
1.2.1CIK细胞培养与回输
采集患者外周血单个核细胞，经淋巴细胞分离液进一步分离纯化。用pH7.4的PBS洗涤3次，将细胞置于含人血清的培养基中，初始细胞密度为2.5±2×106个/ml，在37℃5%CO2条件下培养。第0d加入生长培养基1，1FN-γ1000U/ml，24h后加入生长培养基2、人重组IL-1100U/ml、人重组IL-21000U/ml，抗CD3单抗100ng/ml，每2-3d更换培养基1次，补加IL-1，IL-2，并调整细胞密度为1-1.5×106个/ml，培养至第9d，经细菌、霉菌等微生物培养阴性，革兰氏染色无菌生长后再收集细胞，培养12-14d后，将收集培养的CIK细胞用无菌生理盐水洗涤3次，每袋分别加入5%人血白蛋白和IL-21000U/ml，配成250ml液体静脉回输。1-2d回输一次，每次回输细胞数量在1.5-2×109连输3次为一个疗程，细胞总数在4.5-6×109之间。
1.2.2免疫学、肿瘤标志物及其他临床相关指标的检测
治疗前后常规检查患者体温、血压、肝肾功能等指标，用流式细胞仪测定患者外周血CD3、CD4、CD8及NK细胞中CD16、CD56等免疫学指标。
1.3观察指标
1.3.1疗效评价
患者治疗结束后4周进行疗效评定，按WHO实体瘤客观疗效评定标准评定疗效[2]：完全缓解（CR）；部分缓解（PR）；轻度缓解（MR）；稳定（SD）；病情进展（PD）。有效率=CR+PR+MR。
1.3.2毒副反应观察
静脉回输付程中及回输后2h内密切观察患者是否出现发热、皮疹、乏力、肌肉酸痛、呕吐等毒副反应。
1.4统计学方法
数据采用专业SPSS17.0软件进行统计学分析处理。计数资料用率（%）表示，计量资料以±s表示，组间t检验，计数资料采用χ2检验，P＜0.05差异有统计学意义。
2结果
2.1CIK细胞治疗前后T细胞亚群变化
CIK细胞治疗后T细胞亚群均有改变，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1
2.2临床疗效
34例中CRl例，PR4例，MR22例，SD5例，PD2例，有效率为79.4%。治疗后KPS评分25例提高，6例稳定，3例下降，提高率73.5%。食欲、体力改善31例（91%），睡眠好转28例（82.3%），疼痛减轻26例（76.5%）。
2.3毒副反应
CIK细胞回输中有4例出现发热，体温在37.5℃-38.5℃之间，持续2-4h自然消退，无高热患者出现。10例患者出现乏力、全身肌肉酸痛等症状，均能耐受，未做特殊处理。仅1例出现血压升高，经对症处理后血压降至正常。未观察到低血压、肺水肿、过敏性休克等严重不良反应。
3讨论
CIK细胞是将人外周血单个核细胞在体外用多种细胞因子共同培养一段时间后获得的一群异质细胞，具有T淋巴细胞强大的抗瘤活性和非主要组织相容性复合体（MHC）限制性杀瘤的特点[3]。可特异地聚集于肿瘤局部发挥抗肿瘤作用。CIK细胞通过下列几种途径杀灭肿瘤：①通过黏附因子LFA/ICAM-I途径与肿瘤细胞结合后，分泌含大量BLT酷酶的颗粒，这些颗粒能穿透靶细胞膜，导致肿瘤细胞的裂解。②CIK细胞能分泌IL-2、IL-6、TNF-α及GM-CSF等一些细胞因子，增强细胞毒作用，直接抑制肿瘤细胞的增殖[4]。通过对免疫系统的调节来间接杀伤瘤细胞。CIK细胞能对肿瘤细胞持久地发挥溶瘤作用。
肿瘤患者由于免疫功能受损严重，其外周血中CIK细胞数量极低，必须通过细胞生物学方法在体外大量扩增达到一定的数量级后回输方可达到抗肿瘤作用[5]。本研究表明，CIK细胞回输后，患者外周血CD3+、CD4+上升，CD8+下降，CD4+/CD8+比值升高，NK细胞明显升高。说明CIK细胞治疗能增强机体的细胞免疫功能。同时，CIK细胞还通过调节机体其他免疫细胞的功能使患者整体免疫功能趋向平衡。
本组患者经CIK细胞治疗后，临床疗效方面改善，可能与输人的CIK细胞在体内分泌的一些细胞因子的作用有关。CIK细胞回输过程中毒副反应轻微。
临床研究表明，自体CIK细胞过继性免疫治疗能明显提高肿瘤患者T细胞免疫功能，这对肿瘤患者极其低下的免疫功能具有重要意义。有利于控制肿瘤生长，改善患者的临床症状，提高生活质量，本身毒性反应轻微。是一种比较安全，无明显毒副作用的免疫治疗手段。
参考文献：
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