论文摘要
α-淀粉酶（α-amylase）是一类作用于淀粉内部水解其α-1,4糖苷键从而将淀粉水解为糊精、低聚糖和单糖的酶。该类酶已被广泛应用于面包生产及洗涤等工艺中。从分子水平上改造淀粉酶,以提高水解活力及催化效率,已经成为多年的目标,也具有重要的研究意义。以目前广泛应用的来源于解淀粉芽孢杆菌的中温中性淀粉酶BAMYA出发,通过理性设计在该淀粉酶的C端结构域设计突变位点,利用定点突变提高其水解活力,并在枯草芽孢杆菌中实现高效表达。野生型酶BAMYA的最适作用温度和pH分别为55℃和6.0,比活为6 835 U/mg。突变体BAMYA-L473K/K474H/N475K最适作用温度为60℃,较野生型提高了5℃,作用的最适p H没有发生变化。突变体比活为10 148 U/mg,比野生型提高48%。野生型BAMYA和突变体BAMYA-L473K/K474H/N475K的Km值、催化效率分别为3.58 mg/mL和2.21 mg/mL,以及1 577 mL/（s·mg）和4 760 mL/（s·mg）。催化效率较野生型相比提高了2倍以上。该突变体应用于工业生产可有效提高其水解效率,降低应用成本。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 邱锦,黄火清,姚斌,罗会颖
关键词: 淀粉酶,定点突变,枯草芽孢杆菌,催化效率
来源: 生物技术通报 2019年09期
年度: 2019
分类: 基础科学,农业科技,工程科技Ⅰ辑
专业: 生物学,一般化学工业
单位: 中国农业科学院饲料研究所
基金: “十三五”重点研发计划(2016YFD0501409)
分类号: TQ925.1
DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2019-0234
页码: 134-143
总页数: 10
文件大小: 2910K
下载量: 465
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