一、大鼠心肌钙黏蛋白表达的增龄变化（论文文献综述）
王燕[1]（2021）在《基于代谢/蛋白组学及网络药理学研究补阴补阳剂的抗衰老作用》文中研究指明目的基于UPLC-QTOF/MS代谢组学和i TRAQ定量蛋白质组学技术,观察补阳剂金匮肾气丸与补阴剂六味地黄丸对自然衰老小鼠内源性代谢物和差异蛋白的影响,分析金匮肾气丸和六味地黄丸对自然衰老小鼠的调节作用。结合网络药理学及分子对接技术,通过多数据库挖掘,进一步构建补阴补阳方剂-衰老靶点多层次网络,多维度比较分析补阳剂金匮肾气丸与补阴剂六味地黄丸干预衰老的作用特点。方法基于课题组前期研究,选用3月龄小鼠为低龄组,20月龄自然衰老小鼠随机分为老龄组、六味地黄丸组和金匮肾气丸组,每组20只（雌、雄各10只）。六味地黄丸组给药量9.75 g/kg,金匮肾气丸组给药量10.53 g/kg,低龄组、老龄组灌胃同体积的生理盐水。连续灌胃30天后,制备血浆、脾、肾组织样本用于UPLC-Q-TOF/MS代谢组学分析,制备肝组织样本用于i TRAQ定量蛋白质组学分析。网络药理学研究选用TCMSP数据库获取金匮肾气丸和六味地黄丸药物相关化学成分对应的靶点,分别在Gene Cards、OMIM、Pharm GKB、Drug Bank数据库搜索衰老靶点,通过Cytoscape＿v3.7.0构建补阴补阳方剂-衰老靶点多层次网络,探究补阴补阳方剂与衰老的关联性,选择两首补益方中与靶点联系较多的共同成分及共同靶蛋白,应用Auto Dock Vina软件进行分子对接。最后结合生物信息学功能分析探讨补阴剂六味地黄丸与补阳剂金匮肾气丸调节衰老的作用机制特点。结果1代谢组学研究发现,衰老进程中各组织样本中代谢物质及其富集的代谢通路均发生改变,且不同组织样本中衰老代谢标志物及通路存在差异。雌鼠血浆、脾和肾组织样本中分别鉴定筛选出24、14和20个代谢标志物;雄鼠血浆、脾和肾组织样本中分别鉴定筛选出22、26和34个代谢标志物。对于雌鼠,脾和肾组织中相同标志物有肌苷、9,10-环氧十八烯酸、鞘氨醇3个;血浆和脾组织中相同标志物是D-赤藓糖-4-磷酸;血浆和肾组织中相同标志物是L-二氢乳清酸。对于雄鼠,脾和肾组织中相同标志物有L-谷氨酸、泛酸、焦谷氨酸、左旋棕榈酰肉碱4个;血浆和脾组织中相同标志物是二十二碳六烯酸。雌鼠脾和肾组织中相同代谢通路有8个;血浆和脾组织中相同代谢通路有4个;血浆和肾组织中相同代谢通路有5个,血浆、脾和肾组织中共同代谢通路有3个。雄鼠脾和肾组织中相同代谢通路有19个;血浆和脾组织中相同代谢通路有7个;血浆和肾组织中相同代谢通路有7个,血浆、脾和肾组织中共同代谢通路有6个。2蛋白质组学研究发现,衰老进程中差异蛋白及其富集的通路均发生改变,雌鼠低龄组（3M）与老龄组（20M）对比的肝组织中上调的差异蛋白163个,下调的差异蛋白97个;雄鼠低龄组（3M）与老龄组（20M）对比的肝组织中上调的差异蛋白165个,下调的差异蛋白91个。比较不同性别小鼠的差异蛋白,发现随着衰老进程,雌、雄鼠肝组织样本中均有155个共同差异蛋白表达上调、均表达下调的蛋白有63个。3六味地黄丸和金匮肾气丸对不同组织样本中衰老相关代谢标志物均有调节作用。对于雌鼠,六味地黄丸对血浆样本中13个衰老标志物有回调,脾组织样本中11个标志物有回调,肾组织样本衰老相关的标志性代谢物质中,六味地黄丸方对17个有回调;对于雄鼠,六味地黄丸对血浆样本中17个衰老标志物有回调,对脾组织样本中27个标志物有回调;雄鼠肾组织样本中,六味地黄丸回调的标志物有18个。金匮肾气丸能回调雌鼠血浆样本中10个衰老标志物、脾组织样本中12个标志物、肾组织样本中的15个衰老标志物;对于雄鼠,金匮肾气丸对血浆样本中20个衰老标志物有回调、对脾组织样本中25个标志物有回调、肾组织样本中的32个标志物有回调。4六味地黄丸和金匮肾气丸对衰老相关差异蛋白均有调节作用。在雌鼠肝组织样本中,六味地黄丸回调117个衰老相关差异蛋白,雄鼠肝组织样本中六味地黄丸回调46个的衰老相关差异蛋白;金匮肾气丸对雌鼠的115个衰老相关差异蛋白有回调作用,对雄鼠的58个衰老相关差异蛋白有回调作用。对于雌鼠,六味地黄丸和金匮肾气丸共同上调的衰老相关蛋白有44个,共同下调的衰老相关蛋白有66个;对于雄鼠,六味地黄丸和金匮肾气丸共同上调的衰老相关蛋白有3个。六味地黄丸和金匮肾气丸调节自然衰老雌鼠的共同通路有14个,调节雄鼠的衰老相关蛋白富集共同通路有4个。5网络药理学研究发现,六味地黄丸中46个主要成分对应靶基因190个,其中有159个与衰老相关;金匮肾气丸中48个主要成分对应靶基因194个,其中有162个与衰老相关。六味地黄丸和金匮肾气丸抗衰老靶点均能通过参与细胞对缺氧的反应、对脂多糖的反应、凋亡过程的负调控、老化、血管生成的正调控、细胞衰老、血管内皮生长因子产生的正调控、蛋白质磷酸化、细胞对胰岛素刺激的反应等生物进程调节衰老进程。6分子对接研究发现,原癌基因c-Fos（FOS）与槲皮素（quercetin）,α-丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（AKT1）与薯蓣皂素（diosgenin）、山奈酚（kaempferol）、槲皮素（quercetin）,丝裂原活化蛋白激酶1（MAPK1）与槲皮素（quercetin）结合活性最强。结论1衰老进程中伴随代谢物质和蛋白的改变,且在不同组织不同性别存在差异。2补阴剂（六味地黄丸）和补阳剂（金匮肾气丸）对不同组织样本中衰老相关代谢标志物均有调节作用,两者调节作用有差异性。补阴剂（六味地黄丸）调节自然衰老雌鼠血浆、雄鼠脾组织、雌鼠肾组织样本中代谢标志物较补阳剂（金匮肾气丸）显着;补阳剂（金匮肾气丸）调节自然衰老雄鼠血浆、雌鼠脾组织和雄鼠肾组织样本中代谢标志物较补阴剂（六味地黄丸）显着。3补阴剂（六味地黄丸）和补阳剂（金匮肾气丸）对自然衰老小鼠肝组织样本中的衰老相关差异蛋白均有回调,均能通过干预老化、细胞黏附调节、蛋白质磷酸化、凋亡过程、心肌收缩、脂质代谢过程等生物进程调节衰老。代谢组学和蛋白质组学研究联合分析发现,六味地黄丸和金匮肾气丸共同调节的差异蛋白113个,与调节的共同代谢通路中72个代谢标志物存在生物信息学关联。4网络药理学研究发现,补阴剂六味地黄丸与补阳剂金匮肾气丸发挥抗衰老作用的主要靶点与细胞对缺氧的反应、凋亡过程的负调控、炎症反应、对脂多糖的反应、老化、细胞衰老、血管内皮生长因子产生的正调控等生物进程密切相关。分子对接结果提示两首方剂中的主要活性成分与FOS、TP53、MAPK1、AKT1、MYC、JUN、MTOR有较好的亲和力。蛋白质组学和网络药理学研究结果比较发现,抗衰老靶点/蛋白的共同富集通路有黏着斑、PI3K-Akt信号通路、HIF-1信号通路、甲状腺激素信号通路、阿尔茨海默病等9条通路。
许江城[2]（2017）在《4周龄幼龄大鼠环磷酰胺免疫抑制模型的建立及应用》文中研究说明由于幼龄个体与成年个体在药物代谢和药效方面不完全一致,使用成年动物模型获得的数据不足以支持幼龄个体用药评价。如今各国药物监管机构均推荐使用幼龄动物模型来研究和评价低年龄个体用药。为缓解幼龄动物模型的匮乏,本研究预期建立一个4周龄幼龄大鼠环磷酰胺免疫抑制模型,用于支持幼龄个体免疫调节药物开发评价工作。研究采用血液学、流式细胞学、免疫组织化学、组织病理学、Western Blot和RT-PCR等技术方法,首先根据模型大鼠临床表现、外周血细胞计数和胸腺系数变化探索建模条件。其次,通过对体重、外周血细胞数量、淋巴细胞亚群、免疫器官（脾脏、胸腺和淋巴结）、脾脏中CDKN1A因子蛋白表达量和基因相对表达量、肠道黏膜免疫指标等检测结果变化的分析,总结模型大鼠免疫指标的变化并与成年大鼠比较免疫变化的区别。最后,通过阳性药对模型进行验证和应用。研究获得以下结果:通过体重、外周血细胞计数和胸腺脏器系数三项指标筛选建模条件,确认环磷酰胺灌胃30 mg/kg隔日共2次为最佳建模条件。幼龄大鼠表现出明显免疫抑制和体重降低,且未见幼鼠死亡和其他严重副反应。免疫抑制模型建立后,CYP模型组4周龄幼龄大鼠与对照组相比,临床表现正常;生长发育显着抑制;外周血细胞数量如白细胞总数、嗜中性粒细胞和淋巴细胞数显着降低;淋巴细胞各亚型均严重抑制,其中B淋巴细胞降低比例最高;CDKN1A因子上调;胸腺、骨髓均表现显着抑制;肠道黏膜免疫方面,肠道sIgA分泌减少、派氏结数量降低、上皮内淋巴细胞数量减少、杯状细胞数量明显降低;变化差异具有统计学意义且几乎未见副作用。与成年大鼠相比较,免疫相关指标总体降速快且幅度大,恢复慢且程度低。使用G-CSF和匹多莫德作为阳性药对模型进行应用和验证。G-CSF给药组体重较模型组升高;表现出包括嗜中性粒细胞数和单核细胞等显着的粒细胞提升作用;显着提升脾脏脏器系数,增加派氏结数量;表现极强的NK细胞提升作用;降低CDKN1A基因表达量;对淋巴细胞促进作用有限。匹多莫德给药组体重较模型组升高;全面提升白细胞数量;对T、B、NK均有促进作用,且对NK细胞促进作用明显;CDKN1A基因表达量降低。模型通过验证,可以正确反应出G-CSF和匹多莫德免疫增强作用并与文献报道相符。本研究首次使用4周龄SD大鼠成功建立环磷酰胺诱导的免疫抑制幼龄动物模型。在幼龄大鼠中发现环磷酰胺同样通过上调细胞周期因子CDKN1A影响细胞周期、终止免疫系统细胞增值而引起免疫抑制的机制。研究中较系统的观察了机体固有免疫和获得性免疫的免疫抑制表现以及恢复情况。在同剂量条件下与成年大鼠相比较,幼龄大鼠免疫抑制程度强,恢复能力弱。最后初步系统评价模型大鼠肠道黏膜免疫结构及功能的变化,为黏膜免疫调节剂的研究提供支持。通过本研究,我们建立一个适用于幼龄个体免疫调节药物评价的幼龄大鼠环磷酰胺免疫抑制模型。
兰辛键[3]（2017）在《比较研究3、6、12月龄雄性小鼠蛋白质组的变化及四首补益剂的干预作用》文中研究说明目的:通过比较研究3、6、12月龄雄性小鼠肝脏蛋白质组的变化规律及四首补益剂对不同月龄小鼠差异蛋白的调节作用,初步阐明四首补益剂与增龄不同阶段相关证候的生物学基础,为全面解析衰老发生机制与防治措施提供新的理论依据和数据支持。方法:选取3月龄雄性ICR小鼠10只为青年对照组,6、12月龄雄性ICR小鼠各60只随机为四君子汤组、四物汤组、六味地黄丸（汤）组、金匮肾气丸（汤）组、维生素E组、空白对照组,每组10只,各给药组采用灌胃给药方式干预,青年对照组、6月空白组与12月空白组灌胃同体积比生理盐水。于给药第3 1天处死小鼠,取出肝脏,液氮速冻后立即转于零下80℃冰箱冻存备用。提取肝脏线粒体,以 iTRAQ技术为基础,联合LC-MS/MS质谱分析,通过UniProt release（2016-07）数据库筛选差异蛋白,对以上各组差异蛋白进行GO分析、KEGG pathway分析,对各组差异蛋白进行交集处理,以进一步筛选蛋白标志物。结果:空白组中3月龄与6月龄小鼠共鉴定到358个差异蛋白;6月龄与12月龄小鼠共鉴定到347个差异蛋白;3月龄与12月龄小鼠共鉴定到365个差异蛋白。6月龄组中四君子汤组与空白组鉴定到443个差异蛋白;四物汤组与空白组鉴定到412个差异蛋白;六味地黄丸（汤）组与空白组鉴定到406个差异蛋白;金匮肾气丸（汤）组与空白组鉴定到364个差异蛋白;维生素E组与空白组鉴定到370个差异蛋白。12月龄组中四君子汤组与空白组鉴定到336个差异蛋白;四物汤组与空白组鉴定到340个差异蛋白;六味地黄丸（汤）组与空白组鉴定到402个差异蛋白;金匮肾气丸（汤）组与空白组鉴定到373个差异蛋白;维生素E组与空白组鉴定到338个差异蛋白。经分析共筛选出97个与增龄的蛋白标志物,分别与空白组对比分析,各药物组有效调节的与其作用相关的差异蛋白,四君子汤组共32个,四物汤组共36个,六味地黄丸（汤）组共30个,金匮肾气丸（汤）共26个;维生素E组影响的与增龄相关的蛋白共8个。对97个与增龄相关的差异蛋白进行GO分析,发现共54个差异蛋白富集于35个与生长发育相关的生物学过程。其中四君子汤参与调节与生长发育相关的差异蛋白2 1个,四物汤参与调节与生长发育相关的差异蛋白24个,六味地黄丸（汤）参与调节与生长发育相关的差异蛋白17个,金匮肾气丸（汤）调节与生长发育相关的差异蛋白11个。对各组差异蛋白进行交集处理,四君子汤与四物汤共同调节的差异蛋白24个;六味地黄丸（汤）与金匮肾气丸（汤）共同调节的差异蛋白9个;金匮肾气丸（汤）与四君子汤共同调节的差异蛋白3个;六味地黄丸（汤）与四物汤共同调节的差异蛋白1个。结论:本文通过蛋白质组学技术研究3、6、12月龄ICR雄性小鼠肝脏中蛋白质组的改变,探寻增龄过程与生长发育相关的蛋白标志物,在此基础上,以四首补益剂为探针,通过分析四首补益剂对不同月龄小鼠蛋白质组的干预作用,探索增龄与气血阴阳失衡的相关性,得出以下结论:1.增龄过程机体的稳态逐渐失衡,本次实验中共鉴定到97个与增龄相关的差异蛋白,主要与机体的PI3K-Akt信号通路、脂肪酸代谢、过氧化物酶体合成通路、癌症通路、ECM-受体相互作用、PPAR信号通路、泛素-蛋白酶体系统、胰岛素信号通路、mTOR信号通路、长寿调节通路等相关。2.四君子汤、四物汤、六味地黄丸（汤）、金匮肾气丸（汤）可分别通过补气、补血、补阴、补阳的作用调节小鼠在增龄过程蛋白质组的改变。2.1补气方四君子汤调节的32个差异蛋白,主要富集于PI3K-AKT信号通路、过氧化物酶体通路、蛋白酶体、长寿调节通路、ECM受体相互作用等通路,改善了因增龄出现的与补气作用相关的生物学变化。2.2补血方四物汤调节的36个差异蛋白,主要富集于PPAR信号通路、FOXO信号通路、PI3K-AKT信号通路、长寿调节通路等,改善了因增龄出现的与补血作用相关的生物学变化。2.3补阴方六味地黄丸（汤）调节的30个差异蛋白,主要富集于PPAR信号通路、过氧化物酶体合成通路、ECM-受体相互作用通路、脂肪消化吸收通路等,改善了因增龄出现的与补阴作用相关的生物学变化。2.4补阳方金匮肾气丸（汤）调节的26个差异蛋白,主要富集于PPAR信号通路、过氧化物酶体通路、不饱和脂肪酸的生物合成等通路,改善了因增龄出现的与补阳作用相关的生物学变化。3.本实验中鉴定到97个与增龄相关的差异蛋白中,共54个差异蛋白富集于35个与生长发育相关的生物学过程,四首补益剂通过对不同差异蛋白的调节促进了机体的生长发育,其中四君子汤参与调节与生长发育相关的差异蛋白21个,四物汤参与调节与生长发育相关的差异蛋白24个,六味地黄丸（汤）参与调节与生长发育相关的差异蛋白1 7个,金匮肾气丸（汤）调节与生长发育相关的差异蛋白11个。4.对各组差异蛋白进行交集处理,发现四君子汤与四物汤共同调节的差异蛋白24个;六味地黄丸（汤）与金匮肾气丸（汤）共同调节的差异蛋白9个;金匮肾气丸（汤）与四君子汤共同调节的差异蛋白3个;六味地黄丸（汤）与四物汤共同调节的差异蛋白1个,提示气血阴阳之间具有一定内在联系,有待进一步研究。5.通过维生素E对增龄小鼠的干预作用,发现维生素E在蛋白质水平对6月龄、12月龄雄性ICR小鼠不具有明确的调节作用。
张民[4]（2017）在《AnxB9基因敲减联合规律运动对增龄果蝇心脏功能的影响》文中指出1研究目的实验采用UAS-Ga14系统对果蝇的Ca2+调控基因AnxB9进行表达调控,采用特定的果蝇运动装置对果蝇进行不同期段的规律运动干预,通过检测心脏功能相应指标的变化来研究AnxB9基因表达下降联合规律运动对增龄果蝇心脏功能的影响,探讨AnxB9基因表达下降运动心脏的适应变化和运动抗衰老功能。2研究方法将AnxB9品系雌蝇（w[1118];P{GD11750}v27493）分别与野生系w1118雄蝇和arm-Gal4雄蝇杂交,取F1代,分为对照组（AnB9/w1118）和敲低组（AnxB9/arm-Gal4）,又分别将对照组和敲低组各分为安静-对照组（1-42d-AnxB9/w1118）、安静敲低组（1-42d-AnxB9/arm-Gal4）、长训-对照组（2-42d-AnxB9/w1118）、长训-敲低组（2-42d-AnxB9/arm-Gal4）、晚训-对照组（28-42d-AnxB9/w1118）、晚训-敲低组（28-42d-AnxB9/arm-Gal4）,共6组。每组均收集处女蝇300只以上,恒温（25℃左右）,恒湿（50%左右）,12小时昼/夜循环交替光照饲养。根据计划中的运动方案采用果蝇运动装置对果蝇进行规律运动训练,保持运动负荷恒定不变,运动装置转速设定为0.2r/s,5天/周,2.5h/天,运动干预方案结束24h后取材。指标检测:通过qRT-PCR技术检测对照组（AnxB9/w1118）和敲低组（AnxB9/arm-Gal4）AnxB9基因mRNA表达水平;于第43天（约为人类中老年时期）,各组随机取40只果蝇,采用M-mode心动图检测果蝇心脏功能;各组随机取100只果蝇检测果蝇运动能力;各组随机取120只果蝇统计生命周期（相同饲养环境,每2天更换一次培养基,同步记录果蝇死亡只数,绘制果蝇存活曲线,计算平均生存期）。3研究结果3.1果蝇AnxB9基因mRNA表达量检测结果检测结果显示,与 AnxB9/w1118组相比,AnxB9/arm-Gal4组果蝇AnxB9的相对表达量有29%的下降,具有非常显着性差异（P<0.01）。3.2果蝇心脏功能M-mode心动图检测结果HP、DI、FS、AI、CI的双因素方差分析结果显示均存在显着的交互效果（P<0.05）;SI、FL显示无交互作用（P>0.05）,无主效应（P>0.05）。HP 分析结果显示（Test of Simple main effect）,在 Gene Expression Level=AnxB9/w1118 水平时,2-42d组显着高于1-42d组（P<0.05）;在 Gene Expression Level=AnxB9/arm-Gal4 水平时,各组均无显着差异（P>0.05）。在 Exercise Level=1-42d 水平时,AnxB9/arm-Gal4 组HP 显着高于 AnxB9/w1118组（P<0.01）;在 Exercise Level=2-42d水平时AnxB9/arm-Gal4组HP与AnxB9/w1118组无显着差异（P>0.05）;在 Exercise Level=28-42d 水平时,AnxB9/arm-Gal4 组极显着高于AnxB9/w1118组（P<0.01）。DI 分析结果显示,在 Gene Expression Level=AnxB9/w1118水平时,2-42d 组极显着高于1-42 组（P<0.01）;在 Gene Expression Level=AnxB9/arm-Gal4 水平时,1-42d组、2-42d 组、28-42d 组之间均不存在显着性差异（P>0.05）。在 Exercise Level=1-42d 和 28-42d平时,AnxB9/arm-Gal4组DI均极显着高于AnxB9/w1118组（P<0.01）;在 Exercise Level=2-42d水平时,AnxB9/arm-Gal4 组与AnxB9/w1118组 DI 无明显差异（P>0.05）。AI 数据分析结果显示,在 Gene Expression Level=AnxB9/w1118水平时,1-42d组、2-42d组、28-42d组之间均不存在显着差异（P>0.05）;在 Gene Expression Level=AnxB9/arm-Gal4 水平时,1-42d组和 28-42d组极显着高于 2-42d 组（P<0.01）。在 Exercise Level=1-42d 和 2-42d水平时,AnxB9/arm-Gal4 组与 AnxB9/w1118 组不存在显着差异（P>0.05）;在 Exercise Level=28-42d 水平时,AnsB9/arm-Gal4 组极显着高于AnxB9/w1118组（P<0.01）。进一步对心律不齐（包括心脏停搏、延长收缩和舒张功能不全）指标进行分析,结果显示 1-42d-AnxB9/arm-Gal4组（52.4%,14.3%）和28-42d-AnxB9/arm-Gal4组（57.7%,11.5%）心脏停搏和延长收缩发生率明显高于其他各组。各组舒张功能不全发生率均比较高,其中最高为 28-42d-AnxB9/w1118组（90.3%）,其次是28-42d-AnxB9/arm-Gal4 组（65.4%）、1-42d-AnxB9/w1118组、（60.7%）和2-42d-Anx9/w1118组（55.2%）均超过了 50%的发生率。FS数据分析结果显示,在Gene Expression Level=AnxB9/w1118水平时,2-42d 组显着高于1-42 组（P<0.05）;在 Gene Expression Level=AnxB9/arm-Gal4水平时,各组均没有显着性的差异（P>0.05）。在 Exercise Level=l-42d 水平时,AnxB9/arm-Gal4 组明显高于AnxB9/w1118组（P<0.01）;在Exercise Level=2-42d、28-42d水平时,均无显着性差异（P>0.05）。另外,各组之间SI,FL交互作用和主效应分析均未呈现出显着性（P>0.05）。3.3运动能力检测分析结果CI分析结果显示,在 Exercise Level=1-42d 水平时,AnxB9/arm-Gal4 组明显高于AnxB9/w1118组（P<0.01）。在Gene Expression Level=AnxB9/w1118 水平时,2-42d 组显着高于 1-42d 组（P<0.01）和 28-42d 组（P<0.01）;在 Gene Expression Level=AnxB9/arm-Gal4水平时,1-42d组和2-42d组之间无显着差异,两组均显着高于28-42d组（P<0.01,P<0.01）。3.4生命周期检测分析结果在 Exercise Level=1-42d、2-42d 和 28-42d 时 AnxB9/arm-Gal4组平均生存期均高于 AnxB9/w1118 组（P<0.01）。在 Gene Expression Level=AnxB9/w1118和 AnxB9/arm-Gal4 时,2-42d 组和 28-42d 组平均生存期均明显高于1-42d组（P<0.01）。与1-42d-AnxB9/w1118组相比,其它各组随时间变化趋势线位置明显右移。与1-42d-AnxB9/w111组平均生存期61.13天相比,1-42d-AnxB9/arm-Gal4组平均生存期70.15天,延寿百分比达到了 14.8%;2-42d-AnxB9/w1118组平均生存期69.74天,延寿百分比达到了 14.1%;2-42d-AnxB9/arm-Gal4组平均生存期73.75天,延寿百分比达到了 20.6%;28-42d-AnxB9/w1118组平均生存期 66.93 天,延寿百分比达到了 9.5%;28-42d-AnxB9/arm-Gal4组平均生存期73.90天,延寿百分比达到了20.9%。4 结论4.IAnxB9基因表达降低或规律运动训练单一实施时,能够显着增长增龄果蝇的心动周期,心动周期的改变主要是由于舒张间期的增长。在不参与长期运动训练时,AnxB9基因表达降低可以提高果蝇缩短分数。在AnxB9基因正常表达时,运动能够提高果蝇的缩短分数。4.2AnxB9基因表达降低参与中老龄规律运动训练时,心脏停搏、延长收缩症状发生率会升高,而舒张功能不全发生率较对照组会降低。AnxB9基因表达降低并参与长期规律运动训练能够降低心律不齐症状的发生率。4.3长期规律运动训练有助于提高果蝇的运动能力。在不参与运动训练的条件下,AnxB9基因表达降低同样能够提高果蝇的运动能力。而在AnxB9基因表达降低的情况下,参与中老龄期的运动训练可能会使果蝇的运动能力下降。4.4AnxB9基因表达降低或参与规律运动训练均能延长果蝇的生命周期。
李萌[5]（2014）在《小鼠脊髓中经典钙黏蛋白和原钙黏蛋白的表达模式比较分析》文中研究说明背景钙黏蛋白（cadherin）是一种钙离子依赖性的细胞黏附分子,它们参与许多生物过程,包括细胞识别、胚胎发育过程中的细胞信号转导以及神经回路的形成。根据钙黏蛋白的性质和序列特征,钙黏蛋白被分成几个亚群：经典钙黏蛋白（classical cadherin, Cdh）,桥粒钙黏蛋白（desmosomal cadherin）和原钙黏蛋白（protocadherin,Pcdh）等。虽然目前人们对部分钙黏蛋白的功能有了一定的了解,但仍有很多钙黏蛋白在小鼠脊髓中的表达模式、在神经发育中的功能和作用机制仍然不是十分清楚。目的比较几种不同的小鼠经典钙黏蛋白和原钙黏蛋白的同源性；·分析所选经典钙黏蛋白和原钙黏蛋白在小鼠脊髓中的表达模式；比较所选经典钙黏蛋白和原钙黏蛋白mRNA的表达差异,为进一步研究经典钙黏蛋白和原钙黏蛋白的功能奠定基础。方法1.借助生物信息学软件分析不同经典钙黏蛋白和原钙黏蛋白的同源性及进化关系；2.合成与所选小鼠经典钙黏蛋白和原钙黏蛋白cDNA的互补RNA（cRNA）探针；3.在小鼠腰椎和胸椎部位分别使用原位杂交方法分析不同经典钙黏蛋白和原钙黏蛋白mRNA的表达及分布情况；4.参考已有小鼠神经发育图谱进一步分析和比较经典钙黏蛋白和原钙黏蛋白在脊髓中的表达定位。结果1.通过对所选7个经典钙黏蛋白（Cdh2、Cdh4、Cdh6、Cdh7、Cdh8、Cdh11和Cdh18）和8个小鼠原钙黏蛋白（Pcdh7、Pcdh8、Pcdh9、Pcdh10、Pcdh11、Pcdh17、Pcdh18和Pcdh19）的同源进化关系分析表明,相对于其它钙黏蛋白,经典钙黏蛋白Cdh2和Cdh4,Cdh7和Cdh18,Cdh8和Cdh11之间,原钙黏蛋白Pcdh9和Pcdhll,Pcdh10和Pcdh19,Pcdh8和Pcdh18之间同源性较高；原钙黏蛋白和经典钙黏蛋白氨基酸序列具有明显的差别。2.成功合成了上述7个经典钙黏蛋白和8个原钙黏蛋白以及对照Reep1的地高辛标记cRNA探针。3.所检测的Cdhs及Pcdhs在出生3周龄小鼠脊髓中表达特征各异,原位杂交结果显示：在小鼠出生3周时,Cdh2、Cdh4、Cdh6、 Cdh8、Cdh11、Cdh18、Pcdh7、Pcdh9、 Pcdh10、和Pcdh19在腰椎前角运动神经元中有很强的表达。所选钙黏蛋白都在脊髓背角中表达,Cdh6、Cdh7、Pcdh11、Pcdh17和Pcdh18表达较弱。Cdh4、Cdh6、Cdh11、Pcdh9、Pcdh18还表达在背角外周白质区域。结论1.一些经典钙黏蛋白和原钙黏蛋白在3周龄小鼠脊髓中的表达模式有显着差别,呈现各自特异性的表达图谱；但在某些区域,如前角运动神经元区域,一些经典钙黏蛋白和原钙黏蛋白都有表达,表现出表达区域互补性。2.部分经典钙黏蛋白和原钙黏蛋白在3周龄小鼠脊髓中差别表达,表明它们可能在神经系统发育及功能发挥中起着重要作用。
窦光华[6]（2011）在《Cx43信号蛋白在法洛四联症儿童心肌细胞中的表达》文中研究指明目的法洛四联症（tctrology of Fallot, TOF）是一种主要累积右心室的联合性先天性心脏血管畸形,为紫绀型先心病中最常见的一种。Cx43信号蛋白在心肌细胞中的异常表达和分布可以引起多种心血管疾病,心脏先天性畸形以及心脏功能的改变。本实验通过应用免疫组化技术,流式细胞仪技术和共聚焦显微镜技术对具有右心室流出道梗阻的法洛四联症患儿的心肌组织与无右心室流出道梗阻的心脏病患儿心肌组织相比较以对Cx43信号蛋白在心肌细胞中的表达和分布加以评价和研究。方法所有患儿在心脏矫治术中,小心切取右心室流出道的肥厚增生或正常的心肌标本44例。法洛氏四联症患儿切取右室流出道的异常增生心肌肌束并按年龄段分组。其中Ia组患儿18名,年龄段为3月至3岁。Ib组患儿12名,年龄段3岁至6岁。对照组II组14名为无右心室流出道梗阻病变的单纯室间隔缺损患儿。采用免疫组化法,流式细胞定量技术以及共聚焦显微镜技术检测和观察法洛四联症患者的心肌细胞中Cx43信号蛋白的表达水平和三维分布变化,以及与无右心室流出道畸形患者的心肌表达的差异。结果1.免疫组化研究表明,通过HE染色显示,实验组心肌纤维走向紊乱,细胞大小不均,较对照组心肌细胞变大,密度变小;免疫组化结果表明,对照组患儿心肌细胞Cx43颗粒典型地排列在心肌闰盘处,实验组心肌细胞Cx43颗粒发生重排,杂乱分布于闰盘、心肌细胞膜各部位和胞浆内。图像分析结果显示实验组Cx43蛋白面积为21.45±7.75,Cx43含量百分比为31.74±10.44,平均灰度72.36±0.43;对照组中Cx43蛋白面积为33.82±8.23,Cx43含量百分比为40.22±10.14,平均灰度99.80±0.53。TOF组Cx43蛋白表达量明显低于对照组,两组之间存在显着性差（P<0.O5）。2.使用流式细胞仪对Cx43蛋白进行定量检测,以平均荧光强度大小代表Cx43蛋白表达量。实验组Ia Cx43蛋白平均荧关强度为87.33±8.4,Ib为101.42±7.9,实验组平均Cx43蛋白平均荧关强度为95.68±12.6,对照组Cx43蛋白平均荧关强度为133.37±23.9。经t检验Ia组与Ib组之间,实验组与对照组之间均有显着差异（P<0.05）。3.通过激光共聚焦显微镜观察发现,对照组心肌细胞Cx43荧光颗粒呈斑点或带状,其排列有高度的规律性。在心肌纤维的纵切面上, Cx43呈链状分布在与心肌纤维长轴垂直的细胞端-端相接的闰盘部位,极少数位于与心肌纤维长轴平行的细胞侧-侧相接的部位;实验组心肌细胞Cx43荧光颗粒则发生重排,部分颗粒已经开始从闰盘处向四周扩散,分布紊乱,出现在整个细胞膜表面各个部位以及细胞胞浆内,甚至表现为不同区域的增多或减少,一些Cx43颗粒呈链状大量地迁移至细胞侧面连接处。结论1.在法洛四联症患儿的心肌细胞中Cx43信号蛋白其动态分布和表达均无法按照正常时空调节机制进行,其在心肌闰盘处表达较少,且各年龄段患儿均出现这种表达和分布杂乱,异常等情况。2.具有右心室流出道梗阻的法洛四联症患儿的心肌组织与无右心室流出道梗阻的心脏病患儿心肌组织中Cx43的表达有明显不同。右心室流出道梗阻的法洛四联症患儿的心肌组织中Cx43呈杂乱,不成熟性分布。无右心室流出道梗阻的心脏病患儿心肌组织中Cx43表达相对规律,成熟分布较多。Cx43信号蛋白的杂乱,无序排列可能对右心室结构构型和功能异常产生决定性影响。3. Cx43信号蛋白与心血管系统早期的正常分化与发育存在密切的联系,通过对Cx43的研究有助于从分子生物学水平上探讨先心病的发病机制,对将来从基因水平上治疗心脏疾病也有着重要的理论和实际意义。
孙轶华,张力,徐长庆,李弘,时飒,赵雅君,韩丽萍,张红雨[7]（2006）在《不同鼠龄大鼠心肌组织中钙敏感受体的表达及与缺氧-再灌注损伤的关系》文中研究说明目的:观察不同鼠龄大鼠心肌组织钙敏感受体（CaSR）的表达规律及与心肌缺氧-再灌注损伤的关系。方法:采用RT-PCR技术,检测不同情况下心肌组织CaSR的表达差异;Lagendorff离体心脏灌流的方法复制心脏缺氧-再灌注模型;用透射电镜观察心肌超微结构的变化。结果:大鼠出生后,心肌组织中CaSR的表达逐渐升高,1个月时达到高峰,2、3个月保持在出生水平,此后上升并维持在较高水平。大鼠心肌缺氧40 m in及再灌注1 h、2 h心肌组织CaSR的mRNA表达升高,再灌注3 h、4 h后降低;同时随再灌注时间延长,心肌超微结构损伤愈严重。结论:大鼠心肌组织存在钙敏感受体,其表达与月龄有一定关系,并可能参与心肌缺氧-再灌注损伤的发生。
吴俊琢,张光谋,井长勤[8]（2006）在《缺血再灌注大鼠心肌细胞钙黏蛋白的表达》文中研究指明目的:分析N-钙黏蛋白在缺血再灌注大鼠心脏中的表达分布特征与心肌结构功能的关系。方法:实验于2004-10在新乡医学院形态实验室完成。①选择出生后3～5个月的健康雄性Wistar大鼠27只。随机分为3组,每组9只:正常对照组、心肌缺血组和心肌缺血再灌注组。②麻醉大鼠,暴露心脏,在肺动脉圆锥与左心耳间,离冠状动脉起始约2mm处穿线进行结扎,造成急性心肌缺血,分别做缺血30,45,60min的不同处理（心肌缺血组）,心肌缺血再灌注组同心肌缺血组处理,在心肌缺血30min后松开结扎线,再灌注30和60min。正常对照组只做穿线不作结扎。③模型制作完毕,处死大鼠,迅速取心脏病变部位,制成常规石蜡包埋切片,以备组织学检查。应用免疫组化方法检测各组大鼠的心肌细胞钙黏蛋白的表达。结果:大鼠27只均进入结果分析。正常对照组细胞N-钙黏蛋白免疫标记呈阶梯形典型的集中分布于心肌细胞成熟的端闰盘处。镜下观察缺血30和45minN-钙黏蛋白的表达与正常对照组比较,差异不明显;缺血60min后,心肌细胞分布混乱,肌膜出现破损,钙黏蛋白在心肌细胞闰盘处的表达减少。缺血30min,再灌注30和60min后,心肌细胞端闰盘处N-钙黏蛋白的表达与正常对照组比较,差异也不明显。结论:①N-钙黏蛋白的降解和分布模式的改变是急性缺血后心肌在分子水平上发生的最初重构,也是心肌细胞间机械偶联失常和收缩功能异常的解剖学基础。②短时间的缺血再灌注可使心肌代谢迅速改善并恢复正常,N-钙黏蛋白的表达变化反映了心肌细胞结构和功能的改变。
张光谋,吴俊琢,张艳芬,郭志坤[9]（2005）在《α-黏着斑蛋白在大鼠心脏表达分布随增龄变化的特征（英文）》文中提出背景:黏着斑蛋白与心脏的先天畸形发育和心肌细胞的分化有着密切的关系。目的:观察α-黏着斑蛋白在大鼠心脏的表达分布特征以及在心肌细胞发育过程中随增龄发生的变化规律。设计:随机对照,观察对比实验。单位:新乡医学院细胞生物学教研室;濮阳职业技术学院生物工程与农业经济系。材料:实验于2003-01/2003-06在新乡医学院形态学研究室完成。选取清洁级Wistar大鼠28只,按年龄分为幼年组、青年组、中年组、老年组,每组7只。方法:所有大鼠在麻醉状态下取大鼠心脏组织,冠状连续系列切片,片厚5μm。幼年、青年、中年和老年大鼠的心肌细胞α-黏着斑蛋白的表达应用免疫组化方法进行观测。在细胞表面、胞浆中及闰盘处出现棕黄色颗粒为阳性细胞。所有标本均做常规染色（苏木精-伊红染色）为结构对照。主要观察指标:各组大鼠心肌细胞α-黏着斑蛋白的表达。结果:28只大鼠均进入结果分析。①α-黏着斑蛋白在大鼠的心房、心室、乳头肌、室间隔等处的心肌细胞均有表达。②幼年时期α-黏着斑蛋白的免疫标记颗粒大部分集中在心肌细胞末端的闰盘处,少量分散地分布于细胞表面和胞浆中;青年、中年和老年大鼠α-黏着斑蛋白的免疫标记典型的分布在心肌细胞末端的闰盘处。结论:在大鼠心肌发育过程中,α-黏着斑蛋白的表达分布存在增龄变化;α-黏着斑蛋白的分布方式与闰盘的发育是一致的。
张光谋,郭志坤,徐振平,文小军,王华[10]（2004）在《大鼠心肌钙黏蛋白表达的增龄变化》文中研究指明目的探讨大鼠心肌细胞发育过程中钙黏蛋白（cadherin）的分布方式以及心肌细胞中cadherin表达的增龄变化规律。方法应用S-P免疫组化方法分别检测幼年、青年、中年和老年大鼠的心肌细胞钙黏蛋白cadherin的表达。结果细胞钙黏蛋白cadherin在大鼠的心房、心室、乳头肌、室间隔等处均有表达。幼年时期cadherin阳性颗粒大部分集中在心肌细胞端-端的闰盘处,青年、中年和老年大鼠cadherin典型的分布在细胞心肌末端的闰盘处。结论在大鼠心肌发育过程中,cadherin的表达存在增龄变化;以cadherin介导的细胞黏合对闰盘的形成是必备的,黏合连接稳定了细胞间的联系并且有利于心肌细胞收缩的同步化。
二、大鼠心肌钙黏蛋白表达的增龄变化（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、大鼠心肌钙黏蛋白表达的增龄变化（论文提纲范文）
（1）基于代谢/蛋白组学及网络药理学研究补阴补阳剂的抗衰老作用（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 引言 |
| 第一部分 文献综述 |
| 一、代谢组学、蛋白质组学和网络药理学技术及应用 |
| 二、衰老的研究进展 |
| 三、六味地黄丸、金匮肾气丸调节衰老的研究进展 |
| 第二部分 基于UPLC-Q-TOF/MS技术的代谢组学研究 |
| 一、血浆代谢组学 |
| 1 实验方案 |
| 2 小鼠血浆代谢物质分析 |
| 3 补阴(六味地黄丸)、补阳(金匮肾气丸)方剂对衰老小鼠血浆代谢物的调节 |
| 二、脾组织代谢组学 |
| 1 实验方案 |
| 2 小鼠脾组织代谢物质分析 |
| 3 补阴、补阳方剂对衰老小鼠脾组织代谢物的调节 |
| 三、肾组织代谢组学 |
| 1 实验方案 |
| 2 小鼠肾组织代谢物质分析 |
| 3 补阴(六味地黄丸)、补阳(金匮肾气丸)剂对衰老小鼠肾组织代谢物的调节 |
| 第三部分 基于iTRAQ的定量蛋白质组学技术探究补阴补阳方剂对自然衰老小鼠的调节作用 |
| 一、实验方案 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 LC-MS/MS分析条件 |
| 4 蛋白定性和定量分析 |
| 二、实验结果 |
| 1 蛋白定量结果 |
| 2 聚丙烯酰胺凝胶电泳检测结果 |
| 3 质谱分析结果 |
| 4 数据分析结果 |
| 5 六味地黄丸对衰老相关差异蛋白的调节分析 |
| 6 金匮肾气丸对衰老相关差异蛋白的调节分析 |
| 三、小结 |
| 第四部分 基于网络药理学方法结合分子对接技术探究补阴补阳方剂抗衰老的作用机制 |
| 第一节 六味地黄丸抗衰老作用机制的网络药理学研究 |
| 第二节 金匮肾气丸抗衰老作用机制的网络药理学研究 |
| 第三节 采用分子对接技术分析补阴、补阳方剂抗衰老作用机制 |
| 第五部分 讨论 |
| 一、衰老进程中代谢物质和蛋白变化 |
| 1 不同组织样本中衰老代谢标志物及通路的差异比较 |
| 2 不同性别衰老小鼠肝组织中蛋白的变化比较 |
| 二、比较六味地黄丸、金匮肾气丸对衰老相关代谢标志物和差异蛋白的调节 |
| 1 六味地黄丸、金匮肾气丸对衰老相关代谢标志物的调节 |
| 2 六味地黄丸、金匮肾气丸调节衰老相关蛋白及通路的比较分析 |
| 3 六味地黄丸、金匮肾气丸调节衰老相关代谢标志物及蛋白的联合分析 |
| 第六部分 结论 |
| 参考文献 |
| 创新点说明 |
| 致谢 |
| 博士在读期间发表的论文 |
| 个人简历 |
（2）4周龄幼龄大鼠环磷酰胺免疫抑制模型的建立及应用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 免疫抑制与免疫抑制动物模型建模方法概述 |
| 1.1.1 免疫抑制与评价方法 |
| 1.1.2 常见免疫抑制动物模型建模方法 |
| 1.2 环磷酰胺免疫抑制动物模型特点概述 |
| 1.2.1 环磷酰胺的作用机理和体内药物代谢特点 |
| 1.2.2 环磷酰胺对免疫系统的影响 |
| 1.2.3 环磷酰胺对肠道黏膜免疫屏障的影响 |
| 1.2.4 环磷酰胺对细胞周期因子-CDKN1A的作用 |
| 1.2.5 环磷酰胺对肝脏的影响 |
| 1.3 幼龄大鼠动物模型的特点及必要性 |
| 1.3.1 幼龄个体与成年个体药物作用的差异 |
| 1.3.2 Sprague-Dawley大鼠及生长发育特点 |
| 1.3.3 幼龄大鼠与幼童年龄对应的关系 |
| 1.4 免疫增强剂 |
| 1.4.1 粒细胞集落刺激因子(G-CSF) |
| 1.4.2 匹多莫德 |
| 1.5 模型评价方法与研究意义 |
| 1.5.1 模型的评价方法 |
| 1.5.2 研究的目的与意义 |
| 第二章 4周龄幼龄大鼠建模条件的探索 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 材料 |
| 2.2.1 实验动物 |
| 2.2.2 溶媒及受试物 |
| 2.2.3 仪器与试剂 |
| 2.3 方法 |
| 2.3.1 环磷酰胺50及150mg/kg剂量下幼龄大鼠的表现 |
| 2.3.2 不同剂量、频率和给药途径下幼龄大鼠的表现 |
| 2.3.3 4周龄大鼠性别差异比较 |
| 2.4 结果 |
| 2.4.1 环磷酰胺50及150mg/kg剂量下幼龄大鼠的表现 |
| 2.4.2 不同剂量、频率和给药途径下幼龄大鼠的表现 |
| 2.4.3 4周龄大鼠性别差异比较 |
| 2.5 分析与讨论 |
| 2.5.1 环磷酰胺剂量50-150mg/kg可引起严重免疫抑制甚至死亡 |
| 2.5.2 剂量在1-50 mg/kg引起轻度至中度免疫抑制,口服途径较为温和 |
| 2.5.3 4周龄雌性大鼠较雄性对环磷酰胺更为敏感 |
| 2.6 小结 |
| 第三章 模型中免疫指标的变化及成年大鼠对比研究 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 材料 |
| 3.2.1 实验动物 |
| 3.2.2 溶媒及受试物 |
| 3.2.3 仪器与试剂 |
| 3.3 方法 |
| 3.3.1 模型中大鼠生长发育及血液学指标的变化 |
| 3.3.2 模型中骨髓、胸腺、脾和淋巴结组织学变化以及脾脏中细胞周期因子CDKN1A变化的研究 |
| 3.3.3 模型中淋巴细胞亚群的变化 |
| 3.3.4 模型中血清TNF-α,IL-2和IFN-γ的变化 |
| 3.3.5 模型中肠道黏膜免疫相关指标的研究 |
| 3.4 结果 |
| 3.4.1 模型中大鼠生长发育及血液学指标的变化 |
| 3.4.2 模型中骨髓、胸腺、脾和淋巴结组织学变化以及脾脏中细胞周期因子CDKN1A变化的研究 |
| 3.4.3 模型中淋巴细胞亚群的变化 |
| 3.4.4 模型中血清TNF-α,IL-2和IFN-γ的变化 |
| 3.4.5 模型中肠道黏膜免疫相关指标的研究 |
| 3.5 分析与讨论 |
| 3.5.1 首次以4周龄幼龄大鼠为基础建立了环磷酰胺免疫抑制模型 |
| 3.5.2 环磷酰胺可对4周龄幼龄大鼠免疫系统造成明显抑制 |
| 3.5.3 与成年大鼠相比幼龄大鼠模型免疫抑制程度强恢复能力弱 |
| 3.6 小结 |
| 第四章 4周龄幼龄大鼠环磷酰胺免疫抑制模型的应用 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 材料 |
| 4.2.1 实验动物 |
| 4.2.2 溶媒及受试物 |
| 4.2.3 仪器与试剂 |
| 4.3 方法 |
| 4.3.1 G-CSF在4周龄幼龄大鼠环磷酰胺免疫抑制模型中的作用 |
| 4.3.2 匹多莫德在4周龄幼龄大鼠环磷酰胺免疫抑制模型中的作用 |
| 4.4 结果 |
| 4.4.1 G-CSF在4周龄幼龄大鼠环磷酰胺免疫抑制模型中的作用 |
| 4.4.2 匹多莫德在4周龄幼龄大鼠环磷酰胺免疫抑制模型中的作用 |
| 4.5 分析与讨论 |
| 4.5.1 模型中表现出G-CSF的显着粒细胞提升作用 |
| 4.5.2 模型中表现出匹多莫德对免疫系统全面的增强作用 |
| 4.5.3 4周龄幼龄大鼠环磷酰胺免疫抑制模型可准确反映阳性药物的免疫调节作用 |
| 4.6 小结 |
| 第五章 结论 |
| 第六章 创新点 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简历 |
（3）比较研究3、6、12月龄雄性小鼠蛋白质组的变化及四首补益剂的干预作用（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一部分 综述部分 |
| 综述一 方证关系的本质探讨 |
| 综述二 衰老的机制探讨及抗衰老药物研究概况 |
| 综述三 蛋白质组学技术概况 |
| 第二部分 实验部分 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 样品处理 |
| 4 LC-MS/MS分析 |
| 5 数据处理 |
| 第三部分 结果 |
| 1 各组比对鉴定到蛋白数量 |
| 2 空白组不同月龄之间的差异蛋白比较 |
| 3 6月龄四君子汤组、四物汤组、六味地黄丸组、金匮肾气丸组分别与6月龄空白组比较 |
| 4 12月龄四君子汤组、四物汤组、六味地黄丸组、金匮肾气丸组分别与12月龄空白组比较 |
| 5 增龄过程蛋白标志物筛选 |
| 第四部分 讨论 |
| 1 随增龄发生变化的差异蛋白 |
| 2 自然衰老模型探讨 |
| 3 四首补益剂在增龄过程调控的蛋白 |
| 4 补益剂促进生长发育的作用 |
| 5 增龄与机体的“稳态-失衡” |
| 6 问题与展望 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录 |
| 1 空白组之间的差异蛋白及GO分析、KEGG分析 |
| 2 6月龄给药组与空白组差异蛋白、GO分析及KEGG分析 |
| 3 12月龄给药组与空白组差异蛋白、G0分析及KEGG分析 |
| 4 各组蛋白丰度比值及Sign level值 |
| 5 与生长发育相关的差异蛋白及四首补益剂的调节作用 |
| 6 四君子汤调节差异蛋白于KEGG通路富集情况汇总 |
| 7 四物汤调节差异蛋白于KEGG通路富集情况汇总 |
| 8 六味地黄丸调节差异蛋白于KEGG通路富集情况汇总 |
| 9 金匮肾气丸调节差异蛋白于KEGG通路富集情况汇总 |
| 个人简历 |
| 创新点说明 |
（4）AnxB9基因敲减联合规律运动对增龄果蝇心脏功能的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 果蝇品系来源及培养 |
| 2.2 主要仪器和试剂 |
| 2.2.1 主要仪器 |
| 2.2.2 主要试剂 |
| 2.3 实验方案 |
| 2.3.1 杂交及分组方案 |
| 2.3.2 果蝇运动方案 |
| 2.4 指标检测 |
| 2.4.1 qRT-PCR检测 |
| 2.4.2 M-mode心动图检测 |
| 2.4.3 运动能力检测 |
| 2.4.4 生命周期检测 |
| 2.5 统计学处理 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 果蝇心脏AnxB9基因mRNA的RT-PCR检测结果 |
| 3.2 果蝇心脏功能M-mode心动图分析结果 |
| 3.3 运动能力检测分析结果(攀爬指数) |
| 3.4 生命周期检测分析结果 |
| 4 分析与讨论 |
| 4.1 规律运动联合AnxB9基因表达下降对增龄果蝇心脏功能的影响 |
| 4.2 规律运动联合AnxB9基因表达下降对增龄果蝇运动能力的影响 |
| 4.3 规律运动联合AnxB9基因表达下降对增龄果蝇生命周期的影响 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 规律运动、AnxB9基因、心脏功能以及衰老变化的研究综述 |
| 参考文献 |
| 中英文缩略词对照表 |
| 科研情况 |
（5）小鼠脊髓中经典钙黏蛋白和原钙黏蛋白的表达模式比较分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 实验材料 |
| 研究方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 缩略词 |
| 发表文章 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（6）Cx43信号蛋白在法洛四联症儿童心肌细胞中的表达（论文提纲范文）
| 英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 个人简历 |
| 致谢 |
| 综述 |
| 参考文献 |
（7）不同鼠龄大鼠心肌组织中钙敏感受体的表达及与缺氧-再灌注损伤的关系（论文提纲范文）
| 材 料 和 方 法 |
| 1 动物 |
| 2 试剂 |
| 3 主要器材 |
| 4 大鼠心肌钙敏感受体 (CaSR) 的RT-PCR检测 |
| 4.1 总RNA的提取 |
| 4.2 DNase I酶处理RNA |
| 4.3 逆转录反应 (RT-PCR) |
| 5 核苷酸序列分析 |
| 6 不同月龄大鼠心肌CaSR的检测 |
| 7 大鼠心肌缺氧/再灌注时CaSR的检测 |
| 8 统计学处理 |
| 结 果 |
| 1 大鼠心肌CaSR的RT-PCR产物琼脂糖凝胶电泳结果 |
| 2 扩增后回收的cDNA片段的测序结果 |
| 3 不同月龄大鼠心肌CaSR的RT-PCR电泳结果 (图2) |
| 4 大鼠心肌缺氧/再灌注时CaSR的电泳结果 (图3) |
| 5 大鼠心肌缺氧/再灌注的超微结构变化 |
| 讨 论 |
四、大鼠心肌钙黏蛋白表达的增龄变化（论文参考文献）
- [1]基于代谢/蛋白组学及网络药理学研究补阴补阳剂的抗衰老作用[D]. 王燕. 黑龙江中医药大学, 2021(01)
- [2]4周龄幼龄大鼠环磷酰胺免疫抑制模型的建立及应用[D]. 许江城. 中国农业大学, 2017(02)
- [3]比较研究3、6、12月龄雄性小鼠蛋白质组的变化及四首补益剂的干预作用[D]. 兰辛键. 黑龙江中医药大学, 2017(05)
- [4]AnxB9基因敲减联合规律运动对增龄果蝇心脏功能的影响[D]. 张民. 湖南师范大学, 2017
- [5]小鼠脊髓中经典钙黏蛋白和原钙黏蛋白的表达模式比较分析[D]. 李萌. 新乡医学院, 2014(12)
- [6]Cx43信号蛋白在法洛四联症儿童心肌细胞中的表达[D]. 窦光华. 安徽医科大学, 2011(11)
- [7]不同鼠龄大鼠心肌组织中钙敏感受体的表达及与缺氧-再灌注损伤的关系[J]. 孙轶华,张力,徐长庆,李弘,时飒,赵雅君,韩丽萍,张红雨. 中国病理生理杂志, 2006(08)
- [8]缺血再灌注大鼠心肌细胞钙黏蛋白的表达[J]. 吴俊琢,张光谋,井长勤. 中国临床康复, 2006(12)
- [9]α-黏着斑蛋白在大鼠心脏表达分布随增龄变化的特征（英文）[J]. 张光谋,吴俊琢,张艳芬,郭志坤. 中国临床康复, 2005(27)
- [10]大鼠心肌钙黏蛋白表达的增龄变化[J]. 张光谋,郭志坤,徐振平,文小军,王华. 解剖学研究, 2004(04)