重组大肠杆菌生产多形拟杆菌肝素酶I的发酵优化

论文摘要

以实验室前期构建的N端融合SUMO标签的多形拟杆菌肝素酶I（SUMO-Bt-Hep I）生产菌株重组大肠杆菌Rosetta（DE3）/pE-SUMO-Bt-HepI为研究对象,通过单因素确定其最佳表达条件:诱导温度25℃、诱导剂浓度0.4 mmol/L、诱导时间12 h;首先通过Plackett-Burman试验,筛选出培养基中3个主要影响酶活的因素:葡萄糖、酵母提取物和蛋白胨。并通过响应面试验确定最佳培养基为:葡萄糖9.52 g/L,酵母提取物9.61 g/L,蛋白胨19.92 g/L,硫酸铵4 g/L,磷酸氢二钠18 g/L,磷酸二氢钾3 g/L,硫酸镁5 g/L。在此最佳培养基下发酵酶活预测可达55133IU/L,3次验证试验获得的SUMO-Bt-HepI酶活力平均为56961 IU/L,与理论预测值接近,比优化前（24215.9 IU/L）提高了2.3倍。通过5 L发酵罐的分批补料扩大培养得到的最高发酵酶活为3.937×105IU/L,比摇瓶提高了6.91倍,这是目前报道发酵生产肝素酶I的最高水平,对工业化应用具有一定的指导意义。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 张川,刘敏敏,刘耀天,张悦,李中媛,宋亚囝,罗学刚

关键词: 重组大肠杆菌,多形拟杆菌,肝素酶,响应面,发酵优化

来源: 食品科技 2019年06期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 一般化学工业

单位: 工业发酵微生物教育部重点实验室暨天津市工业微生物重点实验室天津科技大学生物工程学院

基金: 国家重点研发计划项目(2017YFD0400303),国家863计划项目(2012AA021505)

分类号: TQ925

DOI: 10.13684/j.cnki.spkj.2019.06.001

页码: 1-8

总页数: 8

文件大小: 3901K

下载量: 132

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标签：重组大肠杆菌论文;  多形拟杆菌论文;  肝素酶论文;  响应面论文;  发酵优化论文;