佛山市海天(高明)调味食品有限公司广东佛山528000
摘要:经过对于当前食品领域之中状况还有对于PCR法对转基因的植物食品还有掺假食品方面检测的研究状况剖析,来提出当前该食品质量的监督单位应当推广应用已经成熟基因检测工艺,在食品质量的检测中进行使用,对假冒伪劣商品进行打击,来使消费者的利益得到维护。
关键词:转基因植物食品;掺假食品;PCR法
1中国当前在食品领域之中状况
植物基因项目假如在上个世纪的七十年代的DNA技术建立重组开始算起,已经有了大约30年历史,当前全球范围内,转基因的植物有一百多类型,还有上千例的转基因植物获得批准进到田间进行相关的试验,还有大量转基因的商品已经过正规的商业开发而进到国际市场内。近些年来,中国的粮食呈现出净进口的格局,在2004到2006年,这3年的时间里,净进口累计达到1450亿斤,每年平均净进口达到了500亿斤,而其中有着相当大部分的转基因物种。由于转基因高抗逆性、高生产力以及高品质,为之前物种不能相比的,于环境以及人口压力之下,该转基因商品依旧有着非常大的市场上升空间。
还有,随着中国在食品领域快速发展进步,大量的不法掺假手段出现,且范围是愈来愈广以及内容愈来愈繁杂。其掺假手段涵盖了混入、掺兑、假冒、抽取等多种。而且掺假的范围涉及到了肉类、粮油与乳制品、加工制品、饮料以及果蔬和糖等多个方面。
粮食之中经常见到掺假是新米中掺陈米,或者是廉价米中混进价高米。依照检查得到食用的植物油之中芝麻油与花生油的掺假与掺杂极为恶劣。在食用的植物油当中有可能掺兑上地沟油还有其他的非食用油,从而来获得非法的非常高利润,对消费人们健康带来极大影响。掺假的香油其主要为掺兑米汤、水、猪油、冬瓜汤、菜籽油以及棉籽油等多种物质,而部分香油为由香油精和色拉油勾兑得到。如图1.
图1粮食掺假问题
天然的发菜为中国西部区域特色陆生性的蓝藻类发状植物,其生长于荒漠-半荒漠的草原中丘陵裸地,因为他的生物学特征以及独有生态环境,到现在为止还不可以实施人工种植方式。宁夏的发菜,其丝体细长有韧性,颜色乌黑,内含丰富的营养物质,是国内的同种发菜中极好的一种。因为利益的原因,有的加工人员运用别的材料,并采取特殊方式进行加工,他的形态与天然的发菜是非常相似的,再把它掺到天然的发菜之中,当前相关单位对于天然发菜当中掺入人造发菜比例实施鉴别是比较困难的。
饮料方面也没有幸免,这其中果汁掺假问题是最突出的。实际上,真正意义“100%的鲜果汁”为采摘新鲜的水果并鲜榨之后,再通过蒸发与冻结以及反渗透等多种流程来形成“浓缩的果汁”,然后以热罐的生产工艺,再加上纯水把浓缩的果汁给还原得到。但是当前市面部分所谓的“100%果汁”仅仅是用着浓缩的果汁来加上香料、糖以及水调制为不一样浓度饮料;还有的为使成本降低,不惜应用各类方式来制作假的果汁,一开始是运用山梨酸钾、蛋白糖、自来水、柠檬酸以及黄原胶等,再添上各类香精与色素勾兑得到各类饮料,现在经过添上果渣的提取液体,以及向价高果汁当中加入价低果汁来制作果汁,就像是在苹果汁当中来添上白葡萄汁或者是梨汁,在橙汁当中加上西柚汁与柑橘汁等,虽说对于人体没有直接的危害影响,不过这类以次充优、投机取巧方式使消费人的利益受到严重损害,而且对我国果汁方面出口贸易造成了直接影响。如图2.
图2果汁掺假状况
2PCR技术于植物性的食品检测以及食品掺假方面运用
当前的基因检测工艺已在大量行业领域中得到运用,就像是作物种子方面真伪判断、动物的选种育种、中药材的真伪判断以及作物当中的转基因成分鉴定等方面。而基因检测工艺其基础为PCR技术,于此基础之上发展出反转-PCR、免疫PCR、随机的扩增多态性DNA工艺、mRNA差示工艺以及限制性片段的长度多态性。
当前中国已经颁布了多个转基因的食品定量、定性检测国家准则,不过缺少单纯用在植物性的转基因食品方面监测方式。转基因的农作物当中最为常用花椰菜的花叶病毒其启动子与根癌农杆菌的终止子序列。当前已经存在研究经过设计且对两对不一样引物进行合成:35S-1/35-2:5'-GATTCCATTGCCCAGCTATCTG-3',5'-TAGAGGAAGGGTCTTGCGAAGG-3';NOS-1/NOS-2:5'-GAATCCTGTTGCCGGTCTTG-3',5'-CGAATTCCCGATCTAGTAAC-3'。来建立起PCR-酶切剖析-Southern的杂交检测且确认出转基因的成分35S启动子以及NOS终止子措施。这个方式适用在快速对有这两类序列转基因的植物与食品进行检测。实施PCR检测的时候第一步得设置阳性、阴性以及空白作为对照组,这其中运用阳性的质粒对照组先将PCR扩增温度与时间还有循环的次数等多个反应条件确定出来;而且用这3组对扩增体系能不能正常的工作进行检查,来将假阳性与假阴性的结果排除掉,然后是在实物的检测进程当中,每一个样品皆做两个平行的实验,来保证结果是精准的;在最后来对于阳性的检测结果实施酶切以及Southern的杂交确定,从而对结果可靠性进行验证。如图3.
图3PCR技术的运用
当前,对掺假行为方面鉴别方式,大部分是采取感官的评定或者是化学仪器的手段,就像是紫外光谱方式、分光光度方式、质谱方式以及红外光谱方法等多种,对于某些的掺伪商品能够做出一些精准鉴定,不过也存有不少盲区部分,特别是对于有不一样来源掺假物质是没有办法的。
凭借PCR技术当做基础基因检测工艺,不但可以对食物当中转基因的成分进行鉴定,而且还可以对食物当中致病菌与食品之中成分类型还有食品当中有效的成分进行有效检测,所以也可以对于食品当中所掺杂其它的生物成分实施检验鉴定。
DNA指纹的图谱工艺运用在食品掺假鉴别检验运用的仪器涵盖了凝胶成像体系、PCR设备以及紫外分光的光度装置等多个。其首先将食品中单一原料的基因组DNA提取出来,通PCR的反应,依照已经建立起原料RAPD的反应系统,在引物当中将多个有效的引物筛选出来,然后运用这一些有效的引物来对于原料种类实施RAP剖析,该100bpDNAladdermarker是用在DNA指纹的构建方面,而由此来构建得到食品原料DNA的指纹图谱,当做鉴定分子依照;还有依据和上面一致方式来对食品成品的基因图谱进行构建;在最终,把成品的基因图谱和原料的基因图谱来做对比,假如二者的图谱是相似的,那么说明了无其他的物质掺杂进来,假如是成品图谱当中有多余条带出现,那么说明了添进其他物质。依照图谱之中多余的条带特征,对已经存在基因图谱的文库进行查找,来将掺杂物质还有和原料物质方面亲缘的联系以及生物学的特征等确定出来。
3结束语
因为中国当前缺少对于市场方面植物性的食品专门检测准则,其食品质检单位能够依照转基因的农作物当中最为常用到花椰菜病毒的启动子以及根癌农杆菌的终止子序列,来采取两对不一样引物,经过PCR-酶切剖析-Southern的杂交检测,来对转基因其成分35S的启动子与NOS终止子进行确定的手段,用在对包含这两类序列转基因的植物与食品进行快速检测。
运用该DNA指纹图谱工艺来对于食品当中所掺杂物质实施相关检测鉴定,依照不一样种类基因特异性质,来对于DNA抽取之后实施PCR扩增且剖析,不但飞快精准,并且可以对掺杂物质和原料联系进行定位。这类技术使其他的理化方式难以解决的掺假状况得到解决,可以在根本上对由外形与理化剖析难以判别物质进行区分。上述技术在国内外研究均是极其成熟的,所以应当将这个技术进行推广,运用在质量技术的监督单位以及食品质检单位对于食品质量检查监督,还有对假冒伪劣的食品进行打击之中,进而能够使酱油之中掺进毛发问题得到有效解决,使市场之中的掺伪食品减少,使得食品的生产以及经销等方面走上文明卫生轨道,进而使食品领域得到稳定健康发展。
参考文献:
[1]朱其松,张洪瑞,宋克勤.转基因食品方面安全性的评价和检测工艺[J].河北农业科学,2009,(5):66-78.
[2]王德军,乔惠同,陈炜.天然发菜和人造发菜的鉴定措施研究[J].检验检疫科学,2008(3):122-125.
[3]李春艳.辣椒面的掺假掺伪鉴定检测研究剖析[J].中国卫生检验杂志,2008(12):282-293.