胍丁胺通过AMPK途径诱导间充质干细胞的凋亡

胍丁胺通过AMPK途径诱导间充质干细胞的凋亡

论文摘要

间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)具有强大的组织再生修复及免疫调节功能,广泛应用于损伤性和免疫相关性疾病的治疗,但其过早凋亡会降低临床疗效,且机制不明。研究发现,胍丁胺(agmatine, AGM)可通过抑制一氧化氮(nitric oxide, NO)生成发挥抗炎功能,对脓毒症小鼠具有保护效应。移植MSCs治疗脓毒症也是一种有效的治疗方式,但二者是否存在相互作用及AGM是否影响MSCs生存却未见报道。该研究旨在探讨AGM对MSCs生存的影响及其分子机制。研究MSCs之前,该研究通过检测细胞表面marker(CD29、CD34、CD44、CD45、CD90和CD105)及三系分化(成脂、成骨、成软骨)对其进行了鉴定。为了深入探究AGM对MSCs的作用,使用流式细胞术检测AGM处理后MSCs的凋亡率(Annexin V)以及Western blot检测经AGM处理后MSCs的凋亡相关信号通路蛋白p-AMPK、p-mTOR、p-S6K1、Cl-Caspase3的表达水平。之后进一步添加AMPK siRNA检测AGM诱导MSCs凋亡的分子机制。结果显示, AGM在体外以剂量依赖性的方式,通过抑制mTOR信号通路诱导AMP活化蛋白激酶(AMPK)活化,导致凋亡相关蛋白表达上调,从而介导MSCs凋亡。而AMPK siRNA处理能明显恢复mTOR通路,并抑制AMPK活化,使凋亡相关蛋白表达降低,进而减弱AGM诱导的凋亡效应。该文揭示了AGM可通过AMPK途径诱导MSCs的凋亡。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 主要试剂与仪器
  •   1.2 人脐带MSCs的分离、培养与鉴定
  •     1.2.1 人脐带MSCs的分离培养
  •     1.2.2人脐带MSCs的表型鉴定
  •     1.2.3 人脐带MSCs的体外诱导三系分化
  •   1.3 AGM诱导MSCs的凋亡检测
  •   1.4 AGM诱导MSCs凋亡的信号分子检测
  •   1.5 统计学分析
  • 2 结果
  •   2.1 MSCs的形态及鉴定
  •   2.2 AGM诱导MSCs凋亡
  •   2.3 AGM通过活化AMP-活化蛋白激酶(AMPK)介导凋亡
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 姚孟维,任婷婷,何骁,陈卓,杨奕,邢伟,郭韚,敖罗全,李战,梁华平,徐祥

    关键词: 胍丁胺,间充质干细胞,凋亡

    来源: 中国细胞生物学学报 2019年09期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,医药卫生科技

    专业: 生物学,基础医学

    单位: 陆军军医大学第三附属医院野战外科研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室,青岛大学医学院组织学与胚胎学教研室

    基金: 国家自然科学基金(批准号:81571913),重庆市基础与前沿研究计划一般项目(批准号:cstc2015jcyjA10078)资助的课题~~

    分类号: Q25;R329.2

    页码: 1740-1746

    总页数: 7

    文件大小: 1953K

    下载量: 98

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