导读:本文包含了金鱼草基因论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:金鱼草,OPR,基因克隆,表达分析
金鱼草基因论文文献综述
付宇辰,刘晓慧,冷平生,胡增辉[1]（2018）在《金鱼草12-氧-植物二烯酸还原酶基因AmOPR的克隆及表达分析》一文中研究指出本研究使用金鱼草'马里兰'为材料,利用同源克隆结合RACE技术得到一个12-氧-植物二烯酸还原酶(OPR)基因,命名为AmOPR。AmOPR基因组包含1128个碱基,编码375个氨基酸。同源比对分析结果表明AmOPR与其他植物的AOC基因有较高的同源性。AmOPR存在组织特异性,在花中表达量最高,其次为叶、茎、根。AmOPR基因在金鱼草不同花期相对表达量呈现先下降后上升的趋势,且败花期相对表达量最高,其次为花蕾期。(本文来源于《中国观赏园艺研究进展2018》期刊2018-07-25）
王少杰,刘晓慧,胡增辉,冷平生[2]（2018）在《金鱼草脂氧合酶基因AmLOX1的克隆及表达分析》一文中研究指出脂氧合酶(lipoxygenase,LOX)是茉莉酸信号途径的关键酶。该研究克隆了金鱼草的LOX基因,命名为AmLOX1。AmLOX1基因的开放阅读框为2 649 bp,编码883个氨基酸。AmLOX1蛋白质的理论等电点为p H6.06,相对分子质量为100.52 k Da。AmLOX1与其他植物的LOX基因均有较高的同源性。实时荧光定量PCR表达分析发现,AmLOX1在金鱼草花中表达量显着高于根茎叶;在花器官中,下瓣的相对表达量最高;在花不同发育阶段中,衰败期的花AmLOX1的相对表达量最高。(本文来源于《中国细胞生物学学报》期刊2018年06期）
王杰[3]（2016）在《两个含有hps-phi基因表达载体的构建和功能验证以及金鱼草再生体系的建立》一文中研究指出甲醛(HCHO)是装修后的主要污染物之一,对室内环境和人体健康影响较大。植物净化作为一种生态环保的净化室内空气质量的手段,一直被人们所关注。研究证明,利用基因工程手段增强转基因植物HCHO代谢能力可提高其吸收外源HCHO的速率和脱毒能力。HPS和PHI是许多甲基营养菌甲醛固定途径RuMP的关键酶。本研究论文的工作:(1)从番茄中克隆了可定位在植物叶绿体细胞器的RbcS3c基因两个长度不同启动子和信号肽序列,并进行元件分析和功能预测;(2)分析金鱼草密码子的偏好性并对目的基因hps-phi融合序列进行优化后,将RbcS3c基因信号肽和hps-phi目的基因构建到瞬时表达载体中,观察其是否定位到叶绿体中表达;(3)构建RbcS3c基因2个长度不同启动子引导hps-phi目的基因的表达载体,转化烟草获得转基因植株,通过定量PCR比较不同长度启动子启动目的基因效率,并验证hps-phi目的基因分解甲醛的作用;(4)建立金鱼草的再生体系,获得大量的可转化植株。第一部分工作结果:从番茄中克隆了可定位在植物叶绿体细胞器的RbcS3c基因两个长度不同启动子和信号肽序列,分别命名为RbcS3cPS1和RbcS3cPS2。RbcS3cPS1片段长度为738bp,对该序列进行测序分析并与已发表的RbcS3c基因(X05986)相应序列进行比较发现:在TATA盒、CAAT盒等重要功能区域并未发现有碱基的改变,说明所克隆片段即为番茄RbcS3c基因上游调控序列。Plant CARE软件分析该序列表明:该基因启动子含有多处保守序列,而且越靠近起始密码子区域序列越保守,该启动子序列除含有启动子必需的CAAT框、TATA框外,还含有G-box、I-box、box I、box II、ATC-motif等十二种与光响应有关的元件。另外,还含有一个个Me JA响应元件、一个乙烯响应元件。将该基因启动子再向上游拉长后扩增的RbcS3cPS2片段长度为1086bp序列。在从RbcS3c基因启动子738bp向上游延伸的300bp的序列中,发现这个启动子有很多与植物非生物胁迫相关的响应元件,如ABRE、G-BOX、HSE、GARE-MOTIF、TATC-BOX、MBS。与Gen Bank中X05986比对,本研究克隆的两个不同长度的RbcS3c基因启动子和信号肽序列虽然在TATA-box、CAAT-box、G-box等重要功能区域没有碱基改变,但在其他区域存在9处碱基的差异,包括8处碱基替换和1处碱基缺失,这些差异序列都存在于738bp序列中。两者与已发表的RbcS3c基因(X05986)相应序列同源性分别为98%和98.7%。这说明在不同番茄品种之间RbcS3c基因启动子序列会存在一定的差异性。第二部分工作结果:金鱼草的ENc值为61,偏大,表明金鱼草在密码子的使用上偏好性不强。叶绿体中的密码子使用较为均匀,除终止密码子外,最小的为2.5,分别是苏氨酸ACG和丝氨酸AGC,最大的是苯丙氨酸UUU,使用率在千分之53.5左右,其次是天冬酰胺千分之37.0。根据生物软件计算结果表明,GCC、GAC、GAG、TTC等30个以C或G碱基为第3位的密码子的RSCU值均大于l,且Frac值也较大,为hps-phi基因的偏好密码子。据此,将甲基营养菌中hps-phi融合基因序列根据密码子简并性优化,优化后的序列与原序列的相似度为76%左右。通过烟草瞬时表达,我们可以看到在信号肽的指导下,携带目的基因成功定位到叶绿体中。这说明我们克隆的信号肽虽然在氨基酸组成上与NCBI中报道的序列有2个氨基酸的差异,但其信号肽功能并没有发生改变,这与生物软件预测结果一致。即我们克隆的信号肽与NCBI中报道的信号肽剪切位点不同,但在功能上都可以发挥信号肽的作用。第叁部分结果:分别构建两个由番茄RbcS3c基因不同长度启动子及信号肽引导融合基因hps-phi的表达载体:pC1301-RbcS3cP1S::hps-phi-Nos(小载体)和pC1301-RbcS3cP2S::hps-phi-Nos(大载体),并利用根癌农杆菌介导转化烟草获得转基因植株。利用定量PCR检测分别含有大、小载体转基因烟草植株目的基因的表达量。结果显示,在含有小载体转基因植株中,目的基因表达量平均比含有大载体转基因植株提高20多倍。转基因烟草植株抗甲醛能力检测显示,含有小载体转基因植株非常强,比野生型提高了约14-20倍,这也与目的基因定量检测结果一致。目的基因定量分析以及抗甲醛能力检测结果都表明,将启动子加长之后并没有增加外源基因的表达量,反而比没有加长的启动子表达量更低。由此我们推测,在加长的启动子序列上,可能有某些功能元件抑制了该启动子的效率,从而使目的基因的表达量下降到几乎没有表达的水平。最后,我们建立了金鱼草的再生体系,研究结果表明:IBA对金鱼草生根的促进作用明显要优于NAA,加IBA或NAA激素的培养基生根率明显高于不加IBA或NAA激素的培养基,金鱼草无根苗在附加IBA的培养基中生根效果最好,生根率100%,平均每根苗的生根数显着多于NAA所诱导的效果。其中IBA为1.5mg/L时,平均生根数达到最大值为24条左右,这与日本学者所报道的合适促进生根的浓度一致。有关本研究构建的两个载体在金鱼草中转化方法还需要进一步探索和改进。开展本研究为今后进一步培育高甲醛分解能力的金鱼草转基因植株奠定了主要的基础。(本文来源于《上海师范大学》期刊2016-10-01）
宋倩娜,刘琛,高振蕊,李莹,张弛[4]（2014）在《热激启动子18.2在金鱼草中启动下游基因表达最适温度条件的筛选》一文中研究指出为了研究温度对植物根系中基因表达的影响,构建了由拟南芥小热激蛋白18.2基因的启动子和金鱼草中调控花青素生物合成的基因(Rosea1)组成的植物表达载体pBIPhsp::ROS,利用遗传转化法得到毛状根,以根系颜色变化为指标,探讨了温度变化对植物根系基因表达的影响。结果表明:37、40和42℃热激处理4 h后,在毛状根中均能观察到一定程度的花青素积累;在42℃条件下处理8 h时,转基因毛状根颜色变化最深;RT-PCR分析表明,Rosea1基因的表达水平与毛状根着色呈正相关。该体系可作为温度对植物根系影响研究的一种指示标记和手段。(本文来源于《生态学杂志》期刊2014年09期）
聂园军[5]（2012）在《金鱼草delila和roseal基因在白色棉中的表达及功能的初步研究》一文中研究指出棉花是世界上最重要的纤维作物,彩色棉纤维具有天然色彩、无需漂染、不含化学染料残留、不褪色、穿着舒适和经济价值高等优点,在节约纺织成本的同时,减轻了化学染料对环境的污染,避免了化学染料对人体健康可能存在的有害影响。随着当今社会人们对环境和健康的日益关注,利用基因工程技术在不改变品质和产量的前提下改变白色棉纤维色泽和直接改良彩色棉纤维品质已成为人们研究的热点。本研究将控制金鱼草花青素合成基因delila和roseal导入白色陆地棉中,获得转基因棉花植株,对其外源基因进行了表达分析和功能的初步研究。取得的主要结果如下：1.为了确定delila和roseal基因编码的转录因子在棉花细胞中的定位,构建delila和roseal基因分别与eGFP基因的嵌合表达载体,采取农杆菌介导法将外源基因导入棉花下胚轴中进行愈伤组织诱导培养3-4个月。挑选愈伤组织于激光共聚焦显微镜下观察绿色荧光在细胞中的定位。结果显示,delila和roseal基因编码的蛋白定位于细胞核中。2.为了研究delila和roseal基因在棉花中的调控功能,运用Gateway(?)技术分别构建了由花椰菜叶病毒CaMV35S(35S)启动子驱动和纤维特异启动子pEX驱动delila和roseal基因表达的植物表达载体。通过农杆菌介导法进行了棉花遗传转化,目前已获得delila和roseal过量表达转基因棉花多个株系,分别为pGWB408-delila(De1408)的材料获得32个系共67株转基因棉花植株；pEX3::pGWB407-delila(De1407)的材料获得38个系共75株转基因棉花植株；pGWB408-roseal(Ros408)的材料获得33个系共99株转基因棉花植株；pEX3::pGWB407-roseal (Ros407)的材料获得43个系共91株转基因棉花植株。分别提取了不同植株的基因组DNA(gDNA),PCR检测表明De1408、De1407、Ros408、 Ros407植株的阳性率分别为：91%、93.9%、76%、85.7%。3.为了后续便于筛选纯合株系,对gDNA水平上的鉴定为阳性的部分转基因单株进行Southern blot。结果显示：De1408、De1407、Ros408、Ros407载体中以单拷贝方式插入的株数分别为6株、9株、7株和4株。4.为了检测转入目的基因的表达水平,选取以单拷贝插入的转基因阳性植株进行delila和roseal基因的荧光实时定量RT-PCR分析。结果显示：delila基因在De1408中的L2、L4、L7的15DPA纤维和叶片中均有不同程度的表达,delila基因在Del407中的L14、L15、L18的15DPA纤维中均有不同程度的表达；roseal基因在Ros408中的L30、L28、L29和L33的开花后15天(Days post anthesis,DPA)纤维和叶片中均有不同程度的表达,roseal基因在Ros407中的L24、L27、L26和L23的15DPA纤维中均有不同程度的表达。delila和roseal基因在野生型YZ-1中都没有表达,表明外源基因在转基因棉花中已有转录水平的表达。5.为了进一步研究delila和roseal基因在棉花叶片色素合成及棉纤维色素沉积中的功能,选取了花青素合成相关基因DFR、ANS、CHI、F3H和ANR在转基因棉花的15DPA纤维和叶片中进行表达分析。结果表明：DFR基因在Ros408转基因棉花植株的15DPA纤维中表达量上调；DFR和ANR基因在Ros408转基因棉花叶片中表达量上调；ANR基因在Ros407转基因棉花植株的15DPA纤维中表达量上调,推测roseal基因可能调控DFR和ANR基因进而调控花青素及纤维色素的合成。ANS、CHI和F3H基因在Del408转基因棉花植株的15DPA纤维中表达量上调；ANR基因在Del408转基因棉花植株的叶片中表达量上调；DFR基因在Del407转基因棉花植株的15天纤维中表达量上调；CHI和F3H基因在Del408转基因棉花植株的叶片中表达量下调,推测delila基因可能调控DFR、ANS、CHI、F3H和ANR基因进而调控花青素及纤维色素的合成。6.花青素含量的测定分析,结果显示：在Ros408的叁个株系中植株的大小花蕾、植株茎尖的小叶片、植株的幼嫩苞叶中,花青素含量均显着升高。表明roseal基因参与调控棉花中花青素的合成。7.对Del407和Ros407的阳性转基因棉花植株的纤维色素的提取及扫描分析,结果显示：Ros407和Del407纤维与对照相比吸收峰有所增加,Ros407出现微弱的红移现象,但是Ros407和Del407纤维并没有发生颜色的改变。(本文来源于《华中农业大学》期刊2012-06-01）
黄俊轩,倪志明,桂毓,解瑞彬,刘艳军[6]（2009）在《金鱼草基因转化中卡那霉素筛选压力的确定》一文中研究指出在以抗生素为筛选标记的基因转化中,确定适宜的筛选压力是提高基因转化率的前提。本研究以卡那霉素为筛选标记,在10、20、30、50和100 mg/L的筛选压力下,根据金鱼草下胚轴外植体的生长表现、愈伤组织和芽的分化率确定适宜的筛选浓度。结果表明,适宜卡那霉素的筛选浓度为50 mg/L。以此浓度为筛选压力进行遗传转化所获得的部分再生苗经Southern blot鉴定,均为转化株。(本文来源于《天津农学院学报》期刊2009年02期）
何斌琼[7]（2009）在《转反义NR基因四倍体金鱼草（Antirrhinum majus）的培育》一文中研究指出植物体内乙烯生理作用的发挥是通过乙烯生物合成途径及乙烯信号转导途径来实现的。NR基因是与ETR1基因同源的乙烯受体蛋白基因,它对乙烯的接收和信号的转导直接影响着植株的生理利生长,影响着植物的抗逆性。NR基因不仅调控果实的成熟,而且还与植株的其他生理代谢,生长发育有密切的关系。通过转反义NR基因植株的获得,可以研究NR基因与植株的生理代谢,植株生长、发育和果实成熟等之间的关系,鉴定NR基因的作用;还能获得可用于生产实践的耐贮藏、抗性强的新品种或育种材料。金鱼草(Antirrhinum majus)为玄参科多年生草本花卉。其品种多,花色丰富而艳丽,花期长,是花坛、花境及切花的常用素材。近年来,金鱼草已成为遗传学利分子生物学、特别是转座子、花色素发育与调控和花型发育研究的重要经典材料。金鱼草基因转化报道还较少,由于金鱼草的无菌苗生长势极弱,从而导致以下胚轴为外植体进行农杆菌Ti质粒介导法进行基因转化时,因下胚轴太小太细,再加上农杆菌的侵染作用,外植体在共培养阶段几乎全部死亡,从而使再生率和转化率大大下降,为金鱼草的基因转化工作增加难度。本研究结合了多倍体诱导和转基因工程两种技术,在基因转化前采用培养基中加秋水仙素法进行金鱼草多倍体的诱导,得到直径粗于金鱼草种子苗下胚轴几倍的四倍体再生苗;外源基因的转化采用根癌农杆菌携带反义NR基因与金鱼草四倍体再生苗的茎段共培养,将反义NR外源基因导入金鱼草细胞的染色体组,并通过不定芽进行抗性标记的筛选,对部分转基因四倍体进行PCR、Southern和Northern检测,成功获得抗卡那霉素的四倍体金鱼草植株。论文的研究结果如下:1、以市场所售的二倍体(2n=2x=16)切花金鱼草品种为材料,获得金鱼草的壮曲培养基的配方为1/2MS+BA1 mg/L+IAA0.2 mg/L;幼嫩茎段的分化培养基为MS+BA2.0mg/L+NAA0.1 mg/L;生根培养基的配方为:1/2MS+IBA0.5 mg/L。2、金鱼草四倍体的诱导采用培养基中加秋水仙素法,诱导浓度和时间分别是0.1%、4 d;对部分突变体进行PCR检测和染色体倍性鉴定,表明四倍体金鱼草诱导成功。经反复继代筛选,分离出同质的四倍体金鱼草。3、首次将反义NR基因导入四倍体金鱼草,并获得了部分转基因突变体。其转化体系如下:以四倍体金鱼草的幼嫩茎段为外植体,用OD_(550)值为0.4的农杆菌浸染,转入不含卡那霉素压力再生培养基上黑暗共培养2 d后,再转入含卡那霉素压力的筛选培养基(MS+BA2.0mg/L+NAA0.1 mg/L+卡那霉素50 mg/L+羧苄青霉素500 mg/L),通过压力筛选获得的抗性株为转基因四倍体金鱼草植株。4、对转化苗进行PCR检测,扩增出一条特异的电泳带,该片段为35S启动子的保守序列,由此表明外源基因已经整合到金鱼草细胞中;Southern检测了部分转基因四倍体,35S启动子DNA和转化植株DNA均有杂交信号,而未转化植株的DNA无杂交信号,证明NR基因已被成功转入到金鱼草细胞中;Northern检测了部分转基因四倍体,转化株的mRNA比非转基因植株的表达量弱,证明反义NR基因在转基因植株中与植株得到有效表达。5、对转化株与非转化株的花期进行统计,非转基因植株的花期为15-20 d,瓶插保鲜期为5-6 d,转基因植株花期为25-30 d,瓶插保鲜期为10-12d,表明反义NR基因的转入能够延长金鱼草的鲜花保鲜期。(本文来源于《西南大学》期刊2009-05-20）
沈亚楠,余迪求,岑川,李宝健[8]（1998）在《金鱼草Del基因影响烟草花色素苷的研究》一文中研究指出采用根癌农杆菌介导法，获得转Ｄｅｌ基因的转基因烟草植株．对９株可能的转基因植株（Ｔ０代）ＤＮＡ进行ＮＰＴⅡ基因的ＰＣＲ－Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交分析，其中８株显示ＮＰＴⅡ基因阳性．对其中５株开花的阳性植株进行ＤｅｌＤＮＡ的ＰＣＲ－Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交分析，全部显示ＤｅｌＤＮＡ阳性．Ｋｍ抗性Ｔ１代转基因植株ＤＮＡ进行ＤｅｌＤＮＡ的ＰＣＲ－Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交分析，结果显示全部含有ＤｅｌＤＮＡ．在５３０ｎｍ处测量Ｔ０代转基因植株中花色素苷含量和分布情况，３株转基因烟草的花萼、花冠和雄蕊部位花色素苷含量增加，而在雌蕊和叶中减少．在一定程度上验证了Ｄｅｌ基因的生物学功能，证实并补充了Ｇｏｏｄｒｉｃｈ等关于色素沉积模式的论述．(本文来源于《中山大学学报(自然科学版)》期刊1998年03期）
余迪求,邓庆丽,沈亚楠,李宝健[9]（1996）在《金鱼草基因转化和转基因植株再生》一文中研究指出本实验采用根癌农杆菌ＬＢＡ４４０４（ｐ３５ＳＧＵＳＩＮＴ与金鱼草下胚轴切段共培养，将ＧＵＳ基因导入金鱼草细胞，通过不定芽发生途径获得抗Ｇ４１８再生植株．经ＤＮＡ／ＤＮＡ斑点杂交及ＧＵＳ活性原位组织检测初步证实外源基因ＧＵＳ已整合进金鱼草基因组并得到表达．(本文来源于《热带亚热带植物学报》期刊1996年04期）
金鱼草基因论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
脂氧合酶(lipoxygenase,LOX)是茉莉酸信号途径的关键酶。该研究克隆了金鱼草的LOX基因,命名为AmLOX1。AmLOX1基因的开放阅读框为2 649 bp,编码883个氨基酸。AmLOX1蛋白质的理论等电点为p H6.06,相对分子质量为100.52 k Da。AmLOX1与其他植物的LOX基因均有较高的同源性。实时荧光定量PCR表达分析发现,AmLOX1在金鱼草花中表达量显着高于根茎叶;在花器官中,下瓣的相对表达量最高;在花不同发育阶段中,衰败期的花AmLOX1的相对表达量最高。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
金鱼草基因论文参考文献
[1].付宇辰,刘晓慧,冷平生,胡增辉.金鱼草12-氧-植物二烯酸还原酶基因AmOPR的克隆及表达分析[C].中国观赏园艺研究进展2018.2018
[2].王少杰,刘晓慧,胡增辉,冷平生.金鱼草脂氧合酶基因AmLOX1的克隆及表达分析[J].中国细胞生物学学报.2018
[3].王杰.两个含有hps-phi基因表达载体的构建和功能验证以及金鱼草再生体系的建立[D].上海师范大学.2016
[4].宋倩娜,刘琛,高振蕊,李莹,张弛.热激启动子18.2在金鱼草中启动下游基因表达最适温度条件的筛选[J].生态学杂志.2014
[5].聂园军.金鱼草delila和roseal基因在白色棉中的表达及功能的初步研究[D].华中农业大学.2012
[6].黄俊轩,倪志明,桂毓,解瑞彬,刘艳军.金鱼草基因转化中卡那霉素筛选压力的确定[J].天津农学院学报.2009
[7].何斌琼.转反义NR基因四倍体金鱼草（Antirrhinummajus）的培育[D].西南大学.2009
[8].沈亚楠,余迪求,岑川,李宝健.金鱼草Del基因影响烟草花色素苷的研究[J].中山大学学报(自然科学版).1998
[9].余迪求,邓庆丽,沈亚楠,李宝健.金鱼草基因转化和转基因植株再生[J].热带亚热带植物学报.1996