受精素论文_丽娜,付琳,梁磊,娜仁花

导读:本文包含了受精素论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:免疫,绵羊,荧光,载体,质粒,结构,单位。

受精素论文文献综述

丽娜,付琳,梁磊,娜仁花^[1]（2009）在《精子膜表面糖蛋白受精素β的研究进展》一文中研究指出作为少数几种在精卵质膜结合与融合中发挥重要作用的精子膜表面蛋白之一,受精素β是多种哺乳动物精子均具有的重要物质。它是ADAMs家族的一种融合蛋白,具有ADAMs家族的完整结构域;同时,因其结构域中去整合素区域的结构特点在精卵质膜结合与融合过程中扮演着重要角色,而被认为是一种重要的疫苗靶抗原。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2009年08期）

丽娜^[2]（2009）在《绵羊受精素β去整合素结构域的表达及其特异性抗体的制备》一文中研究指出精卵结合机制的研究,一方面是动物受精生理的一个重要理论问题,另一方面在免疫避孕及免疫不孕等实际应用中也具有重要意义。受精素β作为少数几种在精卵质膜结合与融合中发挥重要作用的精子膜表面蛋白之一,是多种哺乳动物精子膜均具有的重要蛋白。它属于ADAMs家族,具有ADAMs家族的完整结构域。在受精素β的多个保守性结构域中,去整合素区域作为卵细胞上整合素的配体是其发挥重要生理功能的最主要的功能区。本研究将绵羊受精素β作为外源性抗原,通过基因重组技术将编码受精素β去整合素结构域的cDNA序列插入表达载体高拷贝质粒PGEX-4T-1中,构建重组质粒PGEX-4T-sf279并转化大肠杆菌BL21(DH3)中,成功地构建了能够稳定表达绵羊受精素β去整合素结构域蛋白的重组大肠杆菌疫苗株。本研究的主要结果和结论如下:1、根据绵羊受精素βcDNA全序列设计其去整合素结构域上下游引物,利用PCR方法扩增编码该区域的cDNA片段,将其插入原核表达载体PGEX-4T-1中,构建重组质粒PGEX-4T-sf279;2、将含绵羊受精素β去整合素结构域cDNA序列的重组质粒PGEX-4T-sf279转化入大肠杆菌BL21(DH3)中,用IPTG诱导成功表达了大量融合蛋白,然后利用GST亲和树脂层析纯化,制备了纯度很高的蛋白抗原。3、免疫6-8周龄昆明小鼠,制备了小鼠抗羊多克隆抗血清。经Western Blot分析显示,多克隆抗血清可与纯化的绵羊重组蛋白发生特异性反应,说明重组蛋白具有抗原活性。.4、本研究为进一步进行绵羊受精素β蛋白在精卵结合和融合过程中的功能研究奠定了基础。(本文来源于《内蒙古农业大学》期刊2009-05-01）

孙中义,靳风烁,李彦锋,张军^[3]（2007）在《鼠受精素β亚单位真核表达载体pSG．SS．YL．Fβ．ECD和pSG．SS．C3d3．YL．Fβ．ECD免疫避孕效应研究》一文中研究指出目的：研究鼠受精素β去整合素结构域(Fβ．ECD)真核表达重组载体 psG．SS．YL．Fβ．ECD 和 pSG．SS．C3d3．YL．Fβ．ECD 的 DNA 免疫避孕效应。方法：应用表达鼠精子抗原 Fβ的两种真核表达载体 pSG．SS．C3d3．YL．Fβ．ECD(C3d3-YL-Fβ组)和 pSG．SS．YL．FB．ECD(YL-Fβ组)肌注免疫雌鼠,通过 ELISA 方法检测其激发雌鼠血清抗 Fβ蛋白 IgG 抗体和阴道分泌物抗 Fβ蛋白 IgA 抗体滴度变化。同时观察其免疫避孕效应。对照组为 PBS 组和空载体 pSG．SS．YL 组(空载体组)。结果：两种真核表达载体均可激发雌鼠产生高水平血清抗 Fβ蛋白 IgG 抗体,阴道分泌物中可出现相应抗 Fβ蛋白 IgA 抗体,免疫后雌鼠生育能力明显降低,雌鼠妊娠率显着降低,一胎产仔数量显着降低,C3d3-YL-Fβ组免疫避孕效果显著好于 YL-Fβ组。结论：真核表达重组载体 pSG．SS．YL-Fβ和 pSG．SS．C3d3．YL-Fβ可有效诱导免疫性避孕效应,以 pSG．SS．C3d3．YL-Fβ效果最佳。(本文来源于《中华医学会第八次全国男科学学术会议论文集》期刊2007-09-01）

孙中义,靳风烁,李彦锋,张军^[4]（2007）在《鼠受精素β亚单位胞外区的真核表达质粒pSG.SS.YL-F_β.ECD的构建与表达》一文中研究指出目的构建表达鼠受精素β(Fβ)胞外区的真核表达重组质粒pSG.SS.YL-Fβ.ECD并对其表达进行检测。方法应用PCR方法获得鼠Fβ的cDNA片断,将其插入pSG.SS.YL中,经酶切鉴定正确后转染HEK293细胞,并利用间接免疫荧光结合激光共聚焦技术对Fβ的表达进行检测。结果构建成功后的pSG.SS.YL-Fβ.ECD在HEK293细胞中能够表达Fβ。结论Fβ在真核细胞中的成功表达为后续研究Fβ的高表达对受精过程的影响奠定了基础。(本文来源于《重庆医学》期刊2007年09期）

孙中义^[5]（2007）在《鼠避孕DNA疫苗受精素β_（.ECD）-C3d3的制备及其避孕效应的实验研究》一文中研究指出背景与目的:目前虽然己有多种药物、工具及手术用于控制生育,但仍缺乏能为两性所普遍接受的理想避孕措施,随着基因重组技术的发展和人们对受精过程的分子基础和详细机理认识的深入,免疫性避孕疫苗将可能成为控制生育的理想措施。阻断精-卵结合是免疫性避孕研究的热点,精子抗原受精素(fertilin)在精子与卵子透明带(zona pellucida,ZP)结合及与精-卵膜的结合和融合过程中发挥重要作用,是具有重要潜在价值的睾丸组织特异性抗原,受精素单克隆抗体PH-30可抑制体外受精时精卵质膜融合过程,并且PH-30能够抑制豚鼠无透明带卵细胞与精子结合。受精素是由α和β两个亚单位组成的异质二聚体,其中β亚单位(F_β)是重要的功能单位。血清补体蛋白C3是宿主先天性免疫防御补体系统(complement system,CS)的中心分子,在补体活化的经典途径、替代途径以及甘露聚糖结合凝集途径中均发挥枢纽作用。C3d是C3的裂解产物之一,可通过特异性补体受体2(CR2/CD21)将抗原信号提供给免疫细胞,增强特异性免疫应答,降低免疫系统的活化阈,使无免疫原性或免疫原性弱的抗原亦能产生较强的免疫反应,从而发挥极强的免疫佐剂效应,且由于是自身成分,不会出现完全弗氏佐剂(complete Freund's adjuvant, CFA)等引起的毒性作用。本研究选择F_β胞外段(F_βextracellular domain, F_β. ECD)作为靶抗原,将F_βcDNA中编码胞外段部分的1168bp-2058bp片段分别插入真核表达质粒pSG.SS.C3d3.YL及pSG.SS.YL中,构建可在真核细胞表达分泌型融合蛋白F_(β.ECD)-C3d3及F_(β.ECD)蛋白的质粒pSG.SS.C3d3.YL-F_(β.ECD)及pSG.SS.YL-F_(β.ECD),用作免疫接种的DNA避孕疫苗,观察其避孕效果。方法:1.以质粒pYA3149-F_β为模板,PCR扩增得到编码F_β胞外段(1168bp-2058bp)的cDNA片段,再通过限制性内切酶酶切等步骤,分别将该片段定向克隆入真核表达质粒pSG. SS.C3d3.YL和pSG.SS.YL中,构建分别编码F_(β.ECD)-C3d3融合蛋白基因及F_(β.ECD)蛋白基因的质粒pSG.SS. C3d3.YL- F_(β.ECD)和pSG.SS.YL-F_(β.ECD)。2.经酶切及测序证实构建的真核表达质粒pSG.SS.C3d3.YL-F_(β.ECD)和pSG.SS.YL- F_(β.ECD)符合设计要求。3.采用Western blot、免疫细胞化学染色等技术验证质粒pSG.SS.C3d3.YL-F_(β.ECD)和pSG.SS.YL- F_(β.ECD)转染真核细胞后能表达F_(β.ECD)-C3d3融合蛋白和F_(β.ECD)蛋白。4.将pSG. SS.C3d3.YL-F_(β.ECD) DNA疫苗接种雌性昆明小鼠,观察雌鼠免疫避孕效应,检测免疫小鼠血清中抗F_(β.ECD) IgG及阴道分泌物IgA抗体滴度变化,同时观察雌鼠血清IL-2、INF-γ、IL-4、IL-10水平的变化。5.将pSG. SS.C3d3.YL-F_(β.ECD) DNA疫苗接种雄性昆明小鼠,观察免疫避孕效应,检测免疫小鼠血清中抗F_(β.ECD) IgG抗体滴度变化,同时观察免疫鼠血清IL-2、INF-γ、IL-4、IL-10水平的变化。结果:1.以质粒pYA3149-F_β为模板,PCR扩增获取了编码F_β胞外段的cDNA片段,再通过限制性内切酶酶切等步骤,将该片段定向克隆入真核表达质粒pSG.SS.C3d3.YL和pSG.SS.YL中,构建了编码F_(β.ECD)-C3d3融合蛋白基因及F_(β.ECD)蛋白基因的质粒pSG.SS. C3d3.YL- F_(β.ECD)和pSG.SS.YL-F_(β.ECD)。2.构建获得的真核表达质粒pSG.SS.C3d3.YL-F_(β.ECD)和pSG.SS.YL-F_(β.ECD)经酶切及测序证实符合设计要求。3. Western blot、免疫细胞化学染色等实验验证,质粒pSG.SS.C3d3.YL-F_(β.ECD)和pSG.SS.YL-F_(β.ECD)转染真核细胞后能表达F_(β.ECD)-C3d3融合蛋白和F_(β.ECD)蛋白,融合蛋白中的F_(β.ECD)未因其后串联了C3d3而影响特异性单抗对其进行识别,C3d3也未因与F_(β.ECD)的耦联而丧失与受体结合的生物学活性。4. DNA疫苗免疫雌鼠避孕实验结果显示:pSG.SS.C3d3.YL-F_(β.ECD) DNA疫苗免疫雌鼠后,雌鼠妊娠率降低,一胎产仔数量显着降低,其避孕效应较pSG.SS.YL-F_(β.ECD)显着。特异性抗体在未加强免疫时即已产生,而且滴度高,维持时间长,抗体生成远远强于单独的pSG.SS.YL-F_(β.ECD) DNA免疫。血清IL-2和INF-γ浓度呈降低趋势,IL-4和IL-10浓度呈升高趋势。5. DNA疫苗免疫雄鼠避孕实验结果显示:pSG.SS.C3d3.YL-F_(β.ECD) DNA疫苗免疫雄鼠后,雌鼠受孕率降低,一胎产仔数量显着降低,血清IL-2和INF-γ浓度呈降低趋势,IL-4和IL-10浓度呈升高趋势,其避孕效应较pSG.SS.YL-F_(β.ECD)显着。结论:1.成功构建了编码F_(β.ECD)-C3d3融合蛋白基因及F_(β.ECD)蛋白基因的质粒pSG.SS. C3d3.YL- F_(β.ECD)和pSG.SS.YL-F_(β.ECD)。2.质粒pSG.SS.C3d3.YL-F_(β.ECD)和pSG.SS.YL-F_(β.ECD)转染真核细胞后能表达F_(β.ECD)- C3d3融合蛋白和F_(β.ECD)蛋白。3. pSG.SS.C3d3.YL-F_(β.ECD) DNA疫苗可有效免疫雌鼠,使其妊娠率及一胎产仔数量显着降低,其避孕效应较pSG.SS.YL-F_(β.ECD)显着。pSG.SS.C3d3.YL-F_(β.ECD) DNA疫苗可有效免疫雄鼠,使雌鼠受孕率及一胎产仔数量显着降低,其避孕效应较pSG.SS.YL -F_(β.ECD)显着。4. C3d分子佐剂能升高体液免疫相关细胞因子的表达。综上所述,本研究成功构建了F_(β.ECD)-C3d3 DNA疫苗,可诱导小鼠产生针对F_β的主动免疫反应,产生有效的雌鼠和雄鼠的避孕效应,从而为通过主动免疫方式进行生育控制所需的DNA疫苗的开发和应用奠定了理论和实验基础。(本文来源于《第叁军医大学》期刊2007-05-01）

孙中义,靳风烁,李彦锋,张军^[6]（2007）在《小鼠受精素β亚单位真核表达载体pSG.SS.C3d3.YL-F_β构建及在HEK293细胞中的表达分析》一文中研究指出目的:构建表达小鼠受精素β去整合素结构域(Fβ)的真核表达重组载体pSG.SS.C3d3.YL-Fβ,并对其在HEK293细胞中的表达进行分析。方法:应用PCR方法获得Fβ的cDNA片断,将其插入pSG.SS.C3d3.YL中,经酶切鉴定正确后转染HEK293细胞,并利用间接免疫荧光结合激光共聚焦技术、Western印迹技术、免疫组织化学染色技术及流式细胞仪检测技术对Fβ的表达进行检测。结果:成功构建了Fβ的真核表达重组载体pSG.SS.C3d3.YL-Fβ,该重组载体在HEK293细胞中能够表达Fβ。结论:Fβ在真核细胞中的成功表达为后续研究Fβ的高表达对受精过程的影响奠定了基础。(本文来源于《中华男科学杂志》期刊2007年04期）

娜仁花,旭日干^[7]（2007）在《受精素β基因mRNA在绵羊睾丸组织中的表达》一文中研究指出利用RT-PCR法和原位杂交技术,研究受精素βmRNA在睾丸和附睾中的表达特征。结果显示,受精素βmRNA只有在睾丸组织中表达,并且主要分布在精细管上皮圆形精细胞中,而附睾不同部位均无表达。上述结果表明,受精素βmRNA是睾丸特异性表达的精子膜蛋白。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2007年03期）

张进隆^[8]（2006）在《受精素在精卵结合与融合中作用的研究进展》一文中研究指出哺乳动物的受精过程是一个十分复杂的动态过程,在这一过程中,精子表面的膜蛋白发挥着重要作用。受精素α和β是精子表面的膜蛋白,也是精子表面的特异性抗原。研究发现小鼠和人的受精素基因分别位于5号和8号染色体,只在睾丸中特异性表达。受精素β在精子成熟前分布于整个头部,要在附睾成熟后受精素只分布于头后部区域。受精素β基因敲除的小鼠精子与卵细胞的结合能力明显下降,特异性抗体的抑制作用及合成肽竞争性抑制作用可以抑制精卵结合。受精素β通过去整合素与卵细胞表面的整合素结合,在精卵细胞的结合中发挥着重要的作用。精卵质膜的融合主要是由Izumo蛋白完成。(本文来源于《动物医学进展》期刊2006年07期）

李林林,马恒东^[9]（2006）在《精子膜蛋白受精素(Fertilin)研究进展》一文中研究指出精子膜蛋白受精素(Fertilin)是参与精卵质膜间相互作用最有特征性的候选分子之一。受精素由α、β两个亚基组成,为精子表面的异二聚体跨膜糖蛋白。fertilin-α(Fα)、Fertilin-β(Fβ)可能在精子发生、精子成熟、精子获能及精卵结合和融合中发挥重要作用。(本文来源于《畜禽业》期刊2006年08期）

李世峰,严缘昌,李逸平^[10]（2004）在《受精素和整合素在哺乳动物精卵质膜融合过程中是必需的吗?》一文中研究指出精子膜蛋白受精素 (fertilin)和卵子膜蛋白整合素 (integrin)是精卵质膜融合侯选蛋白中最受关注之一 ,认为它们之间的相互作用介导了精卵质膜的融合。最近的基因剔除研究结果显示 ,受精素被剔除的精子和整合素α6 β1被剔除的卵子仍具有一定的受精能力 ,因此 ,受精素和卵子整合素在精卵质膜融合中的重要作用值得进一步研究。(本文来源于《生命的化学》期刊2004年02期）

受精素论文开题报告

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

精卵结合机制的研究,一方面是动物受精生理的一个重要理论问题,另一方面在免疫避孕及免疫不孕等实际应用中也具有重要意义。受精素β作为少数几种在精卵质膜结合与融合中发挥重要作用的精子膜表面蛋白之一,是多种哺乳动物精子膜均具有的重要蛋白。它属于ADAMs家族,具有ADAMs家族的完整结构域。在受精素β的多个保守性结构域中,去整合素区域作为卵细胞上整合素的配体是其发挥重要生理功能的最主要的功能区。本研究将绵羊受精素β作为外源性抗原,通过基因重组技术将编码受精素β去整合素结构域的cDNA序列插入表达载体高拷贝质粒PGEX-4T-1中,构建重组质粒PGEX-4T-sf279并转化大肠杆菌BL21(DH3)中,成功地构建了能够稳定表达绵羊受精素β去整合素结构域蛋白的重组大肠杆菌疫苗株。本研究的主要结果和结论如下:1、根据绵羊受精素βcDNA全序列设计其去整合素结构域上下游引物,利用PCR方法扩增编码该区域的cDNA片段,将其插入原核表达载体PGEX-4T-1中,构建重组质粒PGEX-4T-sf279;2、将含绵羊受精素β去整合素结构域cDNA序列的重组质粒PGEX-4T-sf279转化入大肠杆菌BL21(DH3)中,用IPTG诱导成功表达了大量融合蛋白,然后利用GST亲和树脂层析纯化,制备了纯度很高的蛋白抗原。3、免疫6-8周龄昆明小鼠,制备了小鼠抗羊多克隆抗血清。经Western Blot分析显示,多克隆抗血清可与纯化的绵羊重组蛋白发生特异性反应,说明重组蛋白具有抗原活性。.4、本研究为进一步进行绵羊受精素β蛋白在精卵结合和融合过程中的功能研究奠定了基础。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

受精素论文参考文献

[1].丽娜,付琳,梁磊,娜仁花.精子膜表面糖蛋白受精素β的研究进展[J].中国畜牧兽医.2009

[2].丽娜.绵羊受精素β去整合素结构域的表达及其特异性抗体的制备[D].内蒙古农业大学.2009

[3].孙中义,靳风烁,李彦锋,张军.鼠受精素β亚单位真核表达载体pSG．SS．YL．Fβ．ECD和pSG．SS．C3d3．YL．Fβ．ECD免疫避孕效应研究[C].中华医学会第八次全国男科学学术会议论文集.2007

[4].孙中义,靳风烁,李彦锋,张军.鼠受精素β亚单位胞外区的真核表达质粒pSG.SS.YL-F_β.ECD的构建与表达[J].重庆医学.2007

[5].孙中义.鼠避孕DNA疫苗受精素β_（.ECD）-C3d3的制备及其避孕效应的实验研究[D].第叁军医大学.2007

[6].孙中义,靳风烁,李彦锋,张军.小鼠受精素β亚单位真核表达载体pSG.SS.C3d3.YL-F_β构建及在HEK293细胞中的表达分析[J].中华男科学杂志.2007

[7].娜仁花,旭日干.受精素β基因mRNA在绵羊睾丸组织中的表达[J].中国畜牧兽医.2007

[8].张进隆.受精素在精卵结合与融合中作用的研究进展[J].动物医学进展.2006

[9].李林林,马恒东.精子膜蛋白受精素(Fertilin)研究进展[J].畜禽业.2006

[10].李世峰,严缘昌,李逸平.受精素和整合素在哺乳动物精卵质膜融合过程中是必需的吗?[J].生命的化学.2004

论文知识图

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