导读:本文包含了移行上皮细胞论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:上皮细胞,膀胱,基质,多普勒,过氧乙酸,转染,细胞。
移行上皮细胞论文文献综述
侯显涛,温华梅,李梅清[1]（2019）在《一例犬膀胱移行上皮细胞癌的诊治》一文中研究指出通过临床基本检查、超声检查、细胞学检查及病理学检查最终确诊一例10岁膀胱移行上皮细胞癌(TCC)病犬,采用全膀胱摘除术且术后经局部及全身化学药物为主的治疗使患犬存活367 d;治疗过程提示,TCC的诊断技术已相对完善,通过手术、化疗等治疗方式可较大程度的改善病犬生存质量与存活时间,但须重视术后及化疗过程中TCC转移的监测,以更好评判预后。(本文来源于《动物医学进展》期刊2019年10期）
李旭[2]（2019）在《SPAG9/HEF1/Rac1信号通路对膀胱移行细胞癌中上皮间充质化过程的影响研究》一文中研究指出目的:研究SPAG9对膀胱癌细胞侵袭和迁移等生物学行为的影响,进一步探究膀胱癌转移机制,寻找新型治疗膀胱癌的靶点。方法:1、运用实时定量PCR和免疫组化技术定量及定性测量SPAG9以及HEF1在膀胱移行上皮癌及癌旁组织中的表达情况。2、构建SPAG9和HEF1特征性沉默和过表达载体,运用RNA干扰技术转染T24和5637细胞构建稳定转染细胞株,通过Transwell迁移和侵袭实验研究不同表达状况的SPAG9/HEF1对细胞迁移侵袭能力的影响。3、构建裸鼠接种模型,研究体内实验中SPAG9的不同表达对HEF1蛋白的影响,同时运用Western Blot技术研究其外情况下SPAG9的不同表达对HEF1的干扰程度。4、查阅文献选定EMT特征蛋白,运用Western Blot分析SPAG9/HEF1不同表达情况下对相关EMT蛋白表程度的影响。5、Western Blot测定HEF1蛋白表达高低对Rac1信号通路的影响,结合复合转染补救实验决定HEF1和Rac1通路在膀胱癌细胞中的具体调节关系。6、统计临床获得标本中分类数据如年龄和肿瘤大小等指征数据与相应标本中SPAG9/HEF1表达高低的相关关系,验证SPAG9和HEF1之间的相关趋势。结果:1、通过对临床采集标本研究我们发现SPAG9和HEF1在膀胱癌中对比癌旁组织均呈现高表达,并具有显着统计学意义(P<0.005)。SPAG9高表达在所有136标本中占84例,比例为61.8%,HEF1高表达在全136例中有94例,占比69.1%。同时SPAG9和HEF1均被发现在低级别膀胱癌中过表情况比例要高于高级别膀胱癌。具体为SPAG9在低级别膀胱癌中过表达占比为88.8%(48/54)对比与高级别的63.4%(56/82),P<0.001;HEF1在低级别膀胱癌中过表达占比为83.3%(45/54)对比与高级别的68.3%(56/82),P<0.05。SPAG9和HEF1两者表达均与肿瘤具体临床参数如肿瘤大小,膀胱肌层浸润情况和肿瘤分级显着相关,并具有统计学意义。2、SPAG9在体内体外实验中均能明显影响HEF1表达,体外实验中经构建稳定转染的shSPAG9和pcDNA3.1-SPAG9的T24和5637细胞株后我们测量了相应HEF1蛋白的表达,敲除SPAG9后HEF1表达显着降低,过表达SPAG9后HEF1在mRNA水平其mRNA表达量相比为对照组3.6倍(P<0.01),Western Blot也显示敲除或过表达SPAG9能显着抑制或增强HEF1蛋白表达水平(P<0.01)。体内实验既裸鼠模型实验中,shSPAG9和pcDNA3.1-SPAG9稳转细胞接种并成瘤后被取出,经免疫组化染色发现转染shSPAG9后对比对照组HEF1表达明显降低,转染pcDNA3.1-SPAG9组对比对照组其HEF1蛋白表达水平显着增高(P<0.05)。3、对稳转shSPAG9和pcDNA3.1-SPAG9的T24和5637细胞实施Transwell侵袭和迁移试验后发现敲除SPAG9能显着降低膀胱移行上皮癌细胞侵袭和迁移的能力,过表达SPAG9能反之提高肿瘤细胞的侵袭迁移能力2-3.5倍(P<0.05)。提取稳转细胞蛋白后Western Blot实验测定EMT相关蛋白显示敲除SPAG9后能降低E-cadherin表达,增强N-cadherin、Vimentin,MMP-2蛋白表达强度,过表达SPAG9后出现结果对比对照组则与上述相反(P<0.05)。4、对HEF1蛋白同样构建敲除(shHEF1)和过表达载体(pcDNA3.1-HEF1),进行Transwell侵袭和迁移实验已经Western Blot测定EMT相关蛋白表达,结果与SPAG9一致,对比对照组shHEF1能降低侵袭和迁移能力,同时提升E-cadherin蛋白表达,降低N-cadherin、Vimentin,MMP-2的表达水平。pcDNA3.1-HEF1则对比对照组结果与shHEF1相反(P<0.05)。此外敲除HEF1表达后,GTP-Rac1蛋白表达降低,过表达HEF1则能增强Rac1蛋白激活水平,GTP-Rac1显着增高。5、通过设计转染组合shSPAG9+pcDNA3.1-HEF1和pcDNA3.1-SPAG9+shHEF1,我们发现过表达HEF1能拮抗敲除SPAG9带来的侵袭和迁移抑制以及HEF1蛋白的表达降低,敲除HEF1则能降低过表达SPAG9带给细胞的恶性迁移和侵袭表型以及HEF1表达的增高(P<0.01)。6、提取shSPAG9和pcDNA3.1-SPAG9转染的T24和5637细胞以及裸鼠瘤体中的蛋白后我们发现shSPAG9能降低Rac1活化度(GTP-Rac1表达),pcDNA3.1-SPAG9则能提升GTP-Rac1蛋白表达,同样构建转染组合shSPAG9+pcDNA3.1-HEF1和pcDNA3.1-SPAG9+shHEF1后我们发现过表达HEF1能提升shSPAG9带来的GTP-Rac1表达降低,反之对比对照组敲除HEF1能降低pcDNA3.1-SPAG9造成GTP-Rac1表达增高。结论:SPAG9可以介导HEF1蛋白的表达,并通过Rac1信号通路来影响膀胱移行上皮癌EMT过程,SPAG9与HEF1具体调节机制以及具体基因结合位点等深层次机制有待研究。(本文来源于《吉林大学》期刊2019-05-01）
缪伟贤[3]（2019）在《表皮生长因子受体和HER2在膀胱移行上皮细胞癌中的过度表达及其意义》一文中研究指出目的分析表皮生长因子受体和HER2在膀胱移行上皮细胞癌中的过度表达及意义。方法选择惠州市中心人民医院收治的100例膀胱移行上皮细胞癌患者(研究组)及健康膀胱组织的体检人群100例(参照组)进行观察,观察时间为2016年1月—2018年6月,针对两组观察对象实施免疫组织化学SP法检验,观察对比两组观察对象之间的指标差异。结果研究组100例膀胱移行上皮细胞癌患者检测后的表皮生长因子受体及HER2的过度表达率明显高于对照组健康人群(对照组无表达),两组相比差异有统计学有意义。研究组中表皮生长因子受体的过度表达在不同病理特征之间存在明显差异,HER2的过度表达与临床分期存在关系差异有统计学意义。结论表皮生长因子受体及HER2在膀胱移行上皮细胞癌中的过度表达及病情发展具有一定的相关性,两个指标均呈现过度表达状态表明患者预后较差。(本文来源于《黑龙江医学》期刊2019年03期）
汪伊新,辜福贤,甘启详,许杰[4]（2018）在《肾脏保留手术治疗输尿管移行上皮细胞癌患者的临床疗效分析》一文中研究指出目的探讨肾脏保留手术治疗输尿管移行上皮细胞癌患者的近远期临床疗效,为临床研究提供参考依据。方法选取2003年1月～2009年12月期间来我院诊治的35例输尿管移行上皮细胞癌患者,回顾性分析行肾脏保留手术治疗的临床资料。观察分析35例患者行肾脏保留手术治疗的近远期临床疗效。结果 35例输尿管移行上皮细胞癌患者年龄<65岁者30例,≥65岁者15例,经钬激光切除术、以及影像学分析等临床分析方法证实,病理分级G1 8例,G2 15例,G2～G3 6例,G3 6例,临床分期Ta期2例,T1期9例,T2期17例,T3期7例。35例患者在年龄、病理分级以及临床分期组内比较差异有统计学意义(P<0.05);35例患者在术后6个月～2年内均进行随访,其中16例患者经膀胱镜复查发现膀胱癌,均行膀胱癌电切术后,14例存活,2例死于心血管疾病;4例患者发生同侧肾盂癌,均行肾盂癌根治术后均存活;5例患者经临床确认并发输尿管狭窄,经过定期更换D-J管,均存活;10例患者输尿管癌局部复发,经行输尿管癌根治术,8例患者存活,2例死于局部复发。术后6月～2年,生存率为88.57%;术后5年随访调查结果显示:存活22例,其中G1 8例,G2 14例,Ta2例,T18例,T212例,均为低分级、低分期患者。死亡13例,大部分为高分级和高分期患者。结论输尿管移行上皮细胞癌是临床上少见的肿瘤,对患者行肾脏保留手术,低分级、低分期的患者预后良好。由于肾脏保留手术具有复发的危险,需要密切观察。应采取相应的治疗手段,延长患者生存时间。(本文来源于《西部医学》期刊2018年10期）
王晓媛,白洁,丛丽丹,高维奇,宋武琦[5]（2017）在《miR-204对人晶状体上皮细胞移行的影响》一文中研究指出目的探讨经体外转染携带有miR-204的重组腺病毒ADV-miR-204对人晶状体上皮细胞移行的影响。方法 ADV-miR-204在293细胞中扩增、分离纯化并滴定病毒滴度;ADV-miR-204体外转染人晶体上皮细胞HLE-B3,细胞划痕法测定ADV-miR-204对HLE-B3移行的影响。结果测定ADVmiR-204的病毒滴度为1.5×109pfu/m L;ADV-miR-204以MOI为10、50、100、200、500分别感染HLE-B372 h后,细胞移行愈合率随着ADV-miR-204的感染浓度增加而降低,MOI=100组与MOI=50组、MOI=10组相比差异显着(P<0.05)。而在MOI=100、MOI=200、MOI=500实验组组间差异不明显。同一感染浓度(MOI=100),不同时间点(0~72 h)下感染组细胞移行愈合率与正常细胞组比较均明显降低(P<0.05)。结论 ADV-miR-204可成功转染人晶体上皮细胞,并可减缓细胞的移行。(本文来源于《哈尔滨医科大学学报》期刊2017年05期）
刘超[6]（2017）在《核因子Kappa-B p65反义寡核苷酸对人晶状体上皮细胞移行和转分化的影响及其抑制后发性白内障的实验研究》一文中研究指出目的:1、体外培养人晶状体上皮细胞株HLEB-3,观察TGF-β32对晶状体上皮细胞的移行和转分化的影响。2、观察不同浓度的NF-K B p65 ASODN和不同剂量的转染剂HiPerFect对晶状体上皮细胞的影响。3、通过应用NF-K B p65 ASODN在体外转染人晶状体上皮细胞,检测其对由TGF-β32诱导的晶状体上皮细胞的移行和转分化的影响,研究NF-K Bp65AS0DN在体外对晶状体上皮细胞的影响。4、采用眼前房内注射法转移NF-K Bp65AS0DN至新西兰大白兔后发性白内障模型眼内,观察其对后发性白内障的作用,探讨后发性白内障的基因治疗方法。材料和方法:1、体外培养人晶状体上皮细胞株HLEB-3,用不同浓度的TGF-β2处理后,在不同的时间点用细胞划痕法观察细胞的移行能力,ELISA法处理细胞爬片后,检测细胞爬片中的阳性细胞数和吸光度值,检测α-SMA蛋白的变化。2、将NF-K B p65 ASODN行全程硫代磷酸化修饰,不同浓度的NF-K B p65 ASODN和不同剂量的转染剂HiPerFect两两混合,探讨细胞活性不受明显影响的情况下,最佳的转染效率时所需的NF-K B p65 ASODN的浓度和转染剂的剂量。3、细胞同步培养后分五组:(1)空白对照组(单纯FSM培养),(2)阴性对照组(HiPerFect转染试加入到FSM中共同培养),(3)TGF-β 2组(T组)(10ng/ml TGF-β2) , (4)TGF-β2 加 ASODN 组(T+A 组)(TGF-β2、HiPerFect 转染试和AS0DN加入到FSM中共同培养),(5)TGF-β 2加MS0DN组(T+M组)(TGF-β32、HiPerFect转染试和MS0DN加入到FSM中共同培养)。不同组细胞继续培养,6h、12h、24h、48h四个不同时间点收集上清液检测α-SMA的含量,采用RT-PCR检测细胞NF-K B mRNA的表达情况。4、将16只新西兰大白兔进行晶状体囊外摘除术制作后发障活体眼动物模型,手术后随即分为四组,每组4只。A组:空白对照组4只白兔8眼:术毕经侧切口向前房注射BSS液100ul; B组:阴性对照组4只白兔8眼:术毕经侧切口向前房注射含3ul HiPerFect的BSS液100ul; C组:AS0DN —次注射组4只白兔8眼:术毕经侧切口向前房注射含3ul HiPerFect和10mol / L的NF-K B p65 AS0DN的BSS液100ul; D组:AS0DN两次注射组4只白兔8眼:术毕和术后第2天分别经侧切口向前房注射含3ul HiPerFect和10mol / L的NF-K Bp65 AS0DN的BSS液100ul。术后第7、14、21、28天用超声角膜测厚仪测量中央角膜厚度,用裂隙灯显微镜观察前房炎症反应和后囊膜的混浊情况,并于实验结束时行HE染色观察后囊膜的病理变化、检测α -SMA的表达和进行RT-PCR检测晶状体上皮细胞中NF-K B p65 mRNA的表达。结果:1、TGF-β 2是晶状体上皮细胞重要的促移行和转分化生长因子,其作用呈现明显的浓度和时间依赖性。不同浓度的TGF-β 2作用48h后,移行距离随着TGF-β2浓度的增加而增加,当浓度为1Ong/ml时作用最强;晶状体上皮细胞在10ng/mlTGF-β2作用下,其移行距离随着作用时间的延长而增加,在48h达到高峰。晶状体上皮细胞在TGF-β2作用下由单层立方形变为长梭形,伸出伪足,逐渐呈现纤维细胞样形态。不同浓度的TGF-β 2作用48h后,细胞爬片中α -SMA的阳性细胞数和吸光度值随着TGF-β 2浓度的增加而增加,当浓度为1Ong/ml时数值最大;晶状体上皮细胞在1Ong/ml TGF-β 2作用下,细胞爬片中α-SMA的阳性细胞数和吸光度值随着作用时间的延长而增加,在48h达到最大值。2、NF-K B p65 AS0DN对HLE B-3细胞的导入率随时间的延长而增加,48h导入率可达60%以上,并且细胞的活性不受影响;随着浓度增加,NF-KBp65AS0DN对HLE B-3细胞的导入率增加,10μ g/ml的转染率最高,再增加浓度转染率增加不明显,对细胞活性影响不明显;当剂量≤3ul时,随着转染剂HiPerFect的增加,对细胞的转染率增加,无明显细胞毒性,当剂量增加为4u时,对细胞的转染率增加不明显,并且表现出细胞毒性。HiPerFect的剂量为3ul,AS0DN的浓度为1Onmol / L对细胞存活率影响小(80. 4%),同时细胞的转染率可高达70. 8%,为最理想转染条件。3、在6h、12h、24h、48h四个不同时间点与空白对照组相比,阴性对照组、T组、T+A组、T+M组上清液α -SMA的浓度显着增加,差异有显着统计学意义(P<0.01);与阴性对照组相比,T组、T+M组上清液α-SMA的浓度显着增加,差异有显着统计学意义(P< 0. 01);与阴性对照组相比,T+A组上清液α -SMA的浓度增加不明显,差异无统计学意义(P>0.05);与T+A组相比,T组、T+M组上清液α-SMA的浓度显着增加,差异有显着统计学意义(P< 0.01) : T组与T+M组上清液α -SMA的浓度之间的差异不明显,差异无统计学意义(P>0. 05)。NF-K B p65 mRNA出现在364 bp处。6h、12h、24h、48h四个不同时间点与空白对照组相比,阴性对照组、T组、T+A组、T+M组NF-K B p65 mRNA的含量显着增加,差异有显着统计学意义(P< 0.01);与阴性对照组相比,T组、T+M组NF-K B p65 mRNA的含量显着增加,差异有显着统计学意义(P< 0.01);与阴性对照组相比,T+A组NF-KBp65mRNA的含量增加不明显,差异无统计学意义(P>0.05);与T+A组相比,T组、T+M组NF-K Bp65mRNA的含量显着增加,差异有显着统计学意义(P< 0. 01) ; T组与T+M组NF-K B p65 mRNA的含量之间的差异不明显,差异无统计学意义(P>0.05)。4、眼前节炎症反应均在一周内消失,组间无统计学差异。术后1周左右,A、B组开始出现后囊膜混浊,随时间延长而逐渐加重,C、D组后囊混浊发生时间均迟于A、B组,混浊程度也较A、B组为轻,差异有显着统计学意义(P< 0. 05)。C、D组之间差异无统计学意义。HE染色后观察到A、B组后囊表面可见多层成纤维细胞生长,细胞排列较为紧密,囊袋周边部皮质增生,同时可见明显纤维素样物质沉积,C、D组后囊表面相对干净,仅有少量细胞增殖,细胞排列较为疏松。A、B组后囊膜α-SMA的表达量较C、D组明显增加,差异有显着统计学意义;A组和B组之间,C组和D组之间差异不明显,无统计学意义。RT-PCR分析结果发现A、B组NF-KBp65mRNA的表达量较C、D组明显增加,差异有显着统计学意义;A组和B组之间,C组和D组之间差异不明显,无统计学意义。结论:1、TGF-β 2可促进晶状体上皮细胞的移行,同时反应细胞间质转分化的α -SMA蛋白的表达增加,应用TGF-β 2刺激体外培养的晶状体上皮细胞可成功建立后发障的细胞模型。2、HiPerFect的剂量为3ul, ASODN的浓度为10nmol / L对细胞存活率影响小(80.4%),同时细胞的转染率可高达70. 8%,为最理想转染条件。3、NF-K B p65 AS0DN可特异性阻断NF-K B p65 mRNA的表达,抑制TGF-β 2诱导的α -SMA的表达和晶状体上皮细胞出现移行和间质转分化。4、采用眼前房内注射法转移NF-K Bp65AS0DN可抑制新西兰大白兔后发性白内障模型眼内后囊膜上α -SMA的表达和NF-K B p65 mRNA的表达,抑制后囊膜的混浊,并且不增加炎症反应和对角膜的影响。(本文来源于《山东大学》期刊2017-06-30）
韩静,刘珺,严宏,闫小龙[7]（2017）在《外加直流电场对人晶状体上皮细胞移行和增殖活力的影响》一文中研究指出目的:观察外加直流电场对人晶状体上皮细胞(lens epithelial cell,LEC)移行和增殖活力的影响。方法:将培养的人晶状体上皮细胞系HLE-B3细胞暴露于电场强度为100、200、400mV/mm的直流电场中,未受电场暴露的细胞作为正常对照组。倒置显微镜观察并记录电场暴露前及暴露后的细胞图像,并计数细胞数目;流式细胞仪检测电场暴露前及暴露24h后的细胞凋亡率和细胞周期。结果:强度为400mV/mm的电场暴露3h后,HLE-B3细胞呈现朝向电场阴极一侧的定向移行。电场持续暴露后,HLE-B3细胞数逐渐减少,在电场作用6h和12h时分别较正常对照组减少12.6%和18.6%,差异均具有统计学意义(P<0.05)。100、200、400mV/mm电场暴露24h后,HLE-B3细胞凋亡率分别为(9.2±1.9)%、(23.9±2.6)%、(54±2.5)%,与正常对照组相比明显增加(P<0.05);细胞周期检测结果显示,HLE-B3细胞进入G_2/M期的比例随电场强度增加逐渐上升,其中200mV/mm和400mV/mm电场中G_((2))/M期细胞比例分别为(13.8±2.2)%和(15.6±2.5)%,与正常对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:外加直流电场可诱导HLE-B3细胞的定向移行,随电场作用时间的延长和电场强度增加,细胞生长受到抑制,同时伴随细胞凋亡增加和细胞周期G_2/M期阻滞。(本文来源于《国际眼科杂志》期刊2017年04期）
周丽[8]（2016）在《彩色多普勒诊断肾盂移行上皮细胞癌1例》一文中研究指出1病例介绍患者,男,62岁,以右侧腰痛伴肉眼血尿就医。自诉5d前无明显诱因出现右腰胀痛,肉眼血尿伴轻度尿频,小便时刺痛等症。来我院超声所见:右肾形态轮廓尚规整,大小约9.4cm×4.8cm,包膜完整。肾窦上部见一大小约3.5cm×2.5cm×2.4cm类圆形低回声团,边缘欠清晰,形态欠规则,部分与肾实质相邻近,内部回声不均匀,见不规则强回声斑与小液性暗区,肿块前方是细带状(本文来源于《湖北科技学院学报(医学版)》期刊2016年03期）
张龙[9]（2016）在《膀胱移行上皮细胞种植改性脱细胞小肠粘膜下基质在家兔尿道重建中的应用》一文中研究指出尿道缺损是泌尿外科的最常见的疾病之一,可发生于先天性疾病如尿道下裂、尿道上裂等疾病,也可以发生于尿道损伤、感染,常伴有损伤后的尿道纤维化瘢痕狭窄。短段的尿道狭窄也可以通过尿道扩张、尿道狭窄切开及尿道狭窄段切除加端端吻合术予以治疗。然而,长段的尿道狭窄或者尿道缺损,需要进行移植物进行修补。目前,临床上常用的移植物包括舌粘膜、颊粘膜及阴茎皮肤。然而,口腔粘膜的取材会带来一定的并发症,如张口困难、感染、溃疡、麻木、疼痛等。另外,长段的尿道狭窄术后易复发,对于该类患者,往往面临取材来源不够。因此,需要寻求更广泛来源的尿道替代移植物。组织工程技术的迅速发展,为尿道重建提供了新的治疗途径。然而,Chapple等最近认为在组织工程技术大规模的应用于临床之前应该继续研究以寻找出更加合适的组织工程材料。目前,报道较多组织工程材料的主要包括化学合成材料、天然生物基质类材料、天然生物材料的提取物,以及不同类材料的聚合物。其中,小肠粘膜下基质(SIS)属天然生物基质类材料,具有天然的细胞与组织兼容性,且含括胶原、纤维连接蛋白、GAG及生长因子和信号蛋白等,能促进细胞生长与迁移。但其结构致密,不利于营养液的渗透与代谢物质的交换。另外,该类基质常规脱细胞后仍具有少量的异体细胞核成分的残余,会引起宿主的慢性炎症反应。理想的组织工程支架材料应该具有叁维(3D)多孔结构及最少的异体细胞核成份的残余。本实验通过过氧乙酸氧化SIS制作出具有3D多孔结构的改性SIS,同时也最大限度地去除了异体的细胞核成分残余。我们进一步评价膀胱移行细胞种植这种经过氧乙酸(Peracetic acid, PAA)改性的小肠粘膜下基质(SIS)在家兔尿道重建中的应用效果。本研究共分以下叁部分：第一部分：PAA改性脱细胞SIS基质的制备目的：制作出3D多孔的SIS支架材料,并评估其表征、力学性能方法：取新鲜的猪小肠组织,机械方法游离出粘膜下层及浆肌层,去除上皮层,分离出小肠粘膜下基质,置入蒸馏水预脱细胞处理,PAA改性SIS组加5%过氧乙酸(PAA),而无PAA改性组加PBS液,然后两组均置入1%Triton X-100。最后75%乙醇消毒,无菌纯净水保存备用。取材行HE、MASSON染色、扫描电镜观察。应用密度瓶法测定两组基质材料的空隙率。取材大小5mmx60mm,使用万能试验机测定其力学性能,包括最大拉长、最大强度及杨模量大小。统计分析两组SIS材料在形态学和力学性能间的差异。结果：未经PAA处理的SIS结构致密,且有少量细胞成分残余,而经PAA处理的SIS呈3D多孔状,几乎没有细胞核成分残余。SIS的上皮面电镜结果显示经5%PAA处理SIS表面孔径明显增加,经过测量分析后,脱细胞新鲜SIS的孔径值为1.75±0.32μm,而经过PAA氧化处理后的SIS孔径值为5.16±1.831μm,无PAA处理的SIS空隙率为18.5±2.6%,而经过PAA处理后的SIS空隙率66.8±3.9%,两者差异均具有显着统计学意义(P<0.01)。经万能拉伸仪测定,脱细胞无PAA处理SIS及经PAA处理的SIS的最大拉伸率分别为16.3±1.6%和15.0±1.2%,最大拉伸强度分别为35.1±7.2 Mpa和24.3±5.6 Mpa,杨氏模量分别为150.4±39.2Mp和118.5±28.4Mpa.结论：经PAA改性的后的SIS具有3D多孔状结构,几乎无异体细胞核成分残余,且仍能维持一定的机械性能,可以作为理想的组织工程材料。第二部分：组织工程膀胱移行上皮细胞-SIS复合物的体外构建目的：体外构建膀胱移行上皮细胞-改性SIS复合物,观察其形态、评估改性SIS的细胞兼容性。方法：取成年新西兰大白兔膀胱壁0.6x0.6 cm,置入PBS液漂洗。将膀胱组织块置入含有DMEM培养基的pronase E蛋白酶中,消化过夜,小心刮取膀胱粘膜层移行上皮细胞。加含有5%胎牛血清、1%青霉素-链霉素的ECM培养基培养,0.05%胰酶传代。制作细胞爬片,应用抗AE1/AE3抗体进行细胞免疫组织化学鉴定。制作PAA改性SIS支架材料和非PAA改性SIS支架材料浸提液,行MTT实验记录两组细胞生长的OD值,了解两组支架材料的细胞兼容性。收集细胞并种植于预先制好的PAA改性SIS支架材料和非PAA改性的SIS支架材料上,继续培养至2周,取材行HE染色、电镜观察。利用RT-PCR技术和Western-blot技术检测Uroplakin基因在UC-经PAA改性SIS复合物的表达变化。结果：膀胱移行上皮细胞在无PAA处理SIS及5%PAA处理后SIS浸提液中生长状态良好,且均优于单纯ECM培养基的趋势,但是差异均无统计学意义(p=0.35)。无PAA处理SIS组细胞生长以单层结构为常见,而在5%PAA处理后SIS组中,细胞生长连接成片,形成2-3层的复层结构。电镜下,无PAA处理SIS上细胞呈多角形,扁平状,伸出伪足,紧密贴附于支架材料上。而在5%PAA处理SIS支架上,细胞分布更加紧密,相互融合呈多层面叁维立体结构,表层细胞多呈圆形、椭圆形及立方形。经PAA改性SIS-UC复合物较无PAA改性-UC复合物高表达Uroplakin基因。结论：采用酶消化法联合机械的刮擦法能分离培养具有活性的膀胱移行上皮细胞,阳性表达AE1/AE3。未经PAA处理的脱细胞SIS与经5%PAA改性处理SIS支架材料与膀胱移行上皮细胞均具有良好的细胞兼容性。经5%PAA改性处理SIS能更好的促进细胞在支架材料上生长并形成复层结构,且能促进膀胱移行上皮向终末分化。第叁部分：组织工程膀胱移行上皮-SIS复合物修补家兔尿道缺损模型的建立与重建效果观察目的：观察组织工程膀胱移行上皮-SIS复合物修补家兔尿道缺损的效果方法：健康成年新西兰家兔18只,分成叁组,膀胱移行上皮细胞种植PAA改性的SIS支架组、膀胱移行细胞种植无PAA改性的SIS材料组,无膀胱上皮细胞种植的经PAA改性SIS组,每组各6只。按照第二部分的方法,构建组织工程膀胱上皮细胞-SIS复合物。再次麻醉家兔,游离腹侧尿道海绵体至粘膜层,建立家兔尿道粘膜缺损模型1.5×0.8cm2,修剪支架材料大小为1.7×1cm2,以补片的方式进行修补。术后抗感染、尿管冲洗,手术后半年行尿道造影检查,大体病理观察及HE、MASSON、免疫组化检测。结果：上皮细胞-5% PAA改性SIS复合物组均存活,尿道通畅,再生尿道粘膜完全再生。病理见复层移行上皮、上皮下平滑肌增生,血管增生。而上皮细胞-无PAA改性SIS复合物组,有尿瘘发生,再生尿道粘膜不完整。病理见上皮不规则,及慢性炎症细胞浸润。单纯PAA改性SIS组有尿道狭窄,尿道粘膜苍白、僵硬、挛缩,病理提示大量纤维结缔组织增生,平滑肌和血管少见。上皮细胞-PAA改性SIS组的上皮及平滑肌表达定量显着优于上皮细胞-无PAA改性组(P<0.05)。平滑肌及血管均优于单纯PAA改性SIS组(P<0.05)结论：膀胱移行上皮细胞种植PAA改性SIS是进行长段尿道缺损修补的理想替代物。(本文来源于《华中科技大学》期刊2016-05-01）
刘冬梅[10]（2015）在《基质金属蛋白酶抑制剂GM6001、MMP2/9InhibitorⅠ、MMP2/9InhibitorⅡ对人晶体上皮细胞移行的影响》一文中研究指出目的:比较叁组基质金属蛋白酶抑制剂GM6001、MMP2/9InhibitorⅠ和MMP2/9InhibitorⅡ对人晶状体上皮细胞(1ens epithelial cells,LECs)移行的抑制效果以及对细胞活性的影响,期望寻找出一种能安全有效预防后囊膜混浊(posterior capsular opacification,PCO)的药物。方法:体外培养LECs,取传至3-4代的细胞培养于6孔板中,当细胞大部分融70%合后改用无血清培养基作用12h,分别加入不同浓度(0.25,0.5,1,2,4,8,16,32,64,128μmol/L)GM6001、MMP2/9InhibitorⅠ和MMP2/9InhibitorⅡ,以基础培养液培养的细胞作对照组,用200μl无菌枪头在细胞层中划出一条两边平行的无细胞区,继续培养24h,计算每组细胞移行的平均距离及抑制率。在测定细胞活性时,取传至第2代或第3代LECs,把细胞密度调整为5×105个/ml,接种至96孔板,200μl/孔,培养箱中常规培养24 h,分别加入128μmol/L的GM6001、64μmol/L的MMP2/9InhibitorⅠ和32μmol/L的MMP2/9InhibitorⅡ,以基础培养液培养的细胞作对照组,培养24 h后用MTT法测定吸光度(OD)值,分析细胞活性。结果:(1)细胞生长状态良好,排列不规则,贴壁生长呈梭形或多边形。(2)细胞经不同浓度的GM6001、MMP2/9InhibitorⅠ和MMP2/9InhibitorⅡ作用时均为随着浓度的增大,移行距离逐渐减少,呈剂量依赖性,秩相关指数rs分别为0.847、0.856和0.9016,均>0.5。(2)MMP2/9InhibitorⅡ组细胞移行的平均距离明显低于其余叁组:对照组细胞移行的平均距离设为1,当细胞经32μmol/L的叁组抑制剂作用时,GM6001组、MMP2/9InhibitorⅠ组和MMP2/9InhibitorⅡ组细胞移行的平均距离分别为:0.478±0.091、0.294±0.088和0.191±0.081,差异有统计学意义(F=116.031,P<0.01)。(3)四组细胞的活性无明显差异,对照组、GM6001组、MMP2/9InhibitorⅠ组和MMP2/9InhibitorⅡ组的OD值分别为0.607±0.0163、0.567±0.0151、0.583±0.0103和0.595±0.0138,总体差异无统计学意义(F=1.403,P>0.05)。结论:叁组抑制剂均可有效地抑制制LECs的移行,且没有明显影响细胞的活性。其中,MMP2/9InhibitorⅡ的抑制作用最明显,可能为临床上药物预防后囊膜混浊提供参考。(本文来源于《山西医科大学》期刊2015-05-25）
移行上皮细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:研究SPAG9对膀胱癌细胞侵袭和迁移等生物学行为的影响,进一步探究膀胱癌转移机制,寻找新型治疗膀胱癌的靶点。方法:1、运用实时定量PCR和免疫组化技术定量及定性测量SPAG9以及HEF1在膀胱移行上皮癌及癌旁组织中的表达情况。2、构建SPAG9和HEF1特征性沉默和过表达载体,运用RNA干扰技术转染T24和5637细胞构建稳定转染细胞株,通过Transwell迁移和侵袭实验研究不同表达状况的SPAG9/HEF1对细胞迁移侵袭能力的影响。3、构建裸鼠接种模型,研究体内实验中SPAG9的不同表达对HEF1蛋白的影响,同时运用Western Blot技术研究其外情况下SPAG9的不同表达对HEF1的干扰程度。4、查阅文献选定EMT特征蛋白,运用Western Blot分析SPAG9/HEF1不同表达情况下对相关EMT蛋白表程度的影响。5、Western Blot测定HEF1蛋白表达高低对Rac1信号通路的影响,结合复合转染补救实验决定HEF1和Rac1通路在膀胱癌细胞中的具体调节关系。6、统计临床获得标本中分类数据如年龄和肿瘤大小等指征数据与相应标本中SPAG9/HEF1表达高低的相关关系,验证SPAG9和HEF1之间的相关趋势。结果:1、通过对临床采集标本研究我们发现SPAG9和HEF1在膀胱癌中对比癌旁组织均呈现高表达,并具有显着统计学意义(P<0.005)。SPAG9高表达在所有136标本中占84例,比例为61.8%,HEF1高表达在全136例中有94例,占比69.1%。同时SPAG9和HEF1均被发现在低级别膀胱癌中过表情况比例要高于高级别膀胱癌。具体为SPAG9在低级别膀胱癌中过表达占比为88.8%(48/54)对比与高级别的63.4%(56/82),P<0.001;HEF1在低级别膀胱癌中过表达占比为83.3%(45/54)对比与高级别的68.3%(56/82),P<0.05。SPAG9和HEF1两者表达均与肿瘤具体临床参数如肿瘤大小,膀胱肌层浸润情况和肿瘤分级显着相关,并具有统计学意义。2、SPAG9在体内体外实验中均能明显影响HEF1表达,体外实验中经构建稳定转染的shSPAG9和pcDNA3.1-SPAG9的T24和5637细胞株后我们测量了相应HEF1蛋白的表达,敲除SPAG9后HEF1表达显着降低,过表达SPAG9后HEF1在mRNA水平其mRNA表达量相比为对照组3.6倍(P<0.01),Western Blot也显示敲除或过表达SPAG9能显着抑制或增强HEF1蛋白表达水平(P<0.01)。体内实验既裸鼠模型实验中,shSPAG9和pcDNA3.1-SPAG9稳转细胞接种并成瘤后被取出,经免疫组化染色发现转染shSPAG9后对比对照组HEF1表达明显降低,转染pcDNA3.1-SPAG9组对比对照组其HEF1蛋白表达水平显着增高(P<0.05)。3、对稳转shSPAG9和pcDNA3.1-SPAG9的T24和5637细胞实施Transwell侵袭和迁移试验后发现敲除SPAG9能显着降低膀胱移行上皮癌细胞侵袭和迁移的能力,过表达SPAG9能反之提高肿瘤细胞的侵袭迁移能力2-3.5倍(P<0.05)。提取稳转细胞蛋白后Western Blot实验测定EMT相关蛋白显示敲除SPAG9后能降低E-cadherin表达,增强N-cadherin、Vimentin,MMP-2蛋白表达强度,过表达SPAG9后出现结果对比对照组则与上述相反(P<0.05)。4、对HEF1蛋白同样构建敲除(shHEF1)和过表达载体(pcDNA3.1-HEF1),进行Transwell侵袭和迁移实验已经Western Blot测定EMT相关蛋白表达,结果与SPAG9一致,对比对照组shHEF1能降低侵袭和迁移能力,同时提升E-cadherin蛋白表达,降低N-cadherin、Vimentin,MMP-2的表达水平。pcDNA3.1-HEF1则对比对照组结果与shHEF1相反(P<0.05)。此外敲除HEF1表达后,GTP-Rac1蛋白表达降低,过表达HEF1则能增强Rac1蛋白激活水平,GTP-Rac1显着增高。5、通过设计转染组合shSPAG9+pcDNA3.1-HEF1和pcDNA3.1-SPAG9+shHEF1,我们发现过表达HEF1能拮抗敲除SPAG9带来的侵袭和迁移抑制以及HEF1蛋白的表达降低,敲除HEF1则能降低过表达SPAG9带给细胞的恶性迁移和侵袭表型以及HEF1表达的增高(P<0.01)。6、提取shSPAG9和pcDNA3.1-SPAG9转染的T24和5637细胞以及裸鼠瘤体中的蛋白后我们发现shSPAG9能降低Rac1活化度(GTP-Rac1表达),pcDNA3.1-SPAG9则能提升GTP-Rac1蛋白表达,同样构建转染组合shSPAG9+pcDNA3.1-HEF1和pcDNA3.1-SPAG9+shHEF1后我们发现过表达HEF1能提升shSPAG9带来的GTP-Rac1表达降低,反之对比对照组敲除HEF1能降低pcDNA3.1-SPAG9造成GTP-Rac1表达增高。结论:SPAG9可以介导HEF1蛋白的表达,并通过Rac1信号通路来影响膀胱移行上皮癌EMT过程,SPAG9与HEF1具体调节机制以及具体基因结合位点等深层次机制有待研究。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
移行上皮细胞论文参考文献
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