产β-内酰胺酶菌株的筛选、鉴定及酶学性质初步研究

产β-内酰胺酶菌株的筛选、鉴定及酶学性质初步研究

论文摘要

该文对上海临港地区分离的1株产β-内酰胺酶的菌株的酶学性质进行研究,并初步提高了酶液保存稳定性。通过结合抗生素平板法初筛和碘量法(定性)复筛,获得产β-内酰胺酶的菌株。通过形态学、生理生化试验和16S rRNA序列分析确定该菌株为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus),命名为Bacillus cereus B03。酶学性质研究表明,该酶的最适反应温度为40℃,最适反应pH值为7.0,该酶在4~20℃、pH 5.0~7.5内稳定性较好。Mg2+、Fe2+和Mn2+对酶有不同程度的激活作用,其中Mg2+对酶的激活作用最强。Cu2+、Al3+和Fe3+对酶有不同程度的抑制作用,其中Al3+对酶的抑制作用最强。K+、Ca2+、Zn2+对酶活力的影响作用不是很大。在无菌粗酶液中添加50 g/L NaCl或100 g/L甘油后,由原酶液的保存5 d剩余相对酶活力93%左右延长到了30 d,稳定性效果提升了6倍。菌株B03所产β-内酰胺酶的酶学性质初步研究表明,该酶具有进一步研究和应用的价值。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料与试剂
  •     1.1.1 菌种来源
  •     1.1.2 试剂
  •     1.1.3 培养基
  •   1.2 仪器与设备
  •   1.3 实验方法
  •     1.3.1 产β-内酰胺酶菌株的初步筛选
  •     1.3.2 产β-内酰胺酶菌株的鉴定(碘量法)
  •     1.3.3 β-内酰胺酶活力测定方法
  •   1.4 菌种鉴定
  •     1.4.1 形态学鉴定
  •     1.4.2 生理生化鉴定
  •     1.4.3 16S rRNA基因序列分析和构建系统发育树
  •   1.5 酶学性质初步研究
  •     1.5.1 酶最适作用温度及热稳定性影响
  •     1.5.2 酶最适作用pH及pH稳定性影响
  •     1.5.3 金属离子对酶活力的影响
  •     1.5.4 β-内酰胺酶酶液保存稳定性研究
  • 2 结果与分析
  •   2.1 菌种筛选
  •   2.2 菌种鉴定
  •     2.2.1 菌种形态观察
  •     2.2.2 生理生化鉴定
  •     2.2.3 16S rRNA鉴定及系统发育树构建
  •   2.3 菌株B03酶学性质初步研究
  •     2.3.1 酶最适作用温度及热稳定性影响
  •     2.3.2 酶最适作用pH及pH稳定性影响
  •     2.3.3 金属离子对酶活的影响
  •     2.3.4 β-内酰胺酶酶液保存稳定性
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 陈成,宁喜斌

    关键词: 内酰胺酶,筛选,蜡状芽孢杆菌,酶学性质,稳定性

    来源: 食品与发酵工业 2019年24期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学

    专业: 生物学,一般化学工业

    单位: 上海海洋大学食品学院,上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心,农业部水产品贮藏保鲜质量安全风险评估实验室(上海),国家淡水水产品加工技术研发分中心(上海)

    分类号: TQ925

    DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.021904

    页码: 77-83

    总页数: 7

    文件大小: 792K

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