用于筛查转基因作物成分的质粒标准分子的研制

用于筛查转基因作物成分的质粒标准分子的研制

论文摘要

为弥补传统标准物质的缺乏,构建了一种可用于筛查转基因作物成分的质粒标准分子。首先,通过PCR扩增获得454 bp的RBCL基因、236 bp的CaMV35S启动子以及200 bp的NOS终止子目的片段,经两次重叠延伸PCR扩增将上述3个片段连接成849 bp的重组子。随后,将该重组子克隆至pMD18-T载体,经PCR扩增、测序分析后成功获得阳性重组质粒pMD-RBCL-CaMV35S-NOS。进一步的替代性研究显示,该重组质粒DNA与标准物质基因组DNA的检测分析结果一致。因此,该重组质粒标准分子可作为阳性标准物质用于转基因作物成分的初步筛查检测。

论文目录

  • 1 材料和方法
  •   1.1 材料
  •   1.2 主要试剂
  •   1.3 基因组总DNA的提取
  •   1.4 重叠延伸PCR重组CaMV35S启动子、NOS终止子和RBCL基因
  •   1.5 AT克隆
  •   1.6 PCR鉴定
  •   1.7 序列分析
  •   1.8 替代性分析
  • 2 结果与分析
  •   2.1 RBCL基因、CaMV35S启动子和NOS终止子的扩增
  •   2.2 RBCL基因、CaMV35S启动子和NOS终止子的重叠延伸PCR重组
  •   2.3 PCR鉴定
  •   2.4 序列分析
  •   2.5 替代性研究
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 肖维威,张宝,赵卫,朱利,吴清华

    关键词: 转基因作物,重叠延伸,质粒标准分子

    来源: 生命科学研究 2019年03期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,农业科技

    专业: 生物学,农业基础科学

    单位: 南方医科大学公共卫生学院

    分类号: S188

    DOI: 10.16605/j.cnki.1007-7847.2019.03.003

    页码: 192-199

    总页数: 8

    文件大小: 3435K

    下载量: 79

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