秦岭丹江流域黏细菌的分离及其代谢产物研究

论文摘要

【目的】分离陕西秦岭丹江流域土壤中的黏细菌,收集其代谢产物,对代谢产物成分和活性进行分析。【方法】采用大肠杆菌诱导法和滤纸片诱导法分离从丹江流域采集的18份土壤样品中的黏细菌,用摇瓶发酵得到其代谢产物,采用枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、藤黄微球菌和大肠杆菌作为指示菌对代谢产物进行平板抑菌试验;对4种指示菌抑制活性明显菌株的代谢产物成分进行HPLC和薄层色谱(TLC)分析,采用细胞凋亡法测试了代谢产物组分对HepG2肝癌细胞的毒性。【结果】共分离纯化出23株黏细菌,包括黏球菌属(Myxococcus)15株,珊瑚球菌属(Corallococcus)3株,孢囊杆菌属(Cystobacter)1株,原囊菌属(Archangium)3株,软骨霉状菌属(Chondromyces)1株。抑菌试验表明15号菌株的2号代谢产物对4种指示菌均有不同程度的抑制作用。对HPLC得到的15号菌株2号代谢产物的5号组分进行研究,结果表明,其能明显增加HepG2细胞凋亡。【结论】秦岭丹江流域土样中的黏细菌具有一定的多样性,得到1株活性菌株,其代谢产物具有抑菌活性和抗肿瘤细胞活性。

论文目录

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 土样采集

1.1.2 培养基

（1） WCX培养基。

（2） VY/2培养基。

（3） ST21CX Agar培养基。

（4） CAS液体培养基。

（5） M26培养基。

（6） HT培养基。

（7） V-Y培养基。

（8） MX04培养基。

（9） LB培养基。

（10） MEM基础培养基和DMEM完全培养基。

1.1.3 仪器与试剂

1.1.4 菌种与细胞

1.2 黏细菌的分离、纯化及分类

1.2.1 土样的预处理

1.2.2 土样中黏细菌的诱导

1.2.3 黏细菌的纯化

1.2.4 黏细菌的分类

1.3 黏细菌代谢产物的抑菌活性及鉴定

1.3.1 代谢产物的获得

1.3.2 代谢产物的活性测试

1.3.3 黏细菌的鉴定

1.4 黏细菌代谢产物的HPLC和薄层色谱（TLC）分析

1.5 黏细菌代谢产物的细胞毒性检测

2 结果与分析

2.1 黏细菌的分离与纯化

2.2 黏细菌的分类

2.3 黏细菌代谢产物的抑菌活性

2.4 黏细菌活性代谢产物的HPLC和TLC分析

2.5 黏细菌代谢产物对HepG2的细胞毒性试验结果

3 讨论

4 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 王军,李宏铎,张琨,高磊,万一

关键词: 黏细菌,代谢产物,生物活性,丹江流域

来源: 西北农林科技大学学报(自然科学版) 2019年10期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,农业基础科学,农艺学

单位: 陕西省微生物研究所分子生物学研究中心,陕西省科学院秦岭天然产物工程中心,西安市食品药品检验所微生物室

基金: 陕西省科技厅重点研发计划项目(2017NY-116,2017NY-139),陕西省科学院应用基础研究专项(2015K-12)

分类号: S154.3

DOI: 10.13207/j.cnki.jnwafu.2019.10.008

页码: 63-70+79

总页数: 9

文件大小: 1895K

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秦岭丹江流域黏细菌的分离及其代谢产物研究

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