导读:本文包含了盾叶薯蓣论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:薯蓣,皂苷,转录,根状茎,糖苷酶,曲霉,皂素。
盾叶薯蓣论文文献综述
杨鹏飞,朱烨婷,方旭,钱银环,夏国华[1]（2019）在《加压提取法制备盾叶薯蓣根茎中薯蓣皂苷元》一文中研究指出目的建立加压提取法制备盾叶薯蓣根茎中薯蓣皂苷元。方法单因素试验优化乙醇体积分数、提取温度、料液比、提取时间,在优化条件下制备薯蓣皂苷元,并与直接酸水解法、索氏抽提-常压酸水解法、双相联合酸水解法进行比较。结果最佳条件为将药材粉末与20倍量60%乙醇混合后在130℃下加压提取2.0 h,提取液减压回收乙醇,进行加压双相酸水解,薯蓣皂苷元得率达3.56%,高于3种传统提取方法(2.48%、2.96%、3.37%)。结论该方法简便环保,得率更高,可用于制备盾叶薯蓣根茎中薯蓣皂苷元。(本文来源于《中成药》期刊2019年11期）
李雅静,王丰青,谢彩侠,智惊宇,孟庆博[2]（2018）在《盾叶薯蓣转录组分析及其皂苷元生物合成关键酶基因的挖掘》一文中研究指出目的分析比较盾叶薯蓣根茎与叶片的转录组,挖掘与盾叶薯蓣中皂苷元生物合成途径相关的关键酶基因。方法利用Illumina Hi Seq2000高通量测序技术对盾叶薯蓣根茎与叶片进行转录组测序,对测序结果进行注释分析;并结合根茎与叶片中皂苷元的含量测定结果,挖掘与盾叶薯蓣中皂苷元生物合成途径相关的关键酶基因;最后利用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)技术对部分候选基因的表达模式进行分析。结果共获得了81 660个Unigene,有64.33%在NT、NR、Swiss-Prot、KOG、GO、KEGG数据库中得到注释;根据其表达量与代谢通路分析筛选出29种共227个可能参与盾叶薯蓣中皂苷元生物合成途径的催化酶基因,部分催化酶基因的表达模式与皂苷元含量具有一定相关性;并发现5个盾叶薯蓣内生菌基因。结论研究初步获得了盾叶薯蓣中参与皂苷元生物合成的候选关键酶基因,部分候选酶基因可能参与盾叶薯蓣中皂苷类成分的后修饰过程,并发现盾叶薯蓣根茎中内生菌可能参与其皂苷元的生物合成,为进一步阐明盾叶薯蓣中皂苷元生物合成的分子机制奠定基础。(本文来源于《中草药》期刊2018年16期）
梁沁[3]（2018）在《盾叶薯蓣转录组数据库构建及薯蓣皂苷合成相关基因挖掘》一文中研究指出薯蓣皂苷为甾体皂苷类化合物中的一种,具有抗肿瘤、消炎止痛等活性。同时,薯蓣皂素作为薯蓣皂苷合成途径的上游物质,在药物工业生产中,薯蓣皂素是合成300多种甾醇类激素的前体物质,药品制造产业每年对它的消耗量都很大,因此薯蓣皂素具有“药用黄金”的称号。然而,薯蓣皂苷合成途径至今未被完全解析,其合成路径中的相关基因很多都未被分离。盾叶薯蓣为我国特有种,其是目前薯蓣皂苷元含量最高的植物。本研究以其为研究材料,构建了同一时期不同组织或同一组织不同时期的转录组文库,经过对转录组数据库的分析,我们挖掘到了一些与薯蓣皂苷(元)合成途径的候选基因密切相关的功能基因。主要研究成果如下:(1)通过对叁个盾叶薯蓣的样本(Aug_R、Aug_L、Nov_R)的cDNA文库进行测序,分别得到45367360、55798190、42564054条RawReads,对RawReads过滤后,又分别得到43234636、40686226、53330426条Clean Reads。Clean Read拼接后共得到176406条Transcripts,143245条Unigene。unigene的N50为814bp。将这143245条Unigene与七大数据库(NR,GO,PFAM,KEGG,Swiss-Prot,KOG,NT)比对结果中,成功注释到全部七个数据库的Unigene数目为10655条,占总数的7.43%;注释到NR数据库的Unigene有50797条,占总数(143245条)的35.46%;至少注释到其中一个数据库的Unigene有74908条,占总数的52.29%。(2)薯蓣皂苷合成途径中上游至2,3-氧化鲨烯(2,3-Oxidosqualene)合成阶段基因挖掘中,除MEP途径中的MCT基因没有有全长的Unigene注释外,其余参与该阶段的酶基因都有全长的Unigene注释。c66823_g1注释为MVA途径中的关键酶基因HMGR;c71143_g1注释为MEP途径中的关键酶基因DXR。(3)薯蓣皂苷合成的途径中2,3-氧化鲨烯至胆固醇Cholesterol合成阶段基因挖掘中,本转录组数据库得到5条注释为该阶段中的酶基因的全长Unigene:c73551_g1,c70423_g1,c62143_g1,c57629_g1和c56203_g1,它们分别注释为CAS、、SSR-2、SMO1、CPI和CYP51。(4)薯蓣皂苷合成途径中胆固醇至薯蓣皂苷元合成阶段基因挖掘中,得到485I盾叶薯蓣转录组数据库构建及薯蓣皂苷合成相关基因挖掘条Unigene注释为CYP450,最终筛选出22条Unigene作为参与薯蓣皂苷合成的候选CYP450。(5)薯蓣皂苷合成途径中薯蓣皂苷元至薯蓣皂苷合成阶段基因挖掘中,共得到6条unigene注释为Sterol3-beta-glucosyltransferase,其中有c60958_g1和c59129_g1经分析具有全长序列,这2条Unigene与已报道的薯蓣皂苷C-3位的葡萄糖基转移酶基因序列的相似度分别为46%和42%;注释为鼠李糖基转移酶的Unigene有2条,为:c69762_g2和c60525_g2。(6)薯蓣皂苷合成途径中相关转录因子挖掘中,共得到2491条Unigene注释为转录因子基因(仅占总数的1.74%)。这2491条Unigene中,有299条Unigene为差异表达基因:注释为ZinC的Unigene50条;注释为MYB的Unigene有18条;注释为Bhlh Unigene有11条;注释为AP2/ERF的Unigene有29条;注释为bZIPI的Unigene有15条;注释为MRKY的Unigene有18条。(本文来源于《中国科学院大学(中国科学院武汉植物园)》期刊2018-06-01）
肖婉娜[4]（2018）在《超声辅助酸水解制备盾叶薯蓣中薯蓣皂素的工艺研究》一文中研究指出探讨超声粉碎技术辅助酸水解制备盾叶薯蓣中薯蓣皂素的工艺。通过单因素及正交实验优化细胞粉碎前处理盾叶薯蓣的工艺,最后进行水解和萃取,液相色谱检测薯蓣皂素,计算得率。超声最优工艺是提取功率60%(570 W),提取时间45 min,提取温度70℃,验证实验取得薯蓣皂素的产率为0.880 2%。萃取的最佳条件:采用90~120℃的石油醚回流萃取6 h时薯蓣皂素得率最高。利用超声粉碎技术辅助酸水解制备薯蓣皂素比直接酸解提高了29.88%的产率,应用潜力大。(本文来源于《广州化学》期刊2018年03期）
化文平,韩立敏,魏磊,毕淮龙[5]（2017）在《基于盾叶薯蓣转录组的SNP和SSR位点分析》一文中研究指出盾叶薯蓣是中国特有的甾体激素类药源植物,但关于其种质资源遗传多样性和分子标记辅助育种的研究相对较少。本研究在盾叶薯蓣转录组分析的基础上,进一步挖掘其SNP和SSR分子标记。研究发现,盾叶薯蓣转录组的37 115条unigene中含有124 692个SNP位点,平均每条unigene含3.36个SNP位点。用软件MISA对盾叶薯蓣转录组进行搜索发现13 514个SSR位点分布于11 615条unigene序列中,SSR发生频率为13.66%,平均每7.18 kb含1个SSR位点。共筛选设计出4 329对SSR引物。本研究不仅丰富了盾叶薯蓣的分子标记,为其遗传资源评价、种质资源鉴定与改良提供帮助,而且对盾叶薯蓣功能基因资源的开发利用及其比较基因组学研究具有重要的价值。(本文来源于《分子植物育种》期刊2017年10期）
田林双,赵玉婷,戴传超[6]（2017）在《盾叶薯蓣皂苷水解酶发酵条件优化研究》一文中研究指出从盾叶薯蓣根茎清洗液中,筛选出一株产薯蓣皂苷水解酶菌株Aspergillus sp.,对该菌株产酶发酵条件进行优化研究。单因素试验结果表明,0.3%葡萄糖为碳源、0.4%蛋白胨为氮源,薯蓣皂苷水解酶活力为0.78 U/m L。正交试验结果表明,蛋白胨含量对酶活力的影响较大,产酶发酵培养基最佳配方为0.5%葡萄糖,0.6%蛋白胨,0.2%薯蓣皂苷,0.1%K_2HPO_4,0.05%MgSO_4·7H_2O,0.05%KCl,0.001%FeSO_4·7H_2O。在此最佳培养基配方条件下,薯蓣皂苷水解酶活力为0.96 U/m L。0.2%麦冬、0.2%绞股蓝、0.2%薯蓣叁种混合皂苷作为诱导物时,薯蓣皂苷水解酶活力最高,达1.26 U/m L。(本文来源于《中国酿造》期刊2017年10期）
金明,仙靓,孙丽娜,石硕,张卉[7]（2017）在《盾叶薯蓣中甾体皂苷的分离与结构鉴定》一文中研究指出目的对盾叶薯蓣根茎中甾体皂苷类的化学成分进行研究。方法利用常规柱层析法与制备型HPLC法相结合对盾叶薯蓣中的活性成分进行分离纯化,通过1 H-NMR、13 C-NMR和MS等光谱法鉴定单体化合物的结构。结果从盾叶薯蓣根茎中共分离得到了20个甾体皂苷化合物,其中7个化合物为首次从该植物中发现。结论盾叶薯蓣根茎中主要含有螺甾烷型和呋甾烷型甾体皂苷。(本文来源于《西北药学杂志》期刊2017年04期）
安玫[8]（2017）在《盾叶薯蓣根状茎β-葡萄糖苷酶研究》一文中研究指出β-葡萄糖苷酶(β-D-Glucosidase,EC3.2.1.21),又称β-D-葡萄糖苷葡萄糖水解酶,别名龙胆二糖酶、纤维二糖酶(cellobias,CB或β-G)和苦杏仁苷酶。它属于纤维素酶类,是纤维素分解酶系中重要的组成成分,能够水解结合于末端非还原性的β-D-葡萄糖键,同时释放出β-D-葡萄糖和相应的配基。本研究主要对盾叶薯蓣根状茎β-葡萄糖苷酶进行提纯及基本酶学性质的研究,为进一步研究盾叶薯蓣根状茎中的一种能够将药理活性较低的呋甾皂苷水解为药理活性很高的螺甾皂苷的特殊的β-葡萄糖苷酶--呋甾皂苷26-O-β-葡萄糖苷酶(Furostanol glycoside 26-0-β-glucosidase,F26G)的进一步应用打下基础。研究结果表明:(1)盾叶薯蓣根状茎β-葡萄糖苷酶粗酶液提取条件的优化,根据本研究设计的单因素实验以及叁因素实验,确定了盾叶薯蓣根状茎β-葡萄糖苷酶粗酶液提取的最佳方案为O.O1mol/L、pH7.2的磷酸钾缓冲液在0℃冰水浴条件下抽提3.5h。(2)在纯化的第一阶段采用盐析--硫酸铵沉淀的方法对粗酶液进行第一次分离。经过硫酸铵两次分级沉淀,最终确定硫酸铵沉淀区域为35%～55%时得到的酶活力浓度最大。(3)盐析过后对收集的酶液进行透析脱盐浓缩的处理,浓缩后的样品收集作为下一阶段分离纯化的样品。此时得到的酶活力为152.2U/g。(4)纯化的第二阶段采用的是离子分离层析,采用DEAE-celluloseDE52阴离子交换柱,收集得到酶活性较高的几管酶液,蛋白质洗脱液KCl的浓度为0.12mol/L 和 0.16mol/L。(5)纯化的第叁阶段使用Butyl-650MTOYOPEARL疏水层析柱,得到在洗脱液为0.4mol/L的硫酸铵溶液时目的蛋白开始流出,硫酸铵溶液为0.1mol/L时洗脱出的目的蛋白最多。(6)反应时间在45min,底物浓度为10mmol/L的条件下实验的时间成本和经济成本为最佳。β-葡萄糖苷酶的最适温度为50℃,且在25℃以下环境中比较稳定;最适pH为5,在弱碱性环境中比较稳定。(7)分析实验数据得到Fe2+对盾叶薯蓣根状茎β-葡萄糖苷酶酶活有激活的作用,Cu2+、Zn2+对β-葡萄糖苷酶的抑制作用明显大于实验组其他的金属离子。乙酸和甲醛这两种有机溶剂对β-葡萄糖苷酶酶活的抑制作用最大,但是相对于金属离子来说,抑制作用没有那么明显。对β-葡萄糖苷酶酶活力抑制作用最大的有机物是SDS,其他的有机物对酶活力均有一定程度的抑制作用且抑制程度相差不大。(8)选用四种糖苷底物作为盾叶薯蓣根状茎β-葡萄糖苷酶底物专一性研究发现,β-葡萄糖苷酶水解对硝基苯基β-D-吡喃葡萄糖苷十分高效,作用于对硝基苯基β-D-吡喃半乳糖苷、对硝基苯基β-D-木糖苷、对硝基苯基葡萄糖醛酸苷这叁种糖苷底物时水解作用不明显,β-葡萄糖苷酶对于对硝基苯基β-D吡喃葡萄糖苷水解作用具有专一性。(9)盾叶薯蓣根状茎中β-葡萄糖苷酶的Km值测得为1.31mmol/L,Vmax为2.06mmol/L/min。(本文来源于《武汉大学》期刊2017-05-01）
郭梦真[9]（2017）在《盾叶薯蓣总皂苷提取及微生物转化研究》一文中研究指出盾叶薯蓣,又名黄姜,是我国特有的植物资源,利用盾叶薯蓣生产的薯蓣皂苷元是重要的药物原料。目前,工业上传统的生产薯蓣皂苷元的方法为酸解法。由于酸水解方法对于环境的污染极其严重,因此,寻找绿色清洁的生产薯蓣皂苷元的方法显得尤为重要。本研究通过前期筛选出的能转化盾叶薯蓣皂苷生产薯蓣皂苷元的微生物,对高效提取盾叶薯蓣总皂苷并清洁转化生产薯蓣皂苷元工艺开展研究,主要研究结果如下:(1)建立了超声辅助提取盾叶薯蓣总皂苷的工艺。首先,建立了利用高氯酸显色法测定盾叶薯蓣总皂苷含量的方法,该方法可快速准确测定盾叶薯蓣中总皂苷含量。同时,研究确定了超声提取总皂苷最佳工艺为:乙醇体积分数70%,料液比1:15,超声功率为200 w,超声提取30 min,在该提取条件下,每克盾叶薯蓣干粉可以提取出23±0.3 mg的总皂苷。(2)建立并优化了塔宾曲霉转化总皂苷生产皂苷元的发酵条件。针对塔宾曲霉转化总皂苷的发酵参数开展研究,确定最佳转化条件为:接种量10%,底物浓度2g/L,初始pH 6.0,转化温度37℃。采用优化后的条件进行总皂苷的转化,薯蓣皂苷元的产量可达到19.1±0.3 mg/g盾叶薯蓣干粉,总皂苷转化率达到80%。(3)通过胞外葡萄糖苷酶的催化性质研究,进一步优化了塔宾曲霉转化皂苷的条件,提高了总皂苷的转化率。通过研究该葡萄糖苷酶的催化特性,发现该酶的最适温度是50℃,最适pH值是6.0,Mg~(2+)的添加可提高30%的酶活力。根据该酶以上催化特性,在塔宾曲霉转化总皂苷的后期,提高温度至50℃,薯蓣皂苷元的产量可达到21.2±0.6 mg/g,相比比未升温转化皂苷方式提高了10.5%。综上,本文建立了盾叶薯蓣总皂苷提取及塔宾曲霉转化生产薯蓣皂苷元的技术及工艺,为盾叶薯蓣总皂苷微生物转化清洁生产皂苷元的工业化应用提供了实验依据。(本文来源于《华中科技大学》期刊2017-05-01）
乔洋洋[10]（2017）在《盾叶薯蓣CMK基因和HDS基因的克隆与功能验证》一文中研究指出薯蓣皂苷元(又称皂素)是合成众多甾体类药物的重要中间体。盾叶薯蓣的根状茎富含皂素,是我国皂素生产的主要原料。迄今为止,皂素的生物合成途径还没有被完全阐明,人们普遍认为细胞质甲羟戊酸(MVA)途径所形成的异戊二烯焦磷酸(IPP)及其异构体二甲基丙烯基焦磷酸(DMAPP)是皂素合成的重要前体物质。众所周知,在高等植物的质体中也存在着一条合成IPP和DMAPP的2-甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸(MEP)途径。有报道表明,在一些植物中MEP和MVA途径所合成的IPP和DMAPP存在交流,但在盾叶薯蓣中这种交流是否存在、MEP途径是否参与皂素生物合成等问题尚未见报道。为了今后探讨这些问题,本研究利用RT-PCR和RACE等技术克隆得到了盾叶薯蓣MEP途径的4-胞苷5-磷酸-2-C-甲基-D-赤藓糖醇激酶(CMK,MEP途径的第四个酶)和4-羟基-3甲基-2赤藓磷酸合酶(HDS,MEP途径的第六个酶)的cDNA基因,并验证了它们功能。主要研究结果如下:1、盾叶薯蓣CMK的cDNA基因(命名为DzCMK)全长1303 bp,包含一个1170 bp的开放阅读框,60 bp的5’非翻译区(5’untranslational region,5’UTR)和73 bp的3’非翻译区(3’untranslational region,3’UTR)。DzCMK编码一个由389个氨基酸残基组成的蛋白(DzCMK)。该蛋白的预测分子量为42.99 KD、等电点为6.77;其氨基酸序列与其它植物的CMK的一致性比较高,与巴西橡胶树CMK的一致性高达82%;具有CMK蛋白叁个典型的结合域,Motif A、Motif B和Motif C,并在N末端有一个有44氨基酸残基组成的质体信号肽。2、盾叶薯蓣HDS的cDNA基因(命名为Dz HDS)全长2488 bp,包含一个2250 bp的开放阅读框,60 bp的5’UTR和178 bp的3’UTR。DzHDS编码一个由749个氨基酸残基组成的蛋白(DzHDS)。该蛋白的理论分子量为82.7 KD、等电点为6.08,在N末端有一个有43氨基酸残基组成的质体信号肽,其氨基酸序列与其它植物HDS也有比较高的一致性,其中与菠萝的一致性最高(88%)。3、分别构建了DzCMK和DzHDS大肠杆菌表达载体pTrc-DzCMK和pTrc-DzHDS,并将它们分别与pAC-BETA质粒共转化大肠杆菌。结果发现,含pTrc-DzCMK与pAC-BETA双质粒的菌落和含pTrc-DzHDS与pAC-BETA双质粒的菌落的黄色比含pAC-BETA与p Trc双质粒菌落颜色明显要深,表明DzCMK基因和DzHDS基因在大肠杆菌的表达增强了大肠杆菌β-胡萝卜素的合成,证明DzCMK和DzHDS是MEP途径中有功能的基因。4、分别把DzCMK和DzHDS基因信号肽编码序列(CMKP和HDSP)与绿色荧光蛋白(GFP)基因一起构建融合基因,CMKP-GFP和HDSP-GFP,并分别将它们克隆到植物双元表达载体pCAMBIA2×35S-Tnos中,得到pCAMBIA2×35S-CMKP-GFP-Tnos和pCAMBIA2×35S-HDSP-GFP-Tnos两个植物表达载体。将这两个载体分别导入根癌农杆菌后,利用农杆菌介导法转化烟草,并获得转基因再生植株。制备转基因烟草叶片原生质体,通过激光共聚焦显微镜观察发现,CMKP-GFP融合蛋白和HDSP-GFP融合蛋白都定位在叶绿体中,这与DzCMK和DzHDS是质体MEP代谢途径的酶相吻合。(本文来源于《湖北大学》期刊2017-05-01）
盾叶薯蓣论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的分析比较盾叶薯蓣根茎与叶片的转录组,挖掘与盾叶薯蓣中皂苷元生物合成途径相关的关键酶基因。方法利用Illumina Hi Seq2000高通量测序技术对盾叶薯蓣根茎与叶片进行转录组测序,对测序结果进行注释分析;并结合根茎与叶片中皂苷元的含量测定结果,挖掘与盾叶薯蓣中皂苷元生物合成途径相关的关键酶基因;最后利用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)技术对部分候选基因的表达模式进行分析。结果共获得了81 660个Unigene,有64.33%在NT、NR、Swiss-Prot、KOG、GO、KEGG数据库中得到注释;根据其表达量与代谢通路分析筛选出29种共227个可能参与盾叶薯蓣中皂苷元生物合成途径的催化酶基因,部分催化酶基因的表达模式与皂苷元含量具有一定相关性;并发现5个盾叶薯蓣内生菌基因。结论研究初步获得了盾叶薯蓣中参与皂苷元生物合成的候选关键酶基因,部分候选酶基因可能参与盾叶薯蓣中皂苷类成分的后修饰过程,并发现盾叶薯蓣根茎中内生菌可能参与其皂苷元的生物合成,为进一步阐明盾叶薯蓣中皂苷元生物合成的分子机制奠定基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
盾叶薯蓣论文参考文献
[1].杨鹏飞,朱烨婷,方旭,钱银环,夏国华.加压提取法制备盾叶薯蓣根茎中薯蓣皂苷元[J].中成药.2019
[2].李雅静,王丰青,谢彩侠,智惊宇,孟庆博.盾叶薯蓣转录组分析及其皂苷元生物合成关键酶基因的挖掘[J].中草药.2018
[3].梁沁.盾叶薯蓣转录组数据库构建及薯蓣皂苷合成相关基因挖掘[D].中国科学院大学(中国科学院武汉植物园).2018
[4].肖婉娜.超声辅助酸水解制备盾叶薯蓣中薯蓣皂素的工艺研究[J].广州化学.2018
[5].化文平,韩立敏,魏磊,毕淮龙.基于盾叶薯蓣转录组的SNP和SSR位点分析[J].分子植物育种.2017
[6].田林双,赵玉婷,戴传超.盾叶薯蓣皂苷水解酶发酵条件优化研究[J].中国酿造.2017
[7].金明,仙靓,孙丽娜,石硕,张卉.盾叶薯蓣中甾体皂苷的分离与结构鉴定[J].西北药学杂志.2017
[8].安玫.盾叶薯蓣根状茎β-葡萄糖苷酶研究[D].武汉大学.2017
[9].郭梦真.盾叶薯蓣总皂苷提取及微生物转化研究[D].华中科技大学.2017
[10].乔洋洋.盾叶薯蓣CMK基因和HDS基因的克隆与功能验证[D].湖北大学.2017
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